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大鼠C6脑胶质瘤3.0T MR-DTI及瘤周水肿浸润组织FA值与AQP1的相关性研究

作　者: 李香营
导　师: 韩向君
学　校: 中南大学
专　业: 影像医学与核医学
关键词: 胶质瘤瘤周水肿瘤周浸润动物模型磁共振成像磁共振张量成像大鼠磁共振弥散张量成像水通道蛋白1
分类号: R739.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

第一部分Wistar大鼠C6脑胶质瘤模型的建立目的：建立稳定可靠的Wistar大鼠C6脑胶质瘤晚期阶段模型。材料和方法：1、C6细胞在含10%FBS、1%青链霉素混合液的RPMI-1640完全培养基中,置于37℃、5%CO2培养箱中培养,胰酶消化、终止,采集对数生长期的C6细胞计数,检测细胞活性,加完全培养基调整浓度。2、采用随机数字表将22只Wistar大鼠分成实验组17只,假手术组(对照组)5只。通过立体定向技术,将浓度大于1.0x106.10μ1的C6细胞接种至实验组大鼠右侧尾状核区,假手术组大鼠在相同部位注射完全培养基。3、肿瘤细胞接种后约3-4周对相应大鼠进行磁共振扫描和病理观察。结果：1、17只大鼠接种肿瘤细胞,1只死于术后约1h,1只于接种后15日不明原因死亡(随后病理证实有肿瘤形成),其余15只肿瘤细胞接种大鼠在随后的MRI和病理检查中均证实有肿瘤形成,接种成功率100%。假手术组5只大鼠均存活,且未见肿瘤形成。2、术后经磁共振及实验结束后的病理证实肿瘤细胞接种后约3-4周存在瘤周水肿和/或肿瘤细胞浸润。结论：Wistar大鼠C6脑胶质瘤模型稳定可靠,生长迅速,接种成功率高,肿瘤细胞接种后约3-4周,可满足瘤周水肿和/或肿瘤浸润实验要求。第二部分大鼠C6脑胶质瘤在体3.0T磁共振张量成像研究目的：探讨3.0T磁共振张量成像在Wistar大鼠C6胶质瘤肿瘤区和对侧正常脑实质区的各向异性分数(FA)值及平均弥散系数(MD)值,并比较两种不同的方法选取感兴趣区(ROI)对测量结果的影响。材料和方法：采用随机数字表将22只Wistar大鼠分成实验组17只,假手术组(对照组)5只。通过立体定向技术,将浓度大于1.0x106/10μ1的C6细胞接种至实验组大鼠右侧尾状核区,假手术组大鼠在相同部位注射完全培养基。肿瘤细胞接种后约3-4周,利用3.0T高场强医用磁共振扫描仪,大鼠专用线圈对大鼠C6胶质瘤模型行常规MRI、DT工、T1WI及SAG T1-3D-bravo增强检查,结合T2WI、FLAIR、T1WI及SAGT1-3D-bravo增强确定肿瘤与水肿区,借助Function Tool软件对DTI数据后处理,避开出血、坏死区,选取多个即3个等大(2mmm2,9pix)ROI和单个较大ROI,获得肿瘤实质和对侧正常脑实质区的FA及MD值。结果：15只成瘤大鼠中,肿瘤区和对侧正常脑实质区3个等大ROI FA平均值分别为(0.1075±0.02)和(0.312±0.024),而3个等大ROIMD值分别为(0.944±0.029)×10-3mm2/s和(0.808±0.036)×10-3mm2/s,两组结果经两样本t检验显示差别均有统计学意义(P＜0.05)。肿瘤区和对侧正常脑实质区单个较大ROI FA平均值分为(0.118±0.039)和(0.310±0.052),而单个较大ROI MD平均值分别为(0.941±0.047)×10-3mm2/s和(0.806±0.043)×10-3mm2/s,两组结果经两样本t检验显示差别亦有统计学意义(P＜0.05)。两种不同的方法选取肿瘤区ROI获得的FA值经配对t检验显示有统计学意义(P<0.05),而MD值间无统计学意义(P＞0.05)。结论：用临床3.0T MRI行大鼠C6胶质瘤DTI检查切实可行,通过测量肿瘤区、对侧正常脑实质区FA及MD值,为以后的科研工作提供了有用的参考。方法学上,本研究发现两种不同的方法选取ROI对FA值测量结果有影响,而对MD值测量结果无明显影响。第三部分AQP1在鼠脑C6胶质瘤瘤周水肿浸润组织中的表达与FA值的相关性研究目的：研究Wistar大鼠C6脑胶质瘤瘤周水肿浸润组织的磁共振弥散张量成像(MR-DTI)的特征,并与免疫组织化学水通道蛋白1(AQP1)对照,探讨AQP1在胶质瘤瘤周水肿浸润组织中的表达与MR-DTI参数部分各向异性分数(FA)的相关性。材料与方法：采用随机数字表将22只Wistar大鼠分成实验组17只,假手术组(对照组)5只。通过立体定向技术,将浓度大于1.0×106/10ul的C6细胞接种至实验组大鼠右侧尾状核区,假手术组大鼠在相同部位注射完全培养基。肿瘤细胞接种后约3～4周,利用3.0T高场强医用磁共振扫描仪,大鼠专用线圈对大鼠C6胶质瘤模型行常规MRI、DTI、FLAIR、T1WI及SAG T1-3D-bravo增强检查,结合T2WI、FLAIR.T1WI及SAG T1-3D-bravo增强确定肿瘤与水肿区,借助Function Tool软件对DTI数据后处理,避开出血、坏死等影响结果的区域,选取多个即3个等大(2mm2,9pix)ROI,获得相应部位的FA值。设肿瘤对侧正常脑组织为内对照。MRI扫描完成后立即行4%的多聚甲醛灌注固定全脑,之后过量1%的戊巴比妥钠处死大鼠取全脑固定,选取与DTI肿瘤最大层面相对应的瘤周水肿区脑组织做连续冠状切片,进行HE染色和AQP1抗体免疫组织化学检查。Pearson相关分析法检测FA值和相应部位的AQPl阳性表达的IOD值的相关性,计算相关系数,并进行t检验,以P<0.05为有统计学意义。结果：15只成瘤大鼠中,瘤周水肿区约3-4周3个等大ROI FA平均值为(0.204±0.036),较对侧正常脑组织多个ROI FA平均值(0.310±0.027)降低,不过没有瘤体降低明显,两组结果经两样本t检验显示差别有统计学意义(P＜0.05)。Pearson相关分析显示,肿瘤水肿浸润组织的FA值与AQP1阳性表达IOD值之间存在负相关(r=-0.81,P<0.05)。结论：Wistar大鼠C6脑胶质瘤瘤周水肿浸润组织MR-DTI参数FA值与AQP1之间存在负相关,随着AQP1阳性表达程度的增高,FA值降低。

全文目录

摘要  4-8
ABSTRACT  8-14
目录  14-16
中英文对照  16-17
第一部分 Wistar大鼠C6脑胶质瘤模型的建立  17-29
  第一章前言  17-18
  第二章材料和方法  18-21
    2.1 材料  18-20
    2.2 方法  20-21
  第三章结果  21-22
    3.1 C6细胞株  21
    3.2 大鼠C6胶质瘤动物模型制作  21-22
  第四章讨论  22-24
  第五章结论  24-25
  参考文献  25-27
  附图  27-29
第二部分大鼠C6脑胶质瘤的在体3.0T磁共振张量成像研究  29-49
  第一章前言  29-30
  第二章材料和方法  30-34
    2.1 动物模型的制作  30
    2.2 主要仪器设备及实验药品、试剂  30
    2.3 PBS磷酸盐缓冲液配制  30
    2.4 MRI扫描  30-31
    2.5 病理检查  31-32
    2.6 图像处理和统计学分析  32-34
  第三章结果  34-36
    3.1 磁共振检查结果  34-35
    3.2 病理结果  35-36
  第四章讨论  36-39
  第五章结论  39-40
  参考文献  40-42
  附图  42-49
第三部分大鼠C6脑胶质瘤瘤周水肿浸润组织MR张量成像与水通道蛋白的相关性研究  49-69
  第一章前言  49-51
  第二章材料和方法  51-54
    2.1 动物模型的制作  51
    2.2 主要仪器设备及实验药品、试剂  51
    2.3 MRI扫描  51
    2.4 病理检查  51-53
    2.5 图像处理和统计学分析  53-54
  第三章结果  54-56
    3.1 磁共振检查结果  54
    3.2 病理结果  54-56
  第四章讨论  56-59
  第五章结论  59-60
  参考文献  60-64
  附图  64-69
综述一  69-78
  参考文献  75-78
综述二  78-85
  参考文献  82-85
致谢  85-86
攻读学位期间主要研究成果  86

大鼠C6脑胶质瘤3.0T MR-DTI及瘤周水肿浸润组织FA值与AQP1的相关性研究

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