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宫颈鳞癌转移相关miRNA表达谱的初步研究

作　者: 王映霞
导　师: 吴宜林
学　校: 中南大学
专　业: 妇产科学
关键词: 宫颈鳞癌 miRNA miRNA基因芯片 实时定量RT-PCR 靶基因
分类号: R737.33
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的：应用miRNA基因芯片筛选宫颈鳞癌盆腔淋巴结转移阴性组和阳性组miRNA表达差异,寻找诊断和治疗宫颈鳞癌转移的新型生物学标志物和生物靶点,为进一步研究宫颈鳞癌淋巴结转移相关miRNA的调控机制提供实验依据。方法：1.收集在我院行广泛子宫切除+盆腔淋巴结清扫术的宫颈鳞癌患者盆腔淋巴结阴性组6例及阳性组4例。2.提取各标本总RNA,利用miRNA基因芯片筛选盆腔淋巴结阳性组/阴性组上调或下调2倍以上差异miRNA。3.从筛选出的miRNA中挑选出差异明显的miRNA,利用实时荧光定量PCR技术验证miRNA基因芯片结果。4.利用生物信息学网对表达差异的miRNA基因进行靶基因预测。结果：(1)我们通过miRNA基因芯片筛选出宫颈癌淋巴结转移阳性组和阴性组有176条miRNAs差异表达,根据以往研究及生物信息学网预测其中有48条差异miRNAs对应的靶基因中有与调控肿瘤相关基因,其中26条差异miRNAs上调,22条差异miRNAs下调,其中16条为差异的miRNAs对应的靶基因中有与调控肿瘤转移相关基因。(2)实时定量RT-PCR检测到miR-490-5p、miR-323-3p、miR-328,上调的倍数分别为：56.89536.8.180334.31.94124,而miR-31 miR-126、miR-144,下调的倍数为：16.3559、9.71628.32.4675, RT-PCR上调和下调的趋势是一致的,证明芯片结果是可靠的。(3)经RT-PCR验证的6条miRNAs中miR-490-5p、miR-328、miR-31、miR-144、miR-126的靶基因中有与调控肿瘤转移有关的基因。同一靶基因同时受到多个miRNAs调控,同一个miRNAs可以同时调控多个靶基因。结论：1.本实验用miRNA基因芯片检测到在宫颈癌淋巴结转移阳性组和阴性组有176条表达差异miRNAs,并寻找到48条miRNAs靶基因中有与调控肿瘤相关基因,其中16条miRNAs靶基因中有与调控肿瘤转移相关基因,初步明确了宫颈鳞癌转移相关miRNAs的表达谱。2.宫颈鳞癌相关miRNAs可能通过多个靶基因及多个途径调控淋巴转移。

全文目录


中文摘要  4-6
英文摘要  6-10
缩略语表  10-11
第一章 前言  11-13
第二章 材料与方法  13-20
  1 实验材料与仪器  13-14
  2 实验方法  14-20
第三章 结果  20-29
  3.1 总RNA提取质检报告  20-21
  3.2 IniRNAs芯片信号图  21-22
  3.3 宫颈鳞癌盆腔淋巴结转移性组和阴性组差异miRNAs表达  22-24
  3.4 荧光定量RT-PCR检测部分差异表达miRNAs结果  24-26
  3.5 PCR扩增产物电泳图  26
  3.6 数据分析  26-27
  3.7 靶基因预测  27-29
第四章 讨论  29-33
  (一) 宫颈鳞癌盆腔淋巴结转移阳性组和阴性组miNRA的差异表达及意义  29-30
  (二) 差异表达miNRA预测的靶基因与宫颈鳞癌淋巴结转移的意义  30-31
  小结与展望  31-33
第五章 结论  33-34
参考文献  34-39
综述  39-51
  参考文献  46-51
致谢  51-52
攻读硕士学位期间的成果及奖励  52

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 女性生殖器肿瘤 > 子宫肿瘤
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