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达菲对甲型流感病毒在A549细胞上复制的影响

作 者: 李梓
导 师: 贺建华;舒跃龙
学 校: 湖南农业大学
专 业: 养殖
关键词: 甲型流感病毒 达菲 A549细胞 单周期复制 多周期复制
分类号: R96
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 36次
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内容摘要


甲型流感病毒是引起人呼吸道疾病的重要病原体之一,可导致流感大流行或局部流行,给人类健康和社会经济造成了极大地危害。疫苗接种和药物治疗是目前我们预防和治疗流感病毒感染的主要手段。达菲是一种神经氨酸酶抑制剂,在临床上广泛用于流感病毒感染病人的治疗,但目前全球季节性H1N1流感病毒对达菲的耐药率几乎达到100%,2009年新发的甲型H1N1流感病毒的耐药率也已达到2.6%。为了更好的指导达菲临床用药,我们选择人Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549细胞),在该细胞上比较不同剂量达菲对耐药株和敏感株的作用差异,以此研究临床上达菲对感染流感病毒病人的治疗剂量及效果,并对达菲与甲型流感病毒之间的相关作用机制进行初步研究。本研究用4种不同亚型的甲型流感病毒(甲型H1N1、季节性H1N1、H3N2和H9N2流感病毒)感染A549细胞,在不同剂量达菲的条件下,收获单复制周期(MOI=0.5)的感染细胞进行NP蛋白检测,收集多复制周期(MOI=0.01)的细胞上清进行红细胞凝集实验。实验结果表明:1.单周期复制过程中,达菲对敏感株和耐药株的反应效果不同。不同剂量的达菲均不能影响耐药株在细胞中的复制;而对于敏感株,当达菲剂量逐渐达到0.025μM时,能明显增强病毒进入细胞的能力,并促进病毒在细胞内的复制增殖,提示在病毒的单复制周期,达菲对耐药株和敏感株均无治疗效果。2.多周期复制过程中,不同剂量的达菲不能抑制耐药株的复制和释放,使达菲对耐药株无明显抑制作用,但达菲却能有效的抑制敏感株的复制增殖。这表明在病毒的多复制周期,达菲对耐药株不能达到治疗的效果,仅可用于治疗敏感株。根据上述研究结果,建议在临床治疗过程中要慎用达菲,对于病毒的耐药株达菲不能起到治疗作用,需要用其他的药物替代;而针对达菲的敏感株,需根据病程来使用达菲能够达到预防治疗的作用;临床医生要根据患者的既往用药史和病程时间长短来合理的使用达菲。

全文目录


摘要  4-6
Abstract  6-10
前言  10-13
文献综述  13-22
本研究的主体思路和技术方案  22-23
1. 材料与方法  23-35
  1.1 实验材料  23-25
  1.2 主要仪器设备  25-26
  1.3 实验方法  26-35
2. 结果  35-52
  2.1 病毒增殖测定  35-36
  2.2 病毒TCID_(50)测定  36
  2.3 流感病毒NA和NAI检测  36-41
  2.4 病毒序列分析  41-42
  2.5 达菲对流感病毒单周期复制的影响  42-47
  2.6 达菲对流感病毒多周期复制的影响  47-52
3. 讨论  52-56
结论  56-57
参考文献  57-63
缩写表  63-64
致谢  64-65
作者简历  65-66

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