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番石榴炭疽菌生物学特性及防治剂筛选

作　者: 郎国勇
导　师: 许文耀; 陈玉森
学　校: 福建农林大学
专　业: 植物病理学
关键词: 番石榴炭疽病生物学特性防治剂筛选 PCR检测
分类号: S436.67
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

番石榴炭疽菌生物学特性研究发现：该菌分生孢子大小为：14.82¹7.29μm×4.94⁶.18μm，附着胞大小为：6.67⁹.88μm×6.18⁸.65μm或者直径为6.67⁸.89μm。该菌在PDA中生长速率最快，菌丝最适生长温度为26℃，6℃时不能生长，38℃时死亡，菌丝和孢子的致死温度均为56℃水浴5min。最适产孢培养基为PK（PSA里含KNO₃4g，酵母浸膏2g，蛋白胨3g，pH=5），全光照条件有利于该菌产孢且孢子萌发最佳温度为26℃。当pH=7时，6h后孢子萌发产生的芽管最长，为19.15μm。该菌菌龄为7d时孢子萌发率和附着胞产生率最高，分别为54.0%和53.4%，番石榴煎汁和叶汁能促进该菌孢子萌发，但不利于附着胞的产生。72h后部分孢子萌发产生5个附着胞。番石榴果实潜伏病害和种子带菌调查结果表明：炭疽菌是番石榴重要的潜伏病原菌，但发病果实种子内部和外部均不带有该菌。该菌能从伤口入侵番石榴叶片，能直接侵染果实。在水中和植株上裁剪番石榴枝条对枝条离体成活无影响，离体枝条水培时，套袋不利于其成活。番石榴健果和病果靠接能使健果严重发病。番石榴离体枝条在56℃水浴处理5min，7d后仍能成活，但经水浴的叶片枯萎。番石榴炭疽菌室内毒力测定结果表明：咪鲜胺对该菌菌丝生长抑制效果最好，EC₅₀为0.078mg/L。溴菌腈对该菌孢子萌发的抑制效果最好，EC₅₀为2.11mg/L。使用胶胞炭疽菌特异性引物E1/E2能从番石榴炭疽菌ITS区扩增出329bp的条带，而在其他几种番石榴病原菌和炭疽菌属的几种非胶胞炭疽菌中无法扩增出此条带，用此方法可以快速检测番石榴果实上的胶胞炭疽菌。

全文目录

摘要  8-9
Abstract  9-11
第一章前言  11-16
  1 番石榴的分布和营养价值  11
  2 番石榴主要栽培品种  11
  3 炭疽菌危害的和分类  11-12
  4 番石榴病害研究概况  12-15
    4.1 番石榴主要病害  12-13
    4.2 番石榴炭疽病发病规律  13
    4.3 番石榴炭疽病防治研究  13-15
      4.3.1 农业防治  14
      4.3.2 化学防治  14
      4.3.3 果实采后处理  14-15
  5 真菌分子生物学鉴定技术的发展  15
  6 本研究目的意义  15-16
第二章番石榴炭疽菌生物学特性研究  16-41
  1 材料与方法  16-23
    1.1 供试材料  16
      1.1.1 供试病菌  16
      1.1.2 供试培养基  16
    1.2 实验方法  16-23
      1.2.1 病原菌分离、鉴定  16-17
      1.2.2 番石榴炭疽菌致病性测定  17
      1.2.3 不同培养基对菌株菌丝生长、产孢的影响  17
      1.2.4 不同温度对菌株菌丝生长的影响  17-18
      1.2.5 正交试验筛选菌株产孢培养基  18
      1.2.6 不同pH对菌株生长、产孢的影响  18
      1.2.7 不同光照对菌株菌丝生长、产孢的影响  18
      1.2.8 不同时间的孢子萌发率  18-19
      1.2.9 光照对菌株孢子萌发的影响  19
      1.2.10 不同温度对菌株孢子萌发的影响  19
      1.2.11 不同pH对菌株孢子萌发的影响  19
      1.2.12 菌株的不同菌龄对孢子萌发和附着胞形成的影响  19
      1.2.13 不同营养对菌株孢子萌发的影响  19
      1.2.14 菌丝和孢子致死温度测定  19-20
      1.2.15 附着孢在不同时间的产生情况  20
      1.2.16 不同叶煎汁对附着孢形成的影响  20-21
      1.2.17 番石榴叶片和果实潜伏病害调查  21
      1.2.18 番石榴炭疽病病果种子带菌调查  21
      1.2.19 番石榴炭疽菌入侵方式测定  21-22
      1.2.20 不同裁枝方式和套袋处理对番石榴枝条体外存活的影响  22
      1.2.21 接种番石榴枝条实验  22
      1.2.22 水浴条件对番石榴枝条成活的影响  22-23
      1.2.23 病果靠接实验  23
  2 结果与分析  23-39
    2.1 番石榴炭疽病症状与病原菌鉴定  23-24
    2.2 番石榴炭疽菌致病性测定  24
    2.3 不同培养基对番石榴炭疽菌菌丝生长、产孢的影响  24-26
    2.4 不同温度对番石榴炭疽菌菌丝生长的影响  26
    2.5 正交试验筛选番石榴炭疽菌产孢培养基  26-27
    2.6 不同pH对番石榴炭疽菌菌丝生长、产孢的影响  27-28
    2.7 不同光照对番石榴炭疽菌菌丝生长、产孢的影响  28
    2.8 不同时间的孢子萌发率  28-29
    2.9 不同光照对番石榴炭疽菌孢子萌发的影响  29
    2.10 不同温度对番石榴炭疽菌孢子萌发的影响  29-30
    2.11 不同pH对番石榴炭疽菌孢子萌发的影响  30
    2.12 不同番石榴炭疽菌菌龄对孢子萌发和附着胞产生的影响  30-31
    2.13 不同营养对番石榴炭疽菌孢子萌发的影响  31-32
    2.14 番石榴炭疽菌菌丝和孢子致死温度测定  32
    2.15 附着孢在不同时间的产生情况  32-33
    2.16 不同叶煎汁对番石榴炭疽菌附着胞产生的影响  33
    2.17 番石榴果实潜伏病害调查  33-34
    2.18 番石榴炭疽病病果种子带菌调查  34-35
    2.19 番石榴炭疽菌入侵方式测定  35-37
    2.20 不同裁枝方式和套袋处理对番石榴枝条体外存活的影响  37-38
    2.21 接种番石榴枝条致病实验  38
    2.22 水浴处理对番石榴枝条成活的影响  38-39
    2.23 番石榴病果靠接实验  39
  3 小结与讨论  39-41
第三章防治剂对番石榴炭疽菌室内毒力测定  41-45
  1 材料与方法  41-43
    1.1 供试材料  41
      1.1.1 供试药剂  41
      1.1.2 供试培养基  41
    1.2 实验方法  41-43
      1.2.1 不同防治剂对番石榴炭疽菌菌丝室内毒力测定  41-42
      1.2.2 不同防治剂对番石榴炭疽菌孢子室内毒力测定  42-43
  2 结果与分析  43-44
    2.1 不同防治剂对番石榴炭疽菌菌丝室内毒力测定  43
    2.2 不同防治剂对番石榴炭疽菌孢子室内毒力测定  43-44
  3 小结与讨论  44-45
第四章番石榴炭疽菌PCR检测  45-49
  1 材料与方法  45-47
    1.1 供试材料  45
      1.1.1 供试菌株  45
    1.2 实验方法  45-47
      1.2.1 各病原菌基因组DNA的提取  45-46
      1.2.2 各病原菌ITS序列扩增、电泳检测  46-47
  2 结果与分析  47-48
  3 小结与讨论  48-49
第五章结论  49-50
附表  50-52
参考文献  52-57
致谢  57

番石榴炭疽菌生物学特性及防治剂筛选

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