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布鲁氏菌病的流行病学调查与分子分型研究
作 者: 伊日盖
导 师: 张七斤;范伟兴
学 校: 内蒙古农业大学
专 业: 预防兽医学
关键词: 布鲁氏菌 流行病学调查 分离鉴定 MLVA分型方法
分类号: R516.7
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
下 载: 295次
引 用: 1次
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内容摘要
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近几年全国各个地区的布鲁氏菌病发病率逐年上升,畜间也有单个群的暴发现象,这些都反映着国内畜间布鲁氏菌病的流行程度。本研究在2007~2008年间对几个不同的省区进行了牛、羊布鲁氏菌病流行病学调查,共采集11880份检测样品,采用RBT、SAT、iELISA、cELISA、MRT及奶样iELISA 6种不同的血清学方法进行检测。结果表明,我国牛、羊群间布鲁氏菌病仍然在流行,感染率呈现出明显的区域不均衡性。总体来看,奶牛的感染率较为严重,其次是肉牛。在最近一次的畜间布鲁氏菌病流行病学调查中发现牦牛群也有布鲁氏菌病感染情况。在3期定点省份的布鲁氏菌病流行病学调查中羊群的布鲁氏菌病阳性率显著低于牛群的阳性率,这可能与奶牛饲养周期长、淘汰率低有关。从西北某地区出现较多流产、早产、死胎、胎盘滞留等疑似布鲁氏菌患牛的奶牛养殖基地采集奶牛流产胎儿病料6份和奶牛奶样48份进行了病原体的分离鉴定,结果显示,分离到的12株病原体经传统的鉴定方法及PCR鉴定,11株为牛种布鲁氏菌,1株为猪种布鲁氏菌。传统分类方法是国际公认的,对流行病学和布鲁氏菌病防治是很有意义的。但是因大量使用抗生素和消毒剂,大面积进行免疫,部分分离到的地方菌株鉴定分类时,出现了难以鉴定的问题。因此有必要结合其他的鉴定方法来完善布鲁氏菌的分类鉴定技术。所以本研究探索对布鲁氏菌属的分子生物学分类方法,参考MLVA进行分型研究,以布鲁氏菌属部分种型代表菌株为参考,并用该方法对疫苗菌株和地方菌株进行分类鉴定。
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全文目录
摘要 3-4 Abstract 4-10 1 引言 10-18 1.1 布鲁氏菌病疫情及其未来趋势 10-12 1.1.1 世界布鲁氏菌病疫情 10-11 1.1.2 国内布鲁氏菌病疫情 11-12 1.1.3 我国布鲁氏菌病发展趋势 12 1.2 布鲁氏菌属DNA 的多态性和分类研究 12-16 1.2.1 布鲁氏菌基因组结构的变化 12-14 1.2.2 布鲁氏菌DNA 的多态性研究 14-15 1.2.3 分类研究 15-16 1.2.4 PCR 检测 16 1.3 本研究的目的和意义 16-18 2 部分省市布鲁氏菌病流行病学调查 18-30 2.1 材料和方法 18-19 2.1.1 材料 18 2.1.2 方法 18-19 2.2 结果 19-28 2.2.1 2007~2008 年定点省区牛羊布鲁氏菌病流行病学调查结果 19 2.2.2 牛羊布鲁氏菌病在不同群的检测结果 19-26 2.2.3 不同血清学检测方法检测结果 26-28 2.3 讨论 28-30 3 奶牛布鲁氏菌的分离与鉴定 30-38 3.1 材料与方法 30-33 3.1.1 材料 30 3.1.2 方法 30-33 3.2 结果 33-36 3.2.1 分离培养的结果 33 3.2.2 染色镜检结果 33 3.2.3 血清凝集试验结果 33 3.2.4 分离纯化细菌的结果 33-34 3.2.5 生化鉴定结果 34 3.2.6 传统方法种型鉴定结果 34-35 3.2.7 BCSP31-PCR 结果 35 3.2.8 VirB8-PCR 35 3.2.9 多重PCR 35-36 3.2.10 AMOS-PCR 扩增 36 3.3 讨论 36-38 4 布鲁氏菌分子分型初步研究 38-42 4.1 材料和方法 38-39 4.1.1 材料 38 4.1.2 方法 38-39 4.2 结果 39-40 4.3 讨论 40-42 5 结论 42-43 致谢 43-44 参考文献 44-49 作者简介 49
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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 传染病 > 杆菌传染病 > 布鲁(Bruce)氏菌病(波形热、地中海热、马尔他岛热)
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