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Flavopiridol联合顺铂对人U2骨肉瘤细胞的生长抑制作用

作　者: 付文锋
导　师: 刘天礽
学　校: 南昌大学
专　业: 外科学
关键词: Flavopiridol 顺铂人骨肉瘤细胞U2-OS 协同作用
分类号: R738
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：探讨小分子细胞周期素依赖性蛋白激酶Flavopiridol(FP)和顺铂(DDP)单独以及联合应用对人U2骨肉瘤细胞的生长抑制作用,为Flavopiridol作为骨肉瘤化疗辅助药物的应用提供理论基础。方法：在体外培养人U2骨肉瘤细胞(U2-OS)。将细胞分为4组：(1)空白对照组, (2)FP组：单纯用FP处理培养细胞,(3)DDP组：单纯加入血浆平均峰值浓度顺铂处理培养细胞。(4)联合用药组(FP+DDP)：加入血浆平均峰值浓度顺铂和Flavopiridol处理共同培养。采用MTT法检测Flavopiridol单独和联合顺铂后对人U2骨肉瘤细胞增殖的影响,并计算Flavopiridol对肿瘤细胞的半数抑制浓度IC50值。流式细胞仪分析用药后对细胞凋亡和细胞周期的影响。结果：Flavopiridol对人U2骨肉瘤细胞增殖有抑制作用,并能诱导细胞凋亡。不同浓度的Flavopiridol (1)空白对照组(无药物组)；(2)50nmol/L FP组;(3)100nmol/L FP组；(4)200 nmol/L FP组;(5)400 nmol/L FP组;(6)1000 nmol/L FP组作用人U2骨肉瘤细胞24小时,各组细胞均表现出一定的抑制作用,分别为9.18±1.56%,19.55±±1.23%,23.25±±1.85%,27.22±±0.59%,33.15±1.99%,抑制率均不高,差异不明显。继续培养至48小时,各组抑制率分别为20.59±±3.15%,31.39±3.52%,41.41±±1.41%,52.21±±2.69%,68.86±±1.20%,各组间有明显组间差异(P<0.05)。表现为随着浓度的增加抑制率逐渐增大(P<0.05),Flavopiridol对人U2骨肉瘤半数抑制率IC5o值为340nmol/L。血浆平均峰值浓度顺铂和Flavopiridol联合应用对人U2骨肉瘤细胞随着时间的增加抑制率逐渐增大,联合用药组与FP和DDP单独用药组相比抑制率差异具有统计学意义(P<0.05)。Flavopiridol浓度为0、100、200、340、400nmol/L作用于人U2骨肉瘤细胞,其凋亡率分别为3.60%、7.13%、19.40%、38.90%、42.49%。表现为随着浓度的增大凋亡率逐渐增大；联合用药：空白对照组、DDP、FP、联合用药组(DDP+FP)其凋亡率分别为2.28%、13.03%、38.90%、56.11%,联合用药组相比两药单独应用组细胞凋亡率均明显提高。联合用药组(FP+DDP)相比DDP组细胞G1期细胞明显增加,S期细胞减少；联合用药组(FP+DDP)相比FP组G1期细胞减少,S期细胞增加。结论：Flavopiridol能抑制人U2骨肉瘤细胞的增殖,并能诱导细胞发生凋亡。Flavopiridol联合顺铂作用人U2骨肉瘤细胞时两种药物具有协同作用。Flavopiridol能增强人U2骨肉瘤细胞对顺铂的敏感性。

全文目录

摘要  3-5
ABSTRACT  5-8
第1章引言  8-10
第2章材料和方法  10-18
  2.1 材料  10-12
  2.2 方法  12-17
  2.3 统计处理  17-18
第3章结果  18-28
  3.1 药物作用对细胞增殖力的改变  18-21
    3.1.1 Flavopiridol对U2骨肉瘤细胞增殖的影响  18-19
    3.1.2 联合用药对U2骨肉瘤细胞增殖的影响  19-21
  3.2 流式细胞仪检测细胞凋亡  21-28
第4章讨论  28-32
第5章结论  32-33
致谢  33-34
参考文献  34-36
攻读学位期间研究成果  36-37
综述  37-46
  参考文献  43-46

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