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鸡肉肌内脂肪和肌苷酸含量组织差异的生化和分子机理初步研究

作　者: 刘琛
导　师: 陈继兰
学　校: 中国农业科学院
专　业: 动物遗传育种与繁殖
关键词: 北京油鸡 IMF IMP 胸肌与腿肌生化和分子机理
分类号: S831
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

本研究以胸肉和腿肉中肌苷酸(IMP)和肌内脂肪(IMF)含量的反差关系为切入点,研究寻找与IMP和IMF沉积量及相关的化学成分和代谢调控酶以及相关候选基因在胸肉和腿肉中的表达差异,从生化代谢和mRNA表达水平初步阐明胸肌与腿肌风味差异的机理,为鸡肉品质分子育种奠定基础。本试验以笼养和地面平养两种饲养方式,每种方式饲养公、母鸡各30只,测定北京油鸡胴体性能、胸肌和腿肌IMF和IMP含量、滴水损失和剪切力等肉品指标、肌纤维类型、胸肌和腿肌间IMF和IMP沉积相关酶活和候选基因mRNA表达量的差异,主要结果如下:1、胸肌主要以白肌纤维为主,而腿肌主要以红肌纤维为主,胸肌肌纤维密度、肉色b值和L值均显著高于腿肌(P<0.05),pHi和pHu值及肉色a值均显著低于腿肌(P<0.05)。2、胸肌和腿肌IMF和IMP含量差异极显著(P<0.01),胸肌中IMF含量是腿肌的0.26-0.41倍,IMP是腿肌的1.39-1.57倍。酶活测定结果显示,胸肌和腿肌LPL、CK和ATP酶活差异极显著(P<0.01),腿肌中脂肪合成关键酶LPL和ATP合成关键酶CK的活性极显著高于胸肌(P<0.01),腿肌中决定IMF和IMP含量的关键酶ATPase的活性极显著低于胸肌(P<0.01)。基因mRNA表达结果显示,腿肌中ATP合成的CK基因mRNA表达量极显著高于胸肌(P<0.01),CKMM基因表达量与IMP含量呈显著负相关(P<0.05)。腿肌中参与脂肪转运和利用的H-FABP和LPL基因和参与脂肪合成的HADH-β和ACAA2基因mRNA表达量均极显著高于胸肌(P<0.01);H-FABP、LPL、HADH-β和ACAA2基因表达量与IMF含量呈极显著正相关(P<0.01)。胸肌中参与IMP合成的ADSL基因mRNA表达量显著高于腿肌(P<0.01)。3、地面平养组胸、腿肌IMF含量和腹脂等脂肪性状极显著降低(P<0.01),胸肌中IMPc极显著升高(P<0.01),剪切力和滴水损失显著下降(P<0.05)。地面平养组中与脂肪沉积相关基因LPL的mRNA表达量显著高于笼养组,ATP合成基因CKMM的mRNA表达量极显著高于胸肌(P<0.01)。平养组胸肌白肌纤维比例极显著降低(P<0.01),腿肌也有相同趋势。综上所述,胸、腿肌中IMF和IMP含量的差异与其相关代谢酶活和候选基因分子表达差异有关。调节ATP生成和分解的酶活差异是形成胸、腿肌IMP和IMF含量的生化原因。同时,胸、腿肌间IMP和IMF相关候选基因mRNA表达量显著差异形成了胸、腿肌IMP和IMF沉积的差异。

全文目录

摘要  5-6
Abstract  6-11
第一章绪论  11-23
  1.1 胸肌与腿肌组织差异的研究进展  11-12
    1.1.1 胸肌与腿肌肌纤维类型  11-12
    1.1.2 肌纤维与肉质性状间的关系  12
  1.2 胸肌与腿肌中肌内脂肪(IMF)含量的研究进展  12-17
    1.2.1 肌内脂肪  12-13
    1.2.2 胸肌与腿肌中脂肪合成与分解的相关生化机理  13-15
    1.2.3 影响 IMF 含量相关候选基因  15-17
  1.3 胸肌与腿肌中肌苷酸(IMP)含量的研究进展  17-20
    1.3.1 胸肌与腿肌中 IMP 产生与代谢的生化机理  17-18
    1.3.2 影响 IMP 含量相关候选基因  18-19
    1.3.3 影响 IMP 含量的因素  19-20
  1.4 胸肌与腿肌肉品质差异的研究进展  20-21
    1.4.1 胸肌与腿肌肉品性能差异  20-21
    1.4.2 胸肌与腿肌 IMF 和 IMP 含量差异的候选基因  21
  1.5 研究内容与方法  21-23
    1.5.1 研究目的及意义  21-22
    1.5.2 技术路线  22-23
第二章材料与方法  23-35
  2.1 试验动物与饲养  23
  2.2 样品的采集  23
  2.3 性状测定  23-26
    2.3.1 生长及胴体性状测定  23-24
    2.3.2 肉品质性状测定  24-25
    2.3.3 IMF 含量的测定  25
    2.3.4 IMP 含量的测定  25-26
  2.4 肌肉组织纤维冰冻切片分析  26-28
    2.4.1 主要仪器  26-27
    2.4.2 主要药品及试剂配置  27
    2.4.3 主要试验方法  27-28
    2.4.4 计数  28
  2.5 候选基因的定量测定  28-33
    2.5.1 主要仪器和设备  28-29
    2.5.2 工具酶及主要试剂  29
    2.5.3 主要药品及试剂配方  29
    2.5.4 实时荧光定量 PCR 反应所用引物  29-30
    2.5.5 主要试验方法  30-33
  2.6 酶活测定  33-34
    2.6.1 主要仪器  33
    2.6.2 主要试剂盒与试剂制备  33-34
    2.6.4 组织匀浆的制备  34
    2.6.5 主要试验方法  34
  2.7 统计分析  34-35
第三章结果与分析  35-46
  3.1 胴体性状结果分析  35-36
  3.2 肉质性状结果分析  36-40
    3.2.1 肌肉组织差异对肉品质的影响  36-37
    3.2.2 肌肉组织差异对 IMF 和 IMP 含量的影响  37-38
    3.2.3 饲养方式对胸肌和腿肌肉品质的影响  38-40
  3.3 组织间肌纤维类型结果分析  40-41
  3.4 酶活与 IMF 和 IMP 含量的结果分析  41-43
    3.4.1 IMF 和 IMP 含量的相关酶活结果分析  41-42
    3.4.2 IMF 和 IMP 含量与相关酶活力的相关分析  42-43
  3.5 候选基因 MRNA 表达量与 IMF 和 IMP 含量的结果分析  43-46
    3.5.1 总 RNA、反转录及 Real-time 荧光定量检测结果  43-44
    3.5.2 候选基因mRNA 表达结果分析  44-46
第四章讨论  46-51
  4.1 胸肌与腿肌肌纤维类型与肉品性能差异  46
  4.2 胸肌与腿肌 IMF 和 IMP 相关酶活差异  46-47
  4.3 胸肌与腿肌 IMF 和 IMP 相关候选基因 mRNA 表达量差异  47-49
  4.4 饲养方式对肉品性能及肌纤维特性的影响  49-50
  4.5 饲养方式对 IMF 和 IMP 代谢相关酶活和候选基因表达的影响  50-51
第五章结论  51-52
参考文献  52-58
附录  58-62
致谢  62-63
作者简历  63

鸡肉肌内脂肪和肌苷酸含量组织差异的生化和分子机理初步研究

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