学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

Yippee转基因果蝇品系的建立及基因功能的初步研究

作　者: 彭忠禄
导　师: 吴秀山
学　校: 湖南师范大学
专　业: 生物化学及分子生物学
关键词: Yippee基因心脏发育转基因果蝇
分类号: Q78
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 44次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

心脏发育是一个错综复杂的过程,在分子机理上被一套进化上保守的转录因子(NK2、MEF2、GATA、Tbx和Hand等)控制,它们决定心脏细胞的发育方向,决定了编码收缩蛋白基因的表达和心脏结构形态的建成。同时,它们在神经发生、心肌细胞发生、血细胞发生和癌细胞发生过程中也发挥着重要的调节作用。本文研究的Yippee基因编码一个高度保守序列的锌指结合蛋白,从真菌到人类的68种真核生物中都发现了它的同源蛋白。Yippee在果蝇发育的不同阶段以及在人类胎儿的不同组织中广泛表达,提示Yippee可能具有重要的生物学功能。2003年,通过酵母双杂交作用绘制的果蝇蛋白相互作用图谱显示,Yippee基因通过CG15676基因与心脏发育相关基因Wg、Mef2等有联系,即Yippee基因可能影响心脏发育调控基因的信号途径,故推测Yippee可能与心脏发育相关。我们采用RT-PCR的方法扩增果蝇Yippee基因cDNA,构建pUAS-Yippee-IRES-GFP绿色荧光过表达质粒,再通过果蝇胚胎显微注射和mini-white标记基因筛选建立了转基因果蝇品系。将该转基因品系与Hand-GAL4杂交、RNA干扰品系分别与Hand-GFP品系杂交,在荧光显微镜下观察杂交后代的心管和淋巴腺的表型改变,以期来确定Yippee基因在心脏发育调控中的可能作用

全文目录

中文摘要  3-4
英文摘要  4-8
第一章引言和文献综述  8-34
  第一节果蝇心脏发育  9-19
    一、果蝇心脏结构与发育的胚胎学  9-11
    二、果蝇心脏发育的基因调控  11-19
  第二节利用果蝇模型研究脊椎动物心脏发育信号调控  19-21
  第三节转基因果蝇模型的建立  21-31
  第四节 Yippee基因及其与心脏发育的潜在功能推测  31-32
  第五节课题研究意义  32-34
第二章材料与方法  34-54
  第一节材料  34-38
  第二节方法  38-54
    一、Yippee基因的获得  38-44
    二、转基因果蝇载体pUAS-Yippee-IRES-GFP的构建、检测及质粒大提  44-46
    三、果蝇胚胎显微注射  46-49
    四、转基因果蝇的筛选、平衡、定位以及PCR验证  49-51
    五、果蝇品系的杂交及杂交后代的观察  51-54
第三章结果与分析  54-69
  一、Yippee的全长cDNA、编码区及其编码蛋白的分析  54-55
  二、Yippee蛋白与其他物种同源蛋白的同源性比较及进化保守性分析  55-58
  三、pUAS-Yippee-IRES-GFP质粒构建的结果与分析  58-63
  四、胚胎显微注射结果及P转座子插入位点平衡定位分析  63-65
  五、转基因果蝇的PCR验证及其结果与分析  65-66
  六、果蝇品系的杂交及杂交后代观察的结果与分析  66-69
第四章讨论  69-76
  一、实验方法  69-73
  二、Yippee基因对果蝇心脏发育和果蝇淋巴腺发育的影响及其潜在的功能  73-76
参考文献  76-82
附录  82-84
致谢  84-85

Yippee转基因果蝇品系的建立及基因功能的初步研究

内容摘要

全文目录

相似论文