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苍术麸炒前后氯仿和挥发油部位药效学及化学成分对比研究

作　者: 陈雯雯
导　师: 刘艳菊
学　校: 湖北中医药大学
专　业: 中药学
关键词: 苍术麸炒氯仿部位挥发油药效学化学成分分析
分类号: R284.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

苍术为临床常用中药,具燥湿健脾、祛风散寒作用。2010版《中国药典》一部载有苍术和麸炒苍术两种饮片规格,地方有米泔水制苍术使用。由于生品燥性较强,麸炒、米泔水制可缓和燥性,并能增强健脾作用,麸炒苍术较为常用。本论文是国家自然基金项目《麸炒苍术炮制机理研究》任务的一部分,是前期研究工作的继续。围绕探讨麸炒苍术增效减燥药效变化和该变化的物质基础开展一系列研究。前期已对氯仿部位药效学进行了研究,并采用HPLC技术对氯仿部位化学成分进行分析,发现苍术炮制前后氯仿部位化学成分有部分发生含量变化。在此基础上,本文采用硅胶柱色谱和Toyopearl-凝胶柱色谱对氯仿部位进行较系统的分离纯化工作,分离得到两个单体化合物,经鉴定两个化合物分别为5-羟甲基糠醛和邻苯二甲酸二异丁酯。为进一步探讨麸炒苍术炮制机理,对苍术麸炒前后的挥发油进行药效学研究。以湿阻中焦证大鼠为模型,选择小肠推进率、血清胃泌素水平为健脾指标；选取日代谢尿量、尿液AQP2含量为燥湿指标。结果发现麸品组健脾两项指标与阴性组比较均有差异(p<0.05),但是生品的健脾指标与阴性组没有显著性差异；生品组、麸品组燥性指标较阴性组有显著性差异(p<0.05),各给药组尿量增加,AQP2含量降低,其中生品的尿量增加趋势明显,AQP2含量降低最接近正常值。采用免疫组化法,更直观的分析苍术炮制前后挥发油对湿阻中焦证大鼠肾中AQP2水平。结果生品组AQP2显著降低,较阴性组有差异,麸品组较阴性组没有显著性。这也与尿量中AQP2的测定结果相符合,说明炮制以后苍术的燥性缓和。对苍术麸炒前后挥发油的急性毒性进行研究,通过实验确定生苍术及麸炒苍术挥发油的半数致死量(LD50),分析炮制对苍术挥发油急性毒性的影响。以等比浓度法灌胃,采用改良寇氏法计算生苍术及麸炒苍术挥发油对小鼠的半数致死量(LD50)。结果生苍术挥发油LD5。为2454.71mg/kg,LD50的95%可信限为2123.24mg/kg～2837.92mg/kg；麸炒苍术挥发油LD50为5248.07mg/kg,LD50的95%可信限为4677.35mg/kg～5888.43mg/kg。结果表明生苍术挥发油为低毒；而麸炒苍术挥发油为实际无毒,炮制以后挥发油毒性降低。在苍术挥发油药效学研究的基础上,运用GC-MS技术对苍术麸炒前后挥发油成分进行比较分析,发现苍术麸炒后挥发油中有7个成分含量下降；进一步将单炒麦麸与炒苍术麦麸挥发性成分对比,发现炒苍术麦麸新增4种成分,并且这4种成分与麸炒苍术挥发油所减少的成分一致。结果提示苍术燥性降低可能与麦麸炒制使部分成分含量降低有关。本实验通过健脾燥湿双重药理指标,验证了苍术麸炒以后可以增强健脾作用,缓和燥性。通过挥发油和氯仿部位的药效、化学成分研究,为进一步探讨苍术麸炒的炮制机理奠定基础。

全文目录

中文摘要  5-7
ABSTRACT  7-10
縮略词表  10-11
前言  11-12
技术路线  12-13
第一章苍术炮制机理的研究概况  13-28
  一、苍术炮制历史沿革  13-15
  二、炮制对苍术属植物化学成分的影响  15-19
  三、炮制对苍术属植物药效学的影响  19-21
  四、苍术属植物炮制工艺研究  21-23
  五、苍术化学成分研究  23-26
  六、AQP2的简介  26-28
第二章苍术麸炒前后氯仿部位的药效学、化学成分对比研究  28-39
  一、氯仿部位的药效学研究  29-30
  二、氯仿部位的化学成分研究  30-37
    1 成分分析  30-32
    2 成分提取分离  32-35
    3 化学结构鉴定和结果  35-37
  三、结论与讨论  37-39
第三章苍术麸炒前后挥发油药效学和化学成分对比研究  39-61
  一、挥发油部位药效学研究  39-48
    1 实验材料  39-41
    2 健脾作用研究  41-43
    3 燥湿作用研究  43-46
    4 小结与讨论  46-48
  二、免疫组化法测定大鼠肾中AQP2  48-52
    1、实验材料  49
    2、实验方法  49-50
    3 实验结果  50-52
    4 小结与讨论  52
  三、苍术麸炒前后挥发油急性毒性研究  52-56
    1 实验材料  53
    2 实验方法  53-54
    3 实验结果  54-55
    4 中毒症状及解剖结果  55
    5 小结与讨论  55-56
  四、挥发油部位化学成分分析  56-60
  五、结论与讨论  60-61
结语与创新  61-62
参考文献  62-67
附录  67-76
致谢  76

苍术麸炒前后氯仿和挥发油部位药效学及化学成分对比研究

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