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石菖蒲提取物对发育期惊厥大鼠海马GAT1和GLT1表达的影响

作　者: 黄瑜
导　师: 毛定安
学　校: 中南大学
专　业: 儿科学
关键词: 惊厥 发育期 γ-氨基丁酸转运体1 谷氨酸转运体1 石菖蒲提取物
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的：研究发育期大鼠反复惊厥后大脑海马区γ-氨基丁酸转运体(γ-aminobutyric acid transport 1, GAT1)和谷氨酸转运体1 (glutamate transport 1, GLT1)表达的变化及石菖蒲提取物(acori graminei rhizome extract, AGR)十预对其的影响,探讨GAT1和GLT1在婴幼儿期惊厥性脑损伤中发病机制中的作用及石菖蒲提取物抗惊厥的可能机制。方法：生后(postnatal, PN)7天的SD大鼠共72只,随机分成三组：对照组、惊厥组、石菖蒲提取物十预组,每组各24只,各组大鼠又随机分成三部分,分别于末次惊厥后(after recurrent seizures, ARS) 1d、3d、7d(相当于PN-13d、15d、19d)断头取脑。通过三氟乙醚反复吸入(连续6天,每天1次)制作发育期大鼠惊厥动物模型。分别采用免疫组织化学方法和Western blot方法检测各组大鼠反复惊厥后1d、3d、7d大脑海马GAT1和GLT1蛋白的表达。结果：(一)免疫组织化学结果显示：①在对照组中GAT 1PN-13d、PN-15d及PN-19d时,对照组之间GAT1免疫组织化学平均光密度(average optical density, AOD)值无显著性差异；PN-13d (ARS-1d), PN-15d (ARS-3d)及PN-19d (ARS-7d)时,惊厥组大鼠大脑海马GAT1免疫组织化学AOD表达较对照组明显增高(P<0.01)；石菖蒲十预组GAT1免疫组织化学AOD较惊厥组明显降低(P<0.01),较对照组无显著性差异；②在对照组中GLT1各时间点免疫组化AOD值无显著性差异；PN-13d(ARS-1d),和PN-19d (ARS-7d)时惊厥组GLT1免疫组化AOD值较对照组明显增高(P<0.01),而PN-15d(ARS-3d)时,较对照组无明显差异：PN-13d, PN-15d和PN-19d时石菖蒲提取物十预组GLT1免疫组化AOD值较惊厥组和对照组均明显增高(P<0.01)(二)Western blot结果显示：①在对照组中,PN-19d时较PN-13d和PN-15d时GAT1蛋白表达显著降低(P<0.05)；惊厥组大鼠ARS-1 d (PN-13d)、ARS-3d(PN-15d)及ARS-7d(PN-19d)时,GAT1蛋白表达明显高于对照组和石菖蒲干预组(P<0.01)；在ARS-3d(PN-15d)及ARS7d(PN19d)时,石菖蒲干预组较对照组农达明显增高(P<0.01),而ARS-1d(PN-13d)石菖蒲干预组较对照组农达无显著差异(P>0.05)。②在对照组中,PN-13d、PN-15d和PN-19d时海马GLT1蛋白农达无显著性差异；惊厥组ARS-1d(PN-13d)、ARS-3d(PN15d)和ARS-7d(PN-19d)大脑海马GLT1蛋白表达均较对照组明显上调(P<0.01);ARS-1d(PN-13d),ARS-3d(PN-15d)和ARS-7d(PN-19d)时,石菖蒲提取物干预组较惊厥组和对照组均明显上调。结论：(1)新生大鼠反复惊厥可能引起脑内海马区GAT1和GLT1表达的异常,二者表达的失衡可能参与发育期惊厥性脑损伤的病理过程；(2)石菖蒲提取物调节新生大鼠反复惊厥所引起脑内海马区GAT1和GLT1表达的失衡。

全文目录


中文摘要  4-7
ABSTRACT  7-11
缩略词表  11-12
前言  12-15
第一章 材料与方法  15-23
  1.1 实验材料  15-18
    1.1.1 实验动物及分组  15
    1.1.2 主要试剂和设备  15-18
  1.2 实验方法及步骤  18-22
    1.2.1 三氟乙醚致大鼠反复惊厥模型的制作  18
    1.2.2 GAT1、GLT1免疫组化学染色  18-19
    1.2.3 Western blot方法检测大脑海马GAT1及GLT1蛋白表达  19-22
  1.3 统计学分析  22-23
第二章 结果  23-28
  2.1 实验动物数量及行为分析  23
  2.2 免疫组织化学检测结果  23-25
    2.2.1 反复惊厥后以及石菖蒲干预后大脑海马GAT1表达的变化  23-24
    2.2.2 反复惊厥后以及石菖蒲干预后大脑海马GLT1表达变化  24-25
  2.3 Western blot检测结果  25-28
    2.3.1 反复惊厥及石菖蒲干预大脑海马区GAT1蛋白表达的变化  25-26
    2.3.2 反复惊厥及石菖蒲干预大脑海马区GLT1蛋白表达的变化  26-28
第三章 讨论  28-32
  3.1 GAT1与惊厥的关系  28-29
  3.2 GLT1与惊厥的关系  29-30
  3.3 石菖蒲提取物的抗惊厥作用  30-32
第四章 结论  32-33
参考文献  33-37
附图  37-42
综述  42-51
  参考文献  47-51
致谢  51

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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