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甘西鼠尾草种内化学变异的研究

作　者: 王龙
导　师: 张利
学　校: 四川农业大学
专　业: 植物学
关键词: 甘西鼠尾草指纹图谱同时测定抗氧化化学变异
分类号: R284.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

甘西鼠尾草(Salvia przewalskii Maxim.),隶属于唇形科(Lamiaceae)鼠尾草属(Salvia Linn.),多年生草本植物,以根入药,具有调经、活血、散瘀、镇静止痛等功效,主要分布于我国甘肃西部、四川西部、云南西北部、青海南部、西藏以及湖北局部。在我国分布有褐毛甘西(Salvia przewalskii var. mandarinorum (Diels) E. Peter)、少毛甘西(Salvia przewalskii var. glabrescens E. Peter)和白花甘西(Salvia przewalskii var. alba X. L. Huang&H. W. Li)3个变种,市场上大量流通的多为其原变种。随着市场需求量的逐渐增大,市场上甘西鼠尾草质量的参差不齐对该药材资源的持续利用产生较大影响,学者们关于质量控制的报道多局限于一个或几个地区。因此,本研究通过对我国甘西鼠尾草主要分布区进行调查研究,分析其种内化学成分的差异性,为甘西鼠尾草的有效利用提供理论依据。主要研究结果如下：1通过对提取方法和色谱条件的优化,利用HPLC-UV法建立了14个居群的化学指纹图谱,共提取出27个共有峰。27个峰保留时间的相对标准偏差从0到0.48%,表明所有样品具有较高的一致性。27个峰峰面积的相对标准偏差值从31.37%到153.7%,表明在不同的居群间,其化学成分的含量表现出极其显著的差异性。以7号峰(迷迭香酸)为参照峰,计算相对峰面积和相对保留时间。主成分分析和聚类分析的分析结果表明,14个居群被分为三组。所有的居群并非以省为单位归为一类,而是聚于不同的类别。对比海拔高度发现,三个类别海拔高度的区别较为明显,因此,海拔高度为其变异的一个影响因子。2HPLC-UV法对14个居群的甘西鼠尾草根中八种有效成分(原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A、二氢丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅰ、隐丹参酮和丹参酮ⅡA)的含量进行同时测定。结果表明,不同居群之间不同成分差异较大。水溶性成分中,迷迭香酸的含量最高,从35.4mg/g到8.72mg/g；其次为丹酚酸B,含量从18.2mg/到2.20mg/g；丹酚酸A和原儿茶醛含量最低,分别为3.83mg/g到0.0300mg/g和0.220mg/g到0.0300mg/g。脂溶性成分中,丹参酮ⅡA的含量最高,从11.4mg/g到1.11mg/g；其次为丹参酮Ⅰ,含量从5.22mg/g到0.560mg/g；隐丹参酮和二氢丹参酮Ⅰ的含量相当,分别为3.97mg/g到1.12mg/g和3.48mg/g到0.190mg/g。通过对水溶性和脂溶性成分对比结果发现,水溶性成分在各个居群内的变化没有一定的规律性,不同居群的差异主要表现在丹参酮类物质的含量上。314个居群的甘西鼠尾草根醇提物的抗氧化活性和总黄酮、总酚含量研究结果表明,抗氧化活性中,当提取液浓度为0.3mg/mL时,青海同仁对DPPH-的清除率最高(93.41%),四川炉霍的最低(32.42%)；当提取液浓度为0.6mg/mL时,青海同仁的还原力最强,西藏芒康的还原力最弱；当提取液浓度为0.6mg/mL时,云南德钦对超氧阴离子的清除率最高(72.35%),四川炉霍的最低(35.37%)。总酚和总黄酮含量测定结果显示,总酚含量从604.0mg/g没食子酸到198.3mg/g没食子酸；总黄酮含量从196.7mg/g芦丁到48.84mg/g芦丁。对总酚和总黄酮含量与抗氧化活性相关性分析结果发现,总酚含量与总还原力和超氧阴离子清除能力极显著相关,总黄酮含量与DPPH-清除能力达到显著相关。414个居群的甘西鼠尾草根中Ca、Cu、Fe、Mg、Mn和Zn六种无机元素的原子吸收分光光度法测定结果表明：在同一年内,不同居群甘西鼠尾草根中六种元素表现出明显的差异。种植一年后,Ca和Fe的含量下降,Mg的含量上升,Mn和Zn的含量差异不大。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-11
1 文献综述  11-19
  1.1 甘西鼠尾草研究进展  11-16
    1.1.1 丹参类药材本草考证  11-12
    1.1.2 形态特征  12
    1.1.3 甘西鼠尾草资源分布与利用  12-13
    1.1.4 化学成分研究  13-14
    1.1.5 提取工艺与质量评价  14-15
    1.1.6 药理作用及应用  15-16
  1.2 药用植物的化学变异  16-19
    1.2.1 化学变异的类型  16-18
    1.2.2 化学变异的研究方法  18-19
2 立题依据  19-20
3 材料与方法  20-29
  3.1 材料、仪器和试剂  20-21
  3.2 研究方法  21-29
    3.2.1 标准溶液的配制  21
    3.2.2 提取条件的优化  21-22
    3.2.3 色谱条件的优化  22-23
    3.2.4 甘西鼠尾草指纹图谱的建立  23-24
    3.2.5 样品中八种有效成分含量的同时测定  24-25
    3.2.6 总黄酮、总酚酸含量的测定  25-26
    3.2.7 抗氧化活性评价  26-27
    3.2.8 总黄酮、总酚酸含量与抗氧化活性相关性分析  27
    3.2.9 矿质元素含量的测定  27-29
4 结果与分析  29-48
  4.1 甘西鼠尾草指纹图谱的建立  29-35
    4.1.1 提取条件的优化  29-30
    4.1.2 色谱条件的优化  30-31
    4.1.3 甘西鼠尾草指纹图谱的建立  31-35
  4.2 样品中八种有效成分含量的同时测定  35-39
    4.2.1 方法学考察  35-37
    4.2.2 样品中八种有效成分含量测定结果  37-38
    4.2.3 八种有效成分含量相关性分析  38-39
  4.3 总黄酮与总酚酸含量的测定  39-41
    4.3.1 总黄酮含量的测定  39-40
    4.3.2 总酚酸含量的测定  40-41
  4.4 抗氧化活性研究  41-44
    4.4.1 还原力测定  41-42
    4.4.2 DPPH·清除能力测定  42-43
    4.4.3 超氧阴离子自由基清除能力测定  43-44
  4.5 总黄酮、总酚酸含量与抗氧化活性相关性分析  44-45
  4.6 矿质元素含量的测定  45-48
    4.6.1 方法学考察  45-46
    4.6.2 样品中矿质元素含量的测定  46-48
5 讨论  48-53
  5.1 甘西鼠尾草指纹图谱  48-49
    5.1.1 提取条件的优化  48
    5.1.2 色谱条件的优化  48-49
    5.1.3 指纹图谱的建立  49
  5.2 样品中八种有效成分含量的同时测定  49-51
  5.3 甘西鼠尾草中总黄酮、总酚酸与抗氧化活性的相关性研究  51
  5.4 样品中矿质元素含量的测定  51-53
6 结论  53-55
参考文献  55-60
致谢  60-61
攻读硕士期间科研成果  61

甘西鼠尾草种内化学变异的研究

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