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抗甲型H1N1流感病毒放线菌的分离筛选及四株活性菌株的初步鉴定

作　者: 吴春燕
导　师: 鲍时翔
学　校: 海南大学
专　业: 微生物学
关键词: 放线菌分离筛选模型抗噬菌体抗H1N1 鉴定
分类号: R915
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

放线菌是自然界分布最广泛的微生物类群之一,是微生物药物的主要来源,从放线菌中筛选抗病毒药物是当前研究的热点之一。目前对抗病毒放线菌的研究报道相对较少,本课题的研究目标在于从海南丰富的热带微生物资源中筛选出具有抗病毒活性的放线菌,主要研究结果总结如下：从海南各种生境采集样品30份,其中红树林样品11份、海绵样品4份、陆地样品15份,分别分离到放线菌239株、37株、176株,合计452株；采用噬菌体-指示菌模型对452株放线菌进行筛选得到9株具有抗噬菌体活性的放线菌,其中DA10203活性较强,抑噬菌圈直径达21.3mm；结合CPE和MTT方法对其中的279株放线菌发酵液进行抗流感病毒H1N1活性检测,筛选得到32株具有抗H1N1活性的放线菌,其中菌株HA10201、HA10206、HA10211和HA10213的发酵液稀释20倍对病毒的抑制率分别达68.1%、58.3%、92.2%、55.7%；通过两种不同模型筛选出的抗噬菌体活性菌株与抗H1N1活性菌株相关性不大,初步判断两者的作用机制不同；对具有较强的抗噬菌体活性菌株DA10203、HA10303、HA10305、HA10306以及具有较强抗H1N1活性菌株HA10201、HA10206、HA10211、HA10213进行传代稳定性研究,8株活性菌株都具有良好的遗传稳定性。对菌株DA10203、HA10201、HA10206、HA10211进行了多相分类鉴定,包括菌株的形态与培养特征、生理生化特性、16S rDNA序列分析和系统发育树的分析。初步鉴定菌株DA10203为Streptomyces chartreusis;初步鉴定菌株HA10201为Streptomyces roseorubens;菌株HA10206可能为新种,初步鉴定为Streptomyces sp.HA10206,有待于DNA-DNA杂交进一步鉴定；菌株HA10211可能为新种,初步鉴定为Isoptericola sp. HA 10211,有待于DNA-DNA杂交进一步鉴定。

抗甲型H1N1流感病毒放线菌的分离筛选及四株活性菌株的初步鉴定

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