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三七和栀子有效成分对甲醛损伤神经细胞的保护作用及其机制

作　者: 陈金燕
导　师: 华茜
学　校: 北京中医药大学
专　业: 微生物与生化药学
关键词: 复方通络救脑京尼平苷甲醛神经保护三七总皂苷
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

研究背景：中药复方通络救脑具有健脑益智、养心安神的功效,在痴呆的预防和治疗中得到了应用,本实验室在前期动物实验中发现,通络救脑有效成分栀子苷和三七总皂苷对于老年痴呆具有一定的疗效。甲醛应激对中枢神经系统造成的慢性损伤是老年认知功能障碍的重要危险因素之一。本课题研究甲醛应激条件下,栀子和三七有效成分对神经损伤的保护作用,从而揭示其治疗老年痴呆的分子机制。研究方法：本文利用小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a细胞系)的甲醛应激模型,检测通络救脑及其主要成分京尼平苷和三七总皂苷,对于细胞活力、形态、凋亡及基因表达水平的影响。CCK-8检测法、细胞骨架染色法和流式细胞术分别用于检测细胞活力、细胞形态及细胞凋亡；高效液相色谱检测法用于检测药物对于甲醛的清除能力；实时荧光定量PCR检测药物抗凋亡作用在基因表达水平上的影响。研究结果：24h甲醛(0.09mM)处理能够显著降低细胞活力,改变细胞形态,促进细胞凋亡。栀子和三七配伍能够挽回甲醛应激对细胞造成的负面效应。京尼平苷(200μ M)能够起到同样的挽回作用,但是三七总皂苷不能挽回甲醛对细胞造成的损伤。研究结论：栀子和三七配伍能够保护神经细胞,挽回甲醛毒性作用导致的细胞损伤,起到抗凋亡的作用,且发挥抗凋亡效应的成分是京尼平苷,而不是三七总皂苷,推测三七总皂苷在复方通络救脑中对于甲醛损伤的挽回效应中,起到了一定的配伍作用。本研究提示京尼平苷纯品在老年痴呆治疗中具有潜在的药物研发价值。

全文目录

目录  3-4
中文摘要  4-5
ABSTRACT  5-6
英文缩略语  6-7
文献综述  7-21
  一：阿尔兹海默病的病理机制  7-8
  二：甲醛与阿尔兹海默病的关系  8-15
  三：复方通络救脑及其组成成分的药理学分析  15-21
前言  21-23
材料和方法  23-31
  1 材料  23
  2 方法  23-31
实验结果  31-43
  1 细胞活力检测实验  31-36
  2 细胞凋亡检测实验  36-37
  3 细胞形态分析实验  37-39
  4 实时荧光定量PCR  39-40
  5 高效液相色谱法测定培养基中的甲醛浓度  40-43
实验讨论  43-45
  一：体内甲醛浓度与实验甲醛浓度的关系  43
  二：Akt信号通路参与细胞凋亡  43-45
结语  45-47
参考文献  47-53
致谢  53-55
个人简历  55-56

三七和栀子有效成分对甲醛损伤神经细胞的保护作用及其机制

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