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复方连翘—阿莫西林粉剂在猪可食性组织中残留的研究

作　者: 边栋
导　师: 李艳华
学　校: 东北农业大学
专　业: 基础兽医学
关键词: 猪复方连翘-阿莫西林粉剂超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法残留
分类号: S859.84
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

复方连翘-阿莫西林粉剂是实验室自行研制的防治猪链球菌病的复方药物,是由连翘提取物和阿莫西林及辅料组成。其中连翘为木犀科连翘属植物连翘(Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl)的干燥果实,为中国药典收载的常用中药,有抗炎、抗菌、抗病毒等作用。阿莫西林,又名羟氨苄青霉素,属于β-内酰胺类抗生素,为该复方药物残留研究的主要目标物,欧盟和我国农业部规定其在可食性组织中的最高残留限量均为0.05 mg/kg。为了保证该复方药物在临床的安全规范使用,保护人类的身体健康以及畜牧业的健康发展,本课题研究了复方阿莫西林在猪可食性组织中的残留。本试验建立了猪可食性组织中阿莫西林的超高效液相色谱-电喷雾串联质谱的测定方法。采用ACQUITY UPLC? BEH-C18色谱柱,乙腈:0.2%乙酸水溶液作为流动相进行梯度洗脱,超高液相色谱分离,电喷雾质谱分离,正离子多反应离子检测模式进行定性和定量分析。阿莫西林的线性范围为0.01μg/mL~1μg/mL,线性相关系数0.9993~0.9995;在0.025 mg/kg、0.05 mg/kg、0.1 mg/kg的3个添加水平的回收率在63.4±4.11%~74.1±4.18%;相对标准偏差在5.2%~6.4%;各组织的日内变异系数在5.9%~7.6%,日间变异系数在5.3%~12.4%。方法检出限0.01μg/g,定量限为0.03μg/g。选取15头体重约为20 kg的仔猪,口服给药剂量为阿莫西林2 mg/kg.b.w,连翘8 mg/kg.b.w,连续给药7 d。休药0 h,阿莫西林在肾脏残留浓度最高,其浓度为0.0409±0.0001 mg/kg,其余依次为肌肉和脂肪、肝脏、肺脏、心脏,均低于其最高残留限量(MRL=0.05 mg/kg)。休药12 h,阿莫西林在心脏、肝脏中的残留均未检出,在肺脏、肾脏、肌肉和脂肪的残留浓度分别是0.0110±0.0001 mg/kg、0.0277±0.0001 mg/kg、0.0280±0.0001 mg/kg,阿莫西林的残留量均比MRL低;休药24 h,各脏器组织均未检出阿莫西林。根据实测浓度法,该复方药物在猪体内的休药期暂定为0 h。选取15头体重约为20 kg的仔猪,口服给药剂量为阿莫西林2mg/kg.b.w,连续给药7 d。休药0 h,阿莫西林在肾脏的残留浓度同样最高,其浓度为0.0457±0.0001 mg/kg,其次为肌肉和脂肪、肝脏、肺脏、心脏,均低于其最高残留限量(MRL=0.05 mg/kg)。休药12 h,阿莫西林在心脏中的残留未检出,在肝脏、肺脏、肾脏和肌肉和脂肪的残留浓度分别是0.0110±0.0001 mg/kg、0.0113±0.0001 mg/kg、0.0303±0.0001 mg/kg、0.0257±0.0001 mg/kg,阿莫西林的残留量同样均比MRL低;休药24 h,各脏器组织同样均未检出阿莫西林。根据实测浓度法,单方药物在猪体内的休药期也暂定为0 h。经数据分析,复方药物中的连翘提取物对阿莫西林在猪组织中的残留及代谢规律影响较小,除了12 h复方阿莫西林与单方相比在肝脏中的残留量出现差异显著,其他各时间点各组织的残留量与单方相比差异均不显著。

全文目录

摘要  8-9
Abstract  9-11
1 前言  11-25
  1.1 食品安全概述  11-12
  1.2 阿莫西林概况  12-15
    1.2.1 阿莫西林的理化性质  12-13
    1.2.2 阿莫西林毒性及毒副作用的研究进展  13
    1.2.3 阿莫西林在动物体内的药动学研究进展  13-14
    1.2.4 阿莫西林残留的研究进展  14-15
  1.3 连翘的概况  15-20
    1.3.1 连翘的本草考证  15-16
    1.3.2 连翘的生物学特征  16-18
    1.3.3 连翘的药理作用  18-20
  1.4 阿莫西林样品前处理方法的研究进展  20
  1.5 阿莫西林检测方法的研究进展  20-23
    1.5.1 微生物测定法的研究进展  20-21
    1.5.2 免疫测定法的研究进展  21
    1.5.3 仪器分析法的研究进展  21-23
  1.6 本研究的目的与意义  23-25
2 材料与方法  25-30
  2.1 材料  25-26
    2.1.1 试验动物  25
    2.1.2 药品与试剂  25
    2.1.3 仪器设备  25-26
  2.2 方法  26-30
    2.2.1 试液配制  26
    2.2.2 给药与采样  26
    2.2.3 样品的处理  26-27
    2.2.4 检测条件  27-28
    2.2.5 方法学验证  28-29
    2.2.6 残留量及休药期的计算  29-30
3 结果  30-37
  3.1 质谱检测  30
    3.1.1 阿莫西林的质谱图  30
  3.2 色谱行为  30-31
  3.3 标准曲线和线性范围  31-33
    3.3.1 阿莫西林的标准曲线和线性范围  31-33
  3.4 准确度  33
    3.4.1 阿莫西林的准确度  33
  3.5 精密度  33-34
    3.5.1 阿莫西林的精密度  33-34
  3.6 最低检测限和最低定量限  34
  3.7 阿莫西林在猪可食性组织中的消除规律  34-37
    3.7.1 单方阿莫西林在猪可食性组织中的消除规律  34-35
    3.7.2 复方阿莫西林在猪可食性组织中的消除规律  35-37
4 讨论  37-41
  4.1 取样  37
  4.2 质谱条件的优化  37
  4.3 色谱条件的优化  37-38
  4.4 阿莫西林的样品前处理  38-39
    4.4.1 提取溶剂的选择  38
    4.4.2 样品的净化  38-39
  4.5 消除规律及休药期的确定  39-41
5 结论  41-42
致谢  42-43
参考文献  43-47
附录  47-52
攻读硕士学位期间发表的论文  52

复方连翘—阿莫西林粉剂在猪可食性组织中残留的研究

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