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梨火疫病菌T6SS核心基因vasD-1和vasD-2的功能初析

作　者: 吴燕
导　师: 胡白石
学　校: 南京农业大学
专　业: 植物病理学
关键词: 梨火疫病菌 vasD-1 vasD-2 致病性 T6SS
分类号: S436.612.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 2次
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内容摘要

梨火疫病菌(Erwinia amylovora)是一类危害严重的植物病原细菌,它可以侵染40多个属220多种植物,传播迅速,现已广泛分布于美国、英国、德国、法国、澳大利亚、日本、埃及等世界四十多个国家和地区。近些年来对梨火疫病菌致病机理的研究主要集中在对其毒性因子分子机制的研究上。2006年,科学家报道了在霍乱弧菌(Vibrio cholerae)和铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)中存在一种新型的分泌系统,并将其命名为Ⅵ型分泌系统(T6SS)。目前关于T6SS与革兰氏阴性病原菌致病性的关系尚未有深入的研究,但是T6SS对细菌毒力的影响已在许多病原细菌中报道。本研究鉴定并克隆出梨火疫病菌T6SS核心基因vasD的同源基因vasD-1和vasD-2,并通过同源重组的方法,构建了vasD-1和vasD-2基因的突变体以及互补子,分别对致病性、过敏性反应、胞外多糖、鞭毛运动等一系列与致病相关的表型进行了功能初析。结果显示,vasD-1基因影响梨火疫病菌对梨幼果和叶片的致病性、胞外多糖的产生、H2O2耐受能力和生物膜的形成,但是并不影响梨火疫病菌激发烟草过敏性反应的能力,并且在生长速度方面与野生型菌株相比也没有明显的差异。VasD-2基因不影响梨火疫病菌的致病性。这些结果显示vasD-1基因在梨火疫病菌中对其致病性起着关键性的作用,也表明T6SS是与梨火疫病菌的致病相关。

全文目录

摘要  5-6
ABSTRACT  6-7
引言  7-8
第一篇：文献综述  8-17
  1 梨火疫病的历史、症状及生物学特性  9-11
    1.1 梨火疫病的简史  9
    1.2 梨火疫病菌的分类地位  9
    1.3 梨火疫病菌的地理分布  9-10
    1.4 梨火疫病菌的寄主植物  10
    1.5 梨火疫病菌的生物学特性  10-11
  2 Ⅵ分泌系统研究进展  11-17
    2.1 T6SS的鉴定  11
    2.2 T6SS的装置  11-13
    2.3 T6SS基因簇特征  13-14
    2.4 T6SS的功能  14-15
    2.5 梨火疫病菌T6SS结构特点  15-17
第二篇：研究内容  17-47
  梨火疫病菌T6SS核心基因VASD-1和VASD-2的功能初析  19-47
    摘要  19
    1. 材料与方法  19-31
      1.1 材料  19-21
      1.2. 方法  21-31
    2 结果与分析  31-43
      2.1 梨火疫病菌的VasD蛋白  31-32
      2.2 梨火疫病菌NCPPB1665基因组DNA的提取  32-33
      2.3 载体的构建  33-34
      2.4 梨火疫病菌vasD-1和vasD-2突变体的构建  34-35
      2.5 互补菌株的构建  35-36
      2.6 vasD-1和vasD-2基因对梨火疫病菌NCPPB1665菌株生长的影响  36-37
      2.7 vasD-1和vasD-2基因对梨火疫病菌NCPPB1665菌株激发烟草过敏性反应的影响  37
      2.8 vasD-1和vasD-2基因对梨火疫病菌NCPPB1665菌株致病性的影响  37-40
      2.9 vasD-1和vasD-2基因对梨火疫病菌NCPPB1665菌株过氧化氢耐受性能力的影响  40
      2.10 vasD-1和vasD-2基因对梨火疫病菌NCPPB1665菌株游动性的影响  40-42
      2.11 vasD-1和vasD-2基因对梨火疫病菌NCPPB1665菌株生物膜的影响  42
      2.12 vasD-1和vasD-2基因对梨火疫病菌NCPPB1665菌株胞外多糖分泌的影响  42-43
    3. 讨论  43-47
参考文献  47-57
致谢  57

梨火疫病菌T6SS核心基因vasD-1和vasD-2的功能初析

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