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含两种单体的中长链聚羟基脂肪酸酯的生物合成及表征

作　者: 马龙
导　师: 陈国强
学　校: 汕头大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 聚3-羟基脂肪酸酯 PHB 恶臭假单胞菌 3-羟基十二酸酯 β-氧化途径
分类号: Q591.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

聚羟基脂肪酸酯是细菌细胞内合成的一类生物可降解高分子化合物,在很多领域有着广泛的应用前景。聚羟基脂肪酸一般认为可分为三种:短链聚羟基脂肪酸酯、中长链聚羟基脂肪酸酯以及短链和中长链聚羟基脂肪酸酯共聚物。其中的中长链聚羟基脂肪酸酯也是共聚物,共聚物的形式存在限制对其进行加工。本文用基因工程技术改造了一株恶臭假单胞菌的长链聚羟基脂肪酸酯合成途径,实现了改变其单体组成的目的。恶臭假单胞菌KT2442可以脂肪酸为碳源合成含有3-羟基己酸、3-羟基辛酸、3-羟基癸酸和3-羟基十二酸的长链聚羟基脂肪酸酯共聚物,当编码催化中长链3-羟基酰基辅酶A生成3-酮基酰基辅酶A的3-羟基酰基辅酶A脱氢酶的基因完全敲掉后,得到一基因工程菌-恶臭假单胞菌KT2047A,以辛酸、癸酸、十二酸分别为碳源培养的恶臭假单胞菌KT2047A,得到的中长链聚羟基脂肪酸酯只含有两种单体,以十二酸为碳源,我们得到的中长链聚羟基脂肪酸酯中3-羟基癸酸的比例是44%,3-羟基十二酸的比例为56%。此外,我们对得到的中长链聚羟基脂肪酸酯的化学性能进行了测试,其中P（44%3HD-co-3HDD）（3-羟基癸酸的比例是44%,3-羟基十二酸的比例为56%）共聚物的融解温度、熔融焓和杨氏模量分别为75℃,51 Jg^-1和2.0 MPa。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-6
目录  6-8
第一章前言  8-19
  1.1 聚羟基脂肪酸酯(PHA)概述  8-12
    1.1.1 PHA研究历程和分类  8-9
    1.1.2 PHA的物化性能  9-11
    1.1.3 PHA的生物学性能  11
    1.1.4 PHA的应用  11-12
  1.2 聚羟基脂肪酸酯(PHA)生物合成途径  12-17
    1.2.1 PHA生物合成的代谢途径  12-15
    1.2.2 PHA生物合成的代谢工程  15-17
  1.3 论文工作的目的及意义  17-19
第二章试验材料与实验方法  19-29
  2.1 实验材料  19-22
    2.1.1 菌种和质粒  19
    2.1.2 分子生物学常用的工具酶  19-20
    2.1.3 分子生物学常用的试剂  20-21
    2.1.4 DNA分子量标准物  21
    2.1.5 仪器和设备  21-22
  2.2 实验方法  22-29
    2.2.1 培养基及抗生素的配制  22-23
    2.2.2 常用分子生物学实验方法  23-24
    2.2.3 摇瓶实验方法  24-25
    2.2.4 理化分析方法  25-29
第三章重组菌的构建结果  29-37
  3.1 重组菌P.putida KT2047P的构建  29-34
    3.1.1 质粒pKXZ01的构建  29-31
    3.1.2 质粒pKSL01的构建  31-33
    3.1.3 重组菌P.putida KT2047P的构建  33-34
  3.2 重组菌P.putida KT2047A的构建  34-36
    3.2.1 质粒pKXZ02的构建  34
    3.2.2 质粒pKSL02的构建  34-35
    3.2.3 重组菌P.putida KT2047A的构建  35-36
  3.3 小结  36-37
第四章摇瓶实验结果与讨论  37-41
  4.1 重组菌P.putida KT2047P摇瓶实验结果与讨论  37-38
  4.2 重组菌P.putida KT2047A摇瓶实验结果  38-40
  4.3 小结  40-41
第五章物理性质分析结果与讨论  41-45
第六章结论  45-46
参考文献  46-53
致谢  53-54
论文发表情况  54-55
个人简历  55

含两种单体的中长链聚羟基脂肪酸酯的生物合成及表征

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