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诱抗剂诱导油菜抗菌核病的研究

作　者: 赵柳
导　师: 黄云
学　校: 四川农业大学
专　业: 植物病理学
关键词: 油菜菌核病诱抗剂系统抗性诱抗生理机制
分类号: S435.654
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

油菜菌核病是威胁油菜生产的重要病害,引起油菜菌核病的病原菌是核盘菌Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary,该菌危害重、在病残体上形成的菌核抗逆性强、防治难度大。一种新型有效环保的防治病害途径是使用诱抗剂诱导植物提高其抗病性,目前在国内外开展了较多研究,并在各种植物和病害的互作体系中取得了一定成效。但关于诱抗剂对油菜菌核病的诱导效果还缺乏研究,为此,本文就BTH、TDL、C-22、 ZHS-1、ZHH-4、BABA、SZG-7、C-13和ZHS-2共9种诱抗剂对油菜菌核病的诱导抗性进行研究,并对SZG-7和BABA诱导油菜抗菌核病的生理机制做了较深入的研究,旨在为防控油菜菌核病提供依据。本研究在以下方面取得了进展：1.抗菌核病诱抗剂的筛选及其诱抗效果供试的9种诱抗剂中,C-22、ZHS-1、ZHH-4、C-13和ZHS-2不能诱导油菜幼苗抗菌核病,BTH、TDL、BABA和SZG-7能诱导油菜幼苗抗菌核病。其对病斑面积的相对抑制率在7.84%-43.98%。诱抗效果强弱依次为：SZG-7>BABA>BTH>TDL;100mg/LSZG-7的诱抗效果最高,对病斑面积的相对抑制率达43.98%;10mg/LBTH的诱抗效果最低,其抑制率仅为7.84%；TDL随着浓度增加诱抗效果增强,SZG-7、 BABA和BTH随着浓度增加诱抗效果先增强后减弱；4种均表现为随着处理时间的延长其诱抗效果减弱。为检验BTH、TDL、BABA和SZG-7是否是杀菌剂,确定其抗病作用是诱导机制还是杀菌机制,进行了离体抑菌试验。结果表明,在PDA平板上4者的菌丝生长速度、颜色及扩散情况均与对照一致,说明在供试浓度范围内4者对油菜菌核病菌菌丝没有直接的抑制作用,其能有效抑制病斑扩展是由诱导油菜自身抗性所引起的。不同的诱导方法对诱抗效果影响很大,测定了100mg/LSZG-7和100mg/LBABA通过喷雾法、注射法和灌根法处理后病斑而积的相对抑制率；结果表明,病斑相对抑制率大小均表现为：喷雾法>灌根法>注射法。植物经诱抗剂处理后表现出诱导抗性需要一定的时间间隔,本研究测定了诱抗剂的最佳诱导时间间隔及持续期；试验表明：100mg/LSZG-7的最佳诱导时间间隔是3d,持续期可达15d;100mg/LBABA的最佳诱导时间间隔是4d,持续期至少是15d。诱导抗性可以分为局部抗性(LIR)和系统抗性(SAR),本研究中SZG-7和BABA表现的都是系统抗性,但其处理的局部抗性强于未处理部分的抗性。在处理浓度和处理间隔期一定的条件下,增加诱导处理次数能使诱抗效果增强。2.诱抗剂诱导油菜抗菌核病生理机制研究多种机制决定植物诱导抗性,包括了组织病理学机制、生理生化机制和分子生物学方而,本研究中主要测定与诱导抗性相关的酶活性变化及植物抗逆指标MDA的含量,结果表明：1、接种、诱导和诱导并接种处理均能使SOD、POD、CAT、PPO、 PAL和p-1,3-葡聚糖酶活性呈现上升的趋势,并高于对照处理；其中接种处理后相关酶活迅速上升,诱导并接种处理次之,诱导处理上升最晚：从活性上升的幅度来看,所有处理呈现这样的规律：诱导接种>诱导>接种；随着处理时间的延长相关酶活逐渐降低。2、接种处理后MDA含量先升高后与对照持平,诱导处理和诱导并接种处理后MDA含量随着时间的延长先降低后保持不变。这些生理变化与SZG-7和BABA诱导油菜抗菌核病的效果相一致,可初步认为这些生理变化是SZG-7和BABA诱导油菜抗菌核病的生理机制。3.田间试验本研究测定了室内诱导油菜抗菌核病效果最好的100mg/LSZG-7的田间防效,结果表明：100mg/LSZG-7的防效达62.23%,仅次于50%多菌灵的79.91%,可见SZG-7作为油菜抗菌核病的诱抗剂有研究开发潜力。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-11
第一章文献综述  11-24
  1 油菜菌核病概况  11-14
    1.1 危害症状  11-12
    1.2 病原物  12
    1.3 病害循环  12-13
    1.4 防治措施  13-14
  2 植物诱导抗病性的研究进展  14-23
    2.1 诱导抗病性的一般特点  15-16
    2.2 植物诱导因子的种类  16-19
    2.3 植物诱导抗性机理  19-23
  3 选题目的与意义  23-24
第二章诱抗剂的筛选  24-41
  1 材料与方法  24-27
    1.1 供试油菜苗的准备  24
    1.2 供试培养基的制备  24
    1.3 供试菌株  24
    1.4 供试诱抗剂  24
    1.5 主要设备  24-25
    1.6 抗油菜菌核病诱抗剂的筛选  25
    1.7 诱抗剂的离体抑菌作用  25
    1.8 诱导方法的确定  25-26
    1.9 诱导油菜抗菌核病的最佳间隔期与持续期的测定  26
    1.10 诱导油菜抗菌核病系统抗性的测定  26
    1.11 诱导次数与油菜抗菌核病关系的测定  26-27
  2 结果与分析  27-39
    2.1 油菜抗菌核病诱导剂的筛选及其诱抗效果  27-33
      2.1.1 不同浓度BTH对油菜抗菌核病的诱抗效果  27-28
      2.1.2 不同浓度TDL对油菜抗菌核病的诱抗效果  28
      2.1.3 不同浓度C-22对油菜抗菌核病的诱抗效果  28-29
      2.1.4 不同浓度ZHS-1对油菜抗菌核病的诱抗效果  29-30
      2.1.5 不同浓度ZHH-4对油菜抗菌核病的诱抗效果  30
      2.1.6 不同浓度BABA对油菜抗菌核病的诱抗效果  30-31
      2.1.7 不同浓度SZG-7对油菜抗菌核病的诱抗效果  31-32
      2.1.8 不同浓度C-13对油菜抗菌核病的诱抗效果  32
      2.1.9 不同浓度ZHS-2对油菜抗菌核病的诱抗效果  32-33
    2.2 供试诱抗剂对油菜菌核病菌离体活性的影响  33-35
    2.3 不同诱导方法的诱抗效果比较  35-36
    2.4 诱抗剂诱导油菜抗菌核病的最佳诱导间隔期和持续期  36-37
    2.5 BABA和SZG-7诱导油菜抗菌核病的系统抗性表现  37-38
    2.6 诱导次数对油菜抗菌核病的影响  38-39
  3 结论与讨论  39-41
    3.1 油菜抗菌核病诱抗剂的筛选及其诱导效果  39
    3.2 诱抗剂的对油菜菌核病菌离体活性的影响  39
    3.3 不同诱导方法的诱抗效果比较  39-40
    3.4 系统抗性、诱导次数、最佳诱导间隔期和持续期  40-41
第三章 BABA和SZG-7诱导油菜抗菌核病的生理生化机制研究  41-57
  1 材料与方法  41-47
    1.1 供试诱抗剂  41
    1.2 供试油菜幼苗的培育及供试病原菌的制备  41
    1.3 主要设备  41-42
    1.4 试验中所用试剂的配制  42-43
    1.5 诱导处理与挑战接种  43
    1.6 取样时间及样品保存  43
    1.7 相关酶活性的测定方法  43-47
      1.7.1 超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定  43-44
      1.7.2 过氧化物酶(POD)活性的测定  44
      1.7.3 过氧化氢酶(CAT)活性测定  44-45
      1.7.4 多酚氧化酶(PPO)活性测定  45
      1.7.5 苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的测定  45
      1.7.6 β-1,3-葡聚糖酶的活性测定  45-46
      1.7.7 丙二醛(MDA)及可溶性糖含量的测定  46-47
  2 结果与分析  47-54
    2.1 超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化  47-48
    2.2 过氧化物酶(POD)活性的变化  48-49
    2.3 过氧化氢酶(CAT)活性变化  49-50
    2.4 多酚氧化酶(PPO)活性变化  50-51
    2.5 苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的变化  51-52
    2.6 β-1,3-葡聚糖酶的活性的变化  52-53
    2.7 丙二醛(MDA)含量的变化  53-54
  3 结论与讨论  54-57
第四章田间试验  57-60
  1 实验材料与方法  57-58
    1.1 试验时间和地点  57
    1.2 试验药剂  57
    1.3 试验田块设置  57
    1.4 试验处理  57
    1.5 发病情况调查  57-58
  2 结果与分析  58
  3 结论与讨论  58-60
参考文献  60-67
致谢  67

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