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Aβ对大鼠海马神经元突触后膜AMPA受体亚基的作用及其分子机制

作　者: 巴薇
导　师: 陈建国；王芳
学　校: 华中科技大学
专　业: 药理学
关键词: β淀粉样蛋白 AMPA受体 GluR2亚基网格蛋白
分类号: R749.16
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

第一部分Aβ_25-35对大鼠原代培养海马神经元AMPA受体亚基表达的影响目的:探讨与AD发生密切相关的β淀粉样蛋白（Aβ）对原代培养大鼠海马神经元AMPA受体亚基的影响。方法:将原代培养的大鼠海马神经元随机分为正常对照组和模型组。其中模型组给予25μM Aβ_25-35孵育24小时,分别提取细胞总蛋白和膜蛋白,采用western blotting结合免疫荧光双标技术,观察各组神经元总蛋白和膜蛋白中AMPA受体的变化。结果:给予Aβ_25-35孵育24小时后,总蛋白中GluR1和GluR2亚基含量较正常组细胞明显下降,GluR3亚基含量略有下降;同时膜蛋白中GluR1和GluR2含量亦有所下降;分析膜蛋白/总蛋白的比值发现,Aβ_25-35可使GluR2在神经元膜上表达减少,相对增加GluR1亚基在膜上的表达。结论:Aβ_25-35可使原代培养大鼠海马神经元总蛋白和膜蛋白中AMPA受体三种亚基GluR1、GluR2、GluR3含量均下降,同时GluR2膜上表达减少,相对增加GluR1膜上表达,提示Aβ_25-35可相对促进不含GluR2的AMPA受体转运至神经元膜表面。第二部分Aβ_25-35影响大鼠原代海马神经元AMPA受体亚基表达的机制目的:探讨网格蛋白介导的AMPA受体内化在Aβ_25-35所致的AMPA受体GluR2亚基在细胞膜上表达减少中的作用。方法:采用预孵育高渗蔗糖（0.45 M）20分钟后,再给予Aβ_25-35孵育24小时,然后提取细胞膜蛋白进行western blotting,观察各组细胞膜上GluR2亚基含量的变化。结果:预孵育高渗蔗糖（0.45M）20分钟,可阻止Aβ_25-35导致的细胞膜蛋白中GluR2的含量下降。结论:由于高渗蔗糖可干扰网格蛋白,因此western blotting实验结果提示,Aβ_25-35下调细胞膜AMPA受体的GluR2亚基表达,该作用可能与网格蛋白介导的AMPA受体内化途径有关。

全文目录

缩略词表  5-6
中文摘要  6-8
Abstract  8-10
前言  10-13
第一部分 Aβ_(_(25-35))对大鼠原代培养海马神经元AMPA 受体亚基表达的影响材料与方法  13-31
  材料与方法  13-19
  结果  19-27
  讨论  27-29
  参考文献  29-30
  小结  30-31
第二部分 Aβ_(25-35)影响大鼠原代海马神经元AMPA 受体亚基表达的机制材料与方法  31-36
  材料与方法  31-33
  结果  33-34
  讨论  34-35
  参考文献  35
  小结  35-36
全文总结  36-39
综述  39-53
  参考文献  46-53
致谢  53

Aβ对大鼠海马神经元突触后膜AMPA受体亚基的作用及其分子机制

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