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人参皂苷微生物转化研究

作 者: 白龙律
导 师: 尹成日
学 校: 延边大学
专 业: 有机化学
关键词: 人参皂苷 Rb1,Rb2,Rc,Rd 微生物转化 Rg3,Rh2,M1
分类号: R285
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
下 载: 99次
引 用: 1次
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内容摘要


本文主要研究人参皂苷微生物转化,筛选出多种人参主皂苷转化为稀有皂苷Rg3、Rh2或C-K的高效菌株。研究第一阶段选用实验室保藏的18种菌株对人参皂苷Rb1、Rb2、Rc和Rd进行微生物转化,结果一种绿毛状GY-06菌能有效转化人参皂苷Rb1和Rd为Rg3,而不能转化Rb2和Rc。GY-06菌经形态学和内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)基因序列分析,确定为一种扩展青霉(Penicillium expansum)。研究第二阶段我们从人参根部土壤和其他药材植物根部土壤采得土壤样品,分离出了203种微生物,并分别编号为YS 1-40、BS 1-18、YSSgb 1-20、YSSbc 1-20、YSh5n 1-50、XS 1-20、HS 1-15和WS 1-20。用这203种微生物进行人参皂苷Rb1、Rb2、Rc和Rd微生物转化实验,其结果转化人参皂苷Rb1为Rg3的菌株11种,转化Rb1为M1(C-K)的菌株3种,转化人参皂苷Rb2为Rg3的菌株7种,转化人参皂苷Rc为Mb(M7)的菌株11种,转化Rc为Mc(M3)的菌株2种,转化人参皂苷Rd为Rg3的菌株13种。还有些菌株在继代培养的过程中可能发生变异,导致生物转化效果极不稳定。我们对生物转化高效菌株进行显微镜观察发现11种菌株为霉菌,4种菌株为球菌,1种菌株为杆菌。

全文目录


摘要  5-6
Abstract  6-9
第一章 绪论  9-20
  1.1 人参  9-10
    1.1.1 人参的分类  9
    1.1.2 人参的形态及生长环境  9-10
    1.1.3 人参的化学成分  10
  1.2 人参皂苷的结构及性质  10-11
  1.3 人参皂苷的化学结构及理化性质  11-14
    1.3.1 人参皂苷的化学结构  11-13
    1.3.2 人参皂苷的理化性质  13-14
  1.4 人参皂苷的糖链、生理活性及药理作用  14-15
    1.4.1 人参皂苷的糖链及生理活性  14-15
    1.4.2 人参皂苷Rg_3和Rh_2抗肿瘤机制  15
  1.5 人参皂苷结构改造方面的研究进展  15-18
    1.5.1 人参皂苷的化学水解和转化研究进展  16
    1.5.2 微生物转化法改变人参皂苷糖基的研究进展  16-17
    1.5.3 影响转化的因素  17-18
  1.6 本论文主要研究内容  18-20
第二章 材料与方法  20-28
  2.1 实验材料  20-21
    2.1.1 菌种  20
    2.1.2 培养基  20
    2.1.3 试剂  20-21
    2.1.4 仪器  21
  2.2 实验方法  21-28
    2.2.1 微生物分离  21-23
      2.2.1.1 菌种分离、筛选的原则  21
      2.2.1.2 菌种分离、筛选的步骤  21-23
    2.2.2 菌种的液体培养  23-28
      2.2.2.1 薄层层析(TLC)检测人参皂苷  23
      2.2.2.2 人参皂苷水溶液的制备  23
      2.2.2.3 培养基的制备  23
      2.2.2.4 菌种的筛选  23
      2.2.2.5 微生物转化  23-24
      2.2.2.6 反应条件  24
      2.2.2.7 高效液相色谱法测定人参皂苷  24
      2.2.2.8 菌种的鉴定  24-28
第三章 结果与讨论  28-39
  3.1 实验室储藏的菌株对人参皂苷Rb_1的筛选  28-31
  3.2 土壤中分离的菌株对人参皂苷Rb_1、Rb_2、Rc和Rd的筛选  31-38
    3.2.1 人参皂苷Rb_1生物转化菌株筛选  31-34
    3.2.2 人参皂苷Rb_2微生物菌株筛选  34-35
    3.2.3 人参皂苷Rc微生物菌株筛选  35-37
    3.2.4 人参皂苷Rd微生物菌株筛选  37-38
  3.3 显微镜观察  38-39
第四章 结论  39-40
参考文献  40-43
致谢  43-44
附录  44-52

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学
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