学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

厚朴有效成分分离及中药对活性氧清除率测定方法研究

作　者: 田益玲
导　师: 陈冠华；崔同；魏显有
学　校: 河北农业大学
专　业: 农产品加工及贮藏工程
关键词: 羟自由基超氧阴离子自由基过氧化氢厚朴酚和厚朴酚非水毛细管电泳动力学分光光度法荧光分光光度法苯甲酸苯胺甲药提取物
分类号: O658.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2002年
下　载: 327次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

本文建立了测定中药对生物体中三种常见活性氧（羟自由基、超氧阴离子自由基和过氧化氢）清除率的新方法，为筛选可清除这三种活性氧的物质研究提供了一种便捷的途径；另外，对目前毛细管电泳领域中十分活跃的非水毛细管电泳的分离影响因素进行了研究，在此基础之上建立了厚朴酚与和厚朴酚的非水毛细管电泳分离新方法。弱荧光物质苯甲酸可以和·OH反应生成强荧光产物。中药提取物可以清除反应体系中的·OH，使产物的生成量减少，从而使溶液的荧光增加程度降低。据此原理建立了一种测定中药对·OH清除率的新方法。研究表明，在紫外光照射H₂O₂的·OH产生体系中，当照射时间为20min时，·OH产生率达到饱和；当H₂O₂与苯甲酸的摩尔比为30:1时，·OH可与苯甲酸完全反应；当体系中的苯甲酸浓度为8.5mmol/L时，产物荧光响应随H₂O₂浓度变化的线性范围是2.2～80mmol/L。测得厚朴和山茱萸清除·OH的IC₅₀分别为1.025mg/L和515.3mg/L，与分光光度法测定结果的一致性较好。黄嘌呤氧化酶可催化黄嘌吟反应生成尿酸，同时产生O₂。O₂可以氧化四氮唑蓝（NBT）生成甲臜，中药提取物可以清除溶液中的O₂，使甲臜的生成速度降低。据此原理，利用动力学分光光度法建立了一种测定中药对超氧阴离子清除率的新方法。研究了反应时间对甲臜吸光度和反应速度的影响，指出灵敏测定时段在反应时间为2—7min之间。本法测得的抗坏血酸对O₂的清除率与文献报道值一致。测得厚朴和杜仲对O₂的IC₅₀分别为7.580mg/L和323.8mg/L。基于苯胺可以被H₂O₂氧化为硝基苯，从而使其荧光猝灭的原理建立了一种测定中药对H₂O₂清除率的新方法。研究表明：在50mmol/L磷酸盐缓冲液中，当pH为7.6时，苯胺荧光强度接近于最大值，且与人体体液pH一致；而当乙醇浓度为50％（V/V）时，散射光干扰达到最小值，荧光强度达到最大值。当苯胺浓度为11O22o！几，N2O2的浓度小于1mmd几时，苯胺荧光的粹灭程度＼H贝；浓度Y线性关系。在此条件下测定了厚朴和杜仲对HZOZ的清除率，结双与鲁术诺化学发光法测定值一致。建立了中药厚朴中主要活性氧清除剂——厚朴酚与和厚朴酚的1卜水毛细管屯泳分离分析方法。对非水溶剂的选择、不同酸根阴离子的影响、添加hlJ的选择及加量和p＊“的影响进行了研究，确定非水介质为：乙睛、甲酞胺、甲醇的混合比例力12：！0c。 V：V：V)，缓冲介质是 60mmoU Tris，水的添加浓度为 5％，叫醋酸调u pH”为 8且 6。在该条件下对中药厚朴中的的厚朴酚与和厚朴酚进行了分离。厚朴酚与和厚朴酚的＿工作曲线sj别y］ Y＝7685．56＋11388265．36X 和 Y＝23744．94＋17697231．73X，相关系数分别达到 0．9996和 0．9998。

厚朴有效成分分离及中药对活性氧清除率测定方法研究

内容摘要

全文目录

相似论文