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用酵母双杂交体系研究与FMRP相互作用的蛋白

作　者: 陈雨亭
导　师: 吴冠芸；梁植权；沈岩
学　校: 中国协和医科大学
专　业: 分子生物学
关键词: 相互作用蛋白酵母双杂交体系外显子博士学位论文异构体医科大学结构域蛋白相互作用转录激活协和
分类号: R346
类　型: 博士论文
年　份: 1998年
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内容摘要

脆性X综合征是最常见的遗传性智力低下疾病，其主要临床表现为程度不等的智力低下、巨睾和长脸、大耳等典型的面部特征。其致病基因为脆性X智力低下基因1(fragile X mental retardation gene 1，FMR1)。FMR1基因的低表达或不表达导致脆性X综合征各种临床表现。 FMR1基因编码的蛋白FMRP的功能研究一直是脆性X综合征分子机制研究的焦点。人们从FMR1基因表达的调控及其在各种组织中和各发育阶段的表达、FMR1基因的选择性剪接表达、FMRP与RNA的相互作用、FMRP与其它蛋白的相互作用以及FMRP在细胞中的定位等多方面对其功能进行了研究。认为FMRP可能与mRNA的代谢有关，可能参与翻译调节等生物过程。但目前对其具体功能仍不明确。本工作从与FMRP相互作用蛋白的角度出发，寻找FMRP与已知细胞过程的联系，试图给FMRP功能研究提供有用的信息。酵母双杂交体系是研究蛋白-蛋白相互作用的一种很有效的方法，它将相互作用的两个蛋白分别与转录因子的DNA激活结构域和转录激活结构域融合成两个杂交体，在酵母中通过报告基因表达情况反映两蛋白间的相互作用。通过筛库还可以直接得到与目的蛋白相互作用蛋白的DNA序列。我们采用酵母双杂交体系研究FMRP与其它蛋白的相互作用，主要内容分以下两部分： 1、用酵母双杂交体系研究六种FMRP天然异构体与FXR1的相互作用。 FXR1、FXR2是与FMR1高度同源的两个基因，它们编码的蛋白均能与FMRP相互作用。相互作用的区域定位在FMRP的第7外显子。为了研究FMR1基因选择剪接表达对FMRP与FXR1相互作用的影响，我们选择由FMR1第12、14、15外显子不同选择剪接表达产生的6种FMRP异构体，用酵母双杂交体系研究它们与FXR1的相互作用。这六种异构体均为组织中天然存在的异构体。iso 1为全长FMRP，iso7为缺少12外显

全文目录

中文摘要  5-8
英文摘要  8-11
前言  11-21
第一章六种FMRP异构体与FXR1蛋白相互作用的研究  21-43
第二章用酵母双杂交体系筛选与FMRP相作用的蛋白  43-83
总结  83-85
参考文献  85-93
综述一酵母双杂交体系(YeastTwo-HybridSystem)：一种研究蛋白-蛋白相互作用的强有力方法  93-98
综述二核酸序列数据库  98-109
附录  109-117
  附录Ⅰ 本工作所用引物序列  109-110
  附录Ⅱ mUBC9与hUBC9 cDNA同源性比较  110-114
  附录Ⅲ FMRP异构体和FMRF_(327-518)的氨基酸序列  114-117
简历  117-119
致谢  119

用酵母双杂交体系研究与FMRP相互作用的蛋白

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