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关节软骨AQP表达与大鼠早期KOA相关性及丹参注射液合透明质酸钠关节腔内注射对其干预的实验研究

作　者: 尹明
导　师: 熊辉
学　校: 湖南中医药大学
专　业: 中医骨伤科学
关键词: 膝骨性关节炎 丹参注射液 透明质酸钠 水通道蛋白 大鼠 实验研究
分类号: R684
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 18次
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内容摘要


目的：探讨水通道蛋白(Aquaporin, AQP)的表达与膝骨性关节炎(knee joint osteroarthritis, KOA)形成与发展是否具有相关性,及探索丹参注射液配合透明质酸钠(Sodium Hyaluronate, SH)关节腔内注射对大鼠早期KOA发展及其关节AQP表达的影响以及通过调控AQP的表达来干预KOA发展的可行性,为KOA的治疗寻找新靶点。方法：将60只3月龄SD大鼠随机分为三组：正常组(A)、模型组(B)、实验组(C),A组不作任何处理,B、C两组共40只大鼠右后膝关节均通过关节腔内注射4%无菌木瓜蛋白酶及0.03mol／L L-半胱氨酸溶液,造成KOA模型,B组造模后不作任何处理,让其在笼内自由活动；C组自首次造模当天开始关节内注射透明质酸钠0.06m1和丹参注射液0.06ml,每星期一次,共注射三次。选择首次造模术后3d、7d、14d、21d四个时相点,观察大鼠行为学有无改变,采用断头法处死大鼠,切取大鼠右后膝关节股骨内侧髁关节面软骨标本,进行膝关节软骨大体观察,再按观察指标要求固定,切片后进行HE染色,按Mankin’s病理学计分方法分析关节软骨的病理学积分,并进行免疫组织化学染色,通过图像分析系统分析AQP1及AQP3在关节软骨中的表达。结果：1、大体形态比较显示实验组与模型组无统计学差异；2、组织学评分结果表明实验组优于模型组,实验组的病变程度及Mankin’s评分均低于模型组(P<0.05)；3、正常组AQP1、AQP3均有表达,AQP3的表达水平强于AQP1；模型组AQP1表达水平与正常组、实验组无统计学差异(P>0.05),但AQP3表达水平明显高于正常组与实验组(P<0.05)。结论：1.正常或病理情况下大鼠膝关节软骨中均有AQP1及AQP3的表达,但模型组AQP3的表达显著上调,这提示我们AQP3的高表达或许与KOA形成与发展之间存在某种密切的联系。2.丹参注射液配合SH关节腔内注射对大鼠早期KOA有较好的治疗作用,能维护软骨的正常建构,减轻软骨退变程度,延缓骨关节炎的发展,它们治疗KOA的分子机制可能还与其下调了AQP3的表达水平有关。

全文目录


英文缩写一览表  6-7
中文摘要  7-9
英文摘要  9-12
引言  12-14
正文  14-40
  材料与方法  14-19
    1.1 实验材料  14-15
      1.1.1 实验动物  14
      1.1.2 药物来源  14
      1.1.3 主要仪器及试剂  14-15
    1.2 具体研究方案  15-18
      1.2.1 动物分组  15
      1.2.2 动物造模  15
      1.2.3 动物实验及标本  15-18
        1.2.3.1 动物行为学指标  16
        1.2.3.2 软骨形态学指标  16-18
          1.2.3.2.1 肉眼大体观察  16
          1.2.3.2.2 HE染色光镜下观察  16-18
          1.2.3.2.3 软骨中AQP表达的免疫组化测定  18
    1.3 统计学处理  18-19
  实验结果  19-24
    2.1 动物行为学指标  19
    2.2 软骨形态学指标  19-23
      2.2.1 肉眼大体观察  19-20
      2.2.2 光镜下形态学指标  20-23
        2.2.2.1 HE染色结果  20-21
        2.2.2.2 Mankin’s评分结果  21-22
        2.2.2.3 结果分析  22-23
    2.3 软骨中AQP表达的免疫组化测定结果  23-24
      2.3.1 结果及分析  23-24
  讨论  24-39
    3.1 中医理论对于KOA的认识  24-25
    3.2 现代理论对于KOA的认识  25-27
    3.3 现代医学对AQP与关节软骨相关性的认识  27-30
    3.4 丹参注射液配合透明质酸钠治疗KOA的依据  30-34
    3.5 用木瓜蛋白酶建立大鼠KOA模型的依据  34-36
    3.6 对AQP与KOA关系的进一步推测  36-37
    3.7 对丹参注射液合SH下调AQP3表达来治疗KOA的一些推测  37
    3.8 存在的问题及展望  37-39
  结论  39-40
致谢  40-41
参考文献  41-46
附录  46-61
  实验图片  46-50
  文献综述一  50-54
  文献综述二  54-61
  攻读学位期间主要研究成果  61

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中图分类: > 医药、卫生 > 外科学 > 骨科学（运动系疾病、矫形外科学） > 关节疾病及损伤
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