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益生菌发酵制备鳕鱼皮鱼皮多肽的初步研究

作 者: 王丹丹
导 师: 金海珠
学 校: 烟台大学
专 业: 农产品加工及贮藏工程
关键词: 益生菌 微生物复合发酵 鳕鱼鱼皮 多肽 分子量分布
分类号: TS254.9
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 124次
引 用: 1次
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内容摘要


胶原蛋白多肽是以胶原蛋白为原料,利用酶解法或微生物发酵法生产的多肽产品。与胶原蛋白相比胶原蛋白多肽具有良好的理化性质和生理活性。鳕鱼鱼皮含有丰富的胶原蛋白,且是目前国内主要水产品加工鱼皮下脚料,本文以鳕鱼鱼皮为原料,通过筛选具有分泌蛋白酶、脂肪酶活性和产酸活性的益生菌株进行混合发酵,制备具有较好溶解性和无鱼皮腥味的鱼皮多肽产品。本文通过从纳豆、酒曲、醋曲和海鱼胃肠道中共分离纯化得到104株具有蛋白酶、脂肪酶等酶活力和产酸能力的菌株。通过形态学观察、特殊的细胞结构、运动性等特征和生理生化特性,依据《伯杰氏细菌鉴定手册》、魏景超的《真菌鉴定手册》和《酵母菌的特征与鉴定手册》对微生物进行分类鉴定。同时利用分子生物学技术,对细菌进行了16SrDNA序列测定,以确定其分类地位。根据微生物鉴定结果,从中选出7株具有较高蛋白酶酶活力、脂肪酶活力和产酸能力的菌株,其中2株细菌(BNⅣ-7,JFX 80Y9),分别为蜡状芽胞杆菌和枯草芽胞杆菌;1株霉菌(H-2),鉴定为黑曲霉;2株酵母(JQⅡJM白, 4-2大),鉴定为啤酒酵母和橙黄红酵母;2株产酸菌(fGYY-3,HYW-2),鉴定为枯草芽胞杆菌。利用复合菌种发酵鳕鱼鱼皮,以水解度为指标,采用单因子试验确定了最适发酵温度、最适接种量、发酵培养基的组成、产酶细菌:霉菌:酵母菌:产酸细菌的比例和发酵时间等发酵参数,通过均匀设计法优化了复合菌种发酵制备鱼皮多肽的发酵工艺。优化实验结果表明,最佳发酵条件为:发酵温度30℃,发酵培养基中鳕鱼皮:水的比例为1:0.5,接种量为8%,产酶细菌:霉菌:酵母菌:产酸细菌的比例为3:1:1:2,发酵时间为20h。此条件下水解度可达38.5%,发酵液气味较香馥,口感较柔和,没有鱼腥味。从发酵液中采用乙醇分离的方法提取鱼皮多肽,并且通过冷冻干燥得到鱼皮多肽粗品,采用凝胶柱进行高效液相层析,得到鱼皮多肽的分子量分布图谱,结果表明,发酵所得到的多肽集中在4000Da以下,小分子量多肽含量较高,发酵效果较好。

全文目录


摘要  4-5
Abstract  5-8
1 绪论  8-19
  1.1 引言  8
  1.2 胶原蛋白和胶原蛋白多肽  8-10
    1.2.1 胶原蛋白和胶原蛋白多肽的研究现状  9
    1.2.2 胶原蛋白和胶原蛋白多肽的应用  9-10
  1.3 水产品下脚料的加工和利用研究现状  10-12
    1.3.1 鱼头、鱼骨的加工与利用  11
    1.3.2 鱼鳞的加工与利用  11-12
    1.3.3 鱼皮的加工与利用  12
  1.4 益生菌的研究  12-16
    1.4.1 益生菌的研究现状  13
    1.4.2 益生菌的应用  13-14
    1.4.3 益生菌的功能  14-16
  1.5 微生物发酵  16-17
    1.5.1 纯种发酵的优点与缺点  16-17
    1.5.2 混合发酵的优点  17
  1.6 本课题研究的立题背景、意义和内容  17-19
    1.6.1 立题背景及研究意义  17-18
    1.6.2 研究内容  18-19
2 益生微生物的分离纯化  19-32
  2.1 引言  19
  2.2 材料与方法  19-22
    2.2.1 实验材料  19-20
    2.2.2 实验试剂  20
    2.2.3 实验仪器及设备  20-21
    2.2.4 实验方法  21-22
  2.3 结果与讨论  22-31
    2.3.1 纳豆和豆豉中益生微生物的分离纯化  22-24
    2.3.2 菌肥中益生微生物的分离纯化  24-25
    2.3.3 醋曲中益生微生物的分离纯化  25-26
    2.3.4 酒曲中益生微生物的分离纯化  26-28
    2.3.5 海鱼胃肠道中益生微生物的分离纯化  28-31
  2.4 本章小结  31-32
3微生物的鉴定  32-47
  3.1 引言  32
  3.2 材料与方法  32-39
    3.2.1 实验材料  32
    3.2.2 实验试剂  32-33
    3.2.3 实验仪器及设备  33-34
    3.2.4 实验方法  34-39
  3.3 结果与分析  39-46
    3.3.1 酵母菌的鉴定结果  39-41
    3.3.2 霉菌的鉴定结果  41-42
    3.3.3 细菌的鉴定结果  42-46
  3.4 本章小结  46-47
4多菌种发酵制备鱼皮多肽工艺的初步研究  47-58
  4.1 引言  47
  4.2 材料与方法  47-51
    4.2.1 实验材料  47-48
    4.2.2 实验试剂  48
    4.2.3 实验仪器及设备  48-49
    4.2.4 实验方法  49-51
  4.3 结果与讨论  51-57
    4.3.1 鳕鱼鱼皮成分测定  51
    4.3.2 最适发酵条件确定  51-55
    4.3.3 发酵工艺条件的优化  55-57
    4.3.4 多肽粗品的制备  57
  4.4 本章小结  57-58
5 鱼皮多肽分子量分布的研究  58-64
  5.1 引言  58
  5.2 材料与方法  58-60
    5.2.1 实验材料  58
    5.2.2 实验试剂  58-59
    5.2.3 实验仪器及设备  59
    5.2.4 实验方法  59-60
  5.3 结果与分析  60-63
    5.3.1 分子量标准曲线的绘制  60-62
    5.3.2 鱼皮多肽分子量分布图谱的绘制  62-63
  5.4 本章小结  63-64
6 总结及展望  64-66
  6.1 论文主要结论  64-65
  6.2 论文的创新之处  65
  6.3 展望  65-66
致谢  66-67
参考文献  67-71
附录1 攻读学位期间发表的论文目录  71-72

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中图分类: > 工业技术 > 轻工业、手工业 > 食品工业 > 水产加工工业 > 水产副产品加工及利用
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