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修复植物海州香薷和东南景天代谢的提取分离和鉴定

作 者: 邢严
导 师: 彭红云
学 校: 浙江大学
专 业: 植物营养学
关键词: 海州香薷 东南景天 苯丙素 黄酮 结构鉴定 抗肿瘤活性 配体
分类号: X173
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
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内容摘要


本论文对海州香薷的95%乙醇提取物中的化学成分进行了分析,采用超声波提取,结合柱层析分离纯化方法(大孔树脂、聚酰胺树脂、硅胶柱层析等)以及波谱分析手段(红外光谱、核磁共振氢谱碳谱、液质联用、NOSEY等),从中分离鉴定了2个苯丙素类化合物——咖啡酸和迷迭香酸;3个黄酮类化合物——芹菜素、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷和木犀草素。经高效液相色谱(HPLC)检测,各化合物纯度均达到98%以上。苯丙素类化合物咖啡酸为海州香薷中的重要代谢物,海州香薷中的含量约为干重的0.1305%。对不同铜环境条件下的海州香薷植物体中铜含量与咖啡酸含量进行分析,发现海州香薷植物茎叶中的咖啡酸含量与其茎叶中铜含量成显性负相关。MTT细胞毒性法检测上述天然化合物在50μmol浓度下对肺腺癌细胞A549、表皮癌细胞A431、人乳腺癌Bcap37的抑制率(IR),其中芹菜素(IR 77.07%)和木犀草素(IR 71.94%)对肺腺癌细胞A549都表现出与阳性对照吉非替尼(IR=80%)相近的活性,具有多靶标活性,可作为天然先导化合物用于抗肺腺癌细胞A549药物的开发,另外,木犀草素对表皮癌细胞A431和人乳腺癌Bcap37的抑制率(IR)最高,分别为37.41%和46.78%。从而可以增加修复植物海州香薷的附加值。东南景天(S. alfredii)是中国原生的锌(Zn)超积累植物。本论文对超积累东南景天茎叶的40%乙醇提取物进行分析,从中分离到取代吲哚化合物,建立了超积累东南景天茎叶中取代吲哚化合物分离的大孔树脂优化条件,并采用制备型液相色谱纯化精制,得到的该化合物经高效液相色谱仪(HPLC)检测纯度为99.90%。3个月的水培实验表明,高锌(50μmol/L)处理时超积累东南景天生长正常但其非超积累经受高锌毒性导致的胁迫。锌处理从0.5μmol/L增加为50μmol/L,两种东南景天体内的锌和取代吲哚化合物均显著增加,且茎部显著高于叶部,而且超积累植物茎中的锌和取代吲哚化合物含量显著高于非超积累。此取代吲哚化合物,可能是超积累东南景天茎中重要的化合物。

全文目录


致谢  6-7
摘要  7-8
Abstract  8-12
1 文献综述  12-29
  1.1 土壤重金属污染的植物修复技术  12-13
  1.2 铜耐性海州香薷和锌超积累东南景天修复环境的应用进展  13-15
    1.2.1 锌超积累东南景天的生长特性及其修复应用  13-14
    1.2.2 海州香薷修复铜污染土壤的应用  14
    1.2.3 特异修复植物生物质的后处理  14-15
  1.3 香薷类植物的植物化学特性及药理活性  15-18
    1.3.1 香薷类植物的化学成分  15-16
    1.3.2 海州香薷植物的药理活性  16-18
  1.4 植物提取物中天然抗肿瘤成分的研究  18-24
    1.4.1 然抗肿瘤药物  18-19
    1.4.2 植物多酚类物质  19-24
  1.5 植物中天然活性物质的提取分离方法  24-28
    1.5.1 植物中天然活性物质的超声波提取方法  24-25
    1.5.2 色谱技术在天然产物分离纯化中的应用  25-28
  1.6 研究课题的提出  28-29
2 铜耐性植物海州香薷代谢物的分离鉴定及活性测定  29-62
  2.1 前言  29-30
  2.2 实验部分  30-42
    2.2.1 海州香薷中苯丙素类化合物的分离鉴定  30-38
      2.2.1.1 苯丙素类化合物的提取分离实验  30-35
      2.2.1.2 苯丙素类化合物的纯度测定方法  35
      2.2.1.3 苯丙素类化合物的结构鉴定方法  35-36
      2.2.1.4 不同铜含量环境的海州香薷中咖啡酸的含量变化  36-38
    2.2.2 海州香薷中黄酮类化合物的分离鉴定  38-41
      2.2.2.1 黄酮类化合物的提取分离实验  38-41
      2.2.2.2 黄酮类化合物的纯度测定方法  41
      2.2.2.3 黄酮类化合物的结构鉴定方法  41
    2.2.3 MTT方法测定苯丙素类、黄酮类化合物的抗肿瘤活性  41-42
  2.3 结果分析  42-60
    2.3.1 海州香薷中苯丙素类化合物的分离鉴定  42-50
    2.3.2 海州香薷中黄酮类化合物的分离鉴定  50-59
    2.3.3 MTT方法测定海州香薷中苯丙素类、黄酮类化合物的抗肿瘤活性  59-60
  2.4 本章小结  60-62
3 锌超积累植物东南景天中的代谢产物提取分离研究  62-80
  3.1 前言  62-63
  3.2 实验部分  63-71
    3.2.1 锌超积累东南景天茎叶中的代谢物分离鉴定  63-67
      3.2.1.1 锌超积累东南景天代谢物的粗提取  63-64
      3.2.1.2 大孔树脂分离条件优化  64-65
      3.2.1.3 锌超积累东南景天中代谢物的提取分离实验  65-67
    3.2.2 不同锌处理时东南景天生长特性及特定代谢物与锌含量分析  67-71
      3.2.2.1 不同锌处理时对东南景天的培养  68-69
      3.2.2.2 不同锌处理时东南景天的叶绿素荧光分析  69
      3.2.2.3 不同锌处理时东南景天茎叶中的代谢物含量测定  69-70
      3.2.2.4 不同锌处理时东南景天中锌含量的测定  70-71
  3.3 结果分析  71-79
    3.3.1 锌超积累东南景天茎叶中代谢物的分离鉴定  71-77
      3.3.1.1 锌超积累东南景天的粗提取  71-73
      3.3.1.2 大孔树脂分离条件优化  73-74
      3.3.1.3 锌超积累东南景天中代谢物的提取分离  74-77
    3.3.2 不同锌处理时东南景天生长特性及特定代谢物与锌含量分析  77-79
      3.3.2.1 不同锌水平时东南景天的叶绿素荧光特性分析  77
      3.3.2.2 不同锌处理时东南景天茎叶中代谢物含量与锌含量分析  77-79
  3.4 本章小结  79-80
4 结论与创新点  80-82
  4.1 结论  80
  4.2 创新点  80-82
参考文献  82-89
硕士期间所取得的科研成果  89

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中图分类: > 环境科学、安全科学 > 环境科学基础理论 > 环境生物学 > 环境植物学
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