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水牛卵母细胞体外成熟前后基因差异表达的研究

作　者: 李希
导　师: 石德顺
学　校: 广西大学
专　业: 动物遗传育种与繁殖
关键词: 水牛卵母细胞体外成熟差异表达基因
分类号: S823
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 127次
引　用: 3次
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内容摘要

体外成熟的卵母细胞是体外受精、核移植、转基因动物等动物胚胎工程技术研究的基本试验材料。虽然水牛卵母细胞体外成熟培养的研究已经取得了很大的进展,但体外成熟卵母细胞质量仍然不如体内成熟的卵母细胞,卵母细胞成熟过程中的基因表达变化规律尚缺乏了解。本研究拟对水牛卵母细胞体外成熟前后差异表达的基因进行研究,以便深入了解水牛卵母细胞成熟的分子机制,为完善水牛卵母细胞体外成熟培养系统提供依据。选用三条锚定引物和八条随机引物,通过mRNA差异显示技术(differentialdisplay reverse transcription polymerase chain reaction,DDRT-PCR)对水牛卵母细胞成熟前后差异表达的基因进行PCR扩增,经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离比较后得到28条差异表达的条带,对其中的9条成功进行了重扩增和克隆测序。结果发现,有6条片段分别比对上牛的RPL31(ribosomal protein L31)基因,LIMHOX(LIM-homeodomain protein)基因,CAF1A(chromatinassembly factor 1,subunitA)基因,eIF4(eukaryotic translation initiation factor 4gamma)基因,RHOBTB2(Rho-related BTB domain containing 2)基因和cep350(centrosome-associated protein 350,transcript variant 1)基因,其中RPL31基因,cep350基因在成熟前表达,成熟后消失,LIMHOX,CAF1A,eIF4,RHOBTB2在成熟后表达,成熟前不表达。片段A4在GenBank上未发现相似性序列,可能为新基因。

全文目录

摘要  4-5
ABSTRACT  5-7
第一部分文献综述  7-22
  第一章卵母细胞成熟培养与MRNA差异显示技术  8-22
    1.卵母细胞成熟过程中的特征性变化  8-10
    2.卵母细胞成熟调控的研究现状  10-15
    3.mRNA差异显示技术  15-21
    4.本研究的意义  21-22
第二部分试验研究  22-50
  第二章水牛卵母细胞体外成熟前后基因的差异表达  23-50
    1 材料与方法  23-34
    2 结果与分析  34-44
    3 讨论  44-49
    4 结论  49-50
参考文献  50-55
主要缩写词(Abbreviations)  55-56
附图  56-60
致谢  60-61
攻读硕士学位期间发表学术论文目录  61

水牛卵母细胞体外成熟前后基因差异表达的研究

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