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果蝇svp基因在心脏细胞生长尺寸调控中的作用及小鼠心脏发育候选基因的表达研究

作　者: 李艳梅
导　师: 袁婺洲；吴秀山
学　校: 湖南师范大学
专　业: 遗传学
关键词: svp基因生长尺寸调控心脏发育候选基因胚胎原位杂交免疫组织化学
分类号: Q3
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

发育过程中细胞生长尺寸的调控研究是刚刚在国际上兴起的一个全新的领域,每一个器官与个体的正常发育过程都会要面对生长尺寸的最终抉择,因此细胞生长尺寸的调控是发育生物学的基本问题。同时由于细胞生长尺寸的改变也会引起发育的异常与癌变的产生,与许多人类疾病产生直接的联系,因而实践意义也重要。但是目前关于细胞与器官生长尺寸的调控研究主要在果蝇眼、翅及肿瘤组织中进行的,而研究心脏前体细胞生长尺寸的调控研究还没开始。Svp(seven-up)是类固醇受体家族中的一种孤儿受体,与复眼中的光感受器细胞分化及神经细胞的分化有关。后来发现svp与果蝇心脏前体细胞分化也有关系。果蝇心脏是一个线性的管状结构,位于胚胎背中线的表层下,由具有收缩特性的心肌细胞和不能收缩的副心肌细胞组成。svp基因在心肌细胞和副心肌细胞都有表达。但是svp基因与心脏前体细胞的生长大小是否有关还没有报道。本文通过RNAi技术和免疫组化技术,用心脏特异性的抗体检测了svp基因不同突变系的表型改变,以期来确定svp基因在细胞生长尺寸调控中的可能作用。此外,本论文还利用胚胎原位杂交、western blot、免疫组化、免疫荧光及胶体金等技术对一系列人类心脏发育基因的小鼠同源基因开展了表达研究,为下一步开展这些候选基因的功能研究奠定了基础。

全文目录

摘要  3-5
ABSTRACT  5-9
第一章引言和文献综述  9-26
  1.1 果蝇心脏发育的过程  9-10
  1.2 果蝇心脏发育的相关基因及其信号途径  10-21
  1.3 svp与Ras信号途径  21-24
  1.4 课题研究意义  24-26
第二章材料与方法  26-39
  2.1 材料  26-30
  2.2 方法  30-39
第三章结果与分析  39-45
  3.1 svp基因RNAi结果  39
  3.2 svp基因及其相关基因突变表型分析  39-45
第四章讨论  45-48
第五章小鼠心脏发育候选基因的表达研究  48-73
  5.1 前言  48-49
  5.2 材料与方法  49-60
  5.3 小鼠整体胚胎原位杂交实验结果  60-66
  5.4 KLHL31基因western blot实验结果及分析  66-67
  5.5 KLHL31基因免疫荧光结果  67
  5.6 KLHL31基因免疫组化结果  67-70
  5.7 KLHL31基因免疫金实验结果  70
  5.8 讨论  70-73
参考文献  73-77
附录  77-81
后记  81-83

果蝇svp基因在心脏细胞生长尺寸调控中的作用及小鼠心脏发育候选基因的表达研究

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