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蜈蚣提取物制备及药理活性研究

作　者: 周莉莉
导　师: 王艳辉；黄迎春
学　校: 北京化工大学
专　业: 生物化工
关键词: 少棘蜈蚣 提取物 抗惊厥 抑菌活性 多糖
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 228次
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内容摘要


蜈蚣是重要的中药材,传统以干燥蜈蚣全虫入药,具有抗惊厥、抗肿瘤、抗炎镇痛、抗衰老等多种生理功能。本论文以新鲜蜈蚣为原料,研究了蜈蚣醇提物的最佳提取条件,并且对蜈蚣醇提物及水提物在抗癫痫、抑菌两方面的活性进行研究比较,此外对醇提物、水提物提取时剩余沉淀部分采用碱提、水提两种方法进行粗多糖的提取分离,并得出水提法最佳提取条件。主要结论如下:(1)以乙醇浓度、提取时间、固液比三个因素为影响因子设计正交实验。综合考虑各个因素对醇提物得率、蛋白质含量两个指标的影响,最终确定了蜈蚣醇提物制备条件:乙醇浓度为60%,提取时间为2.5h,固液比为1:40。(2)蜈蚣水提物能够明显延长硝酸士的宁诱发小鼠的惊厥潜伏期,同时降低了死亡率,提高抗惊率。潜伏期高达(372±146.9)s,抗惊率达到50%,与对照组比较均有显著性差异(P＜0.01)。蜈蚣醇提物没有明显抗惊厥作用。(3)采用滤纸片、平板孔穴扩散法,测定蜈蚣醇提物及水提物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草杆菌黑色变种芽孢、白色念珠球菌、黑曲霉菌几种常见菌的抑制作用。结果表明蜈蚣醇提物、水提物对各供试细菌均有不同程度的抑制作用,对真菌抑制作用较弱,且醇提物抑菌效果明显强于水提物。用二倍稀释法确定醇提物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度,分别为250mg/mL、125mg/mL、62.5mg/mL。(4)采用热水浸提、碱液提取两种不同的方法对蜈蚣粗多糖进行提取,粗多糖的含量分别为8.87%、8.45%。以提取温度、提取时间、固液比为影响因子作正交实验设计,确定了热水浸提的最佳实验条件:提取温度为95℃,提取时间为4h,固液比为1:10。

全文目录


摘要  4-6
ABSTRACT  6-12
第一章 绪论  12-28
  1.1 蜈蚣的研究进展  12-16
    1.1.1 蜈蚣的种类  12
    1.1.2 蜈蚣的化学成分  12-13
    1.1.3 蜈蚣的药理作用  13-14
    1.1.4 临床应用  14-15
    1.1.5 毒性及不良反应  15
    1.1.6 有效成分的提取分离  15-16
  1.2 抗癫痫药物的研究进展  16-19
    1.2.1 抗癫痫药物  17-18
    1.2.2 癫痫的动物模型及发作等级标准  18-19
  1.3 天然产物抑菌活性研究  19-21
    1.3.1 具有抑菌活性的天然产物  19-20
    1.3.4 抑菌效果的微生物测定法  20-21
  1.4 多糖  21-25
    1.4.1 多糖概述  21-22
    1.4.2 多糖国内外研究现状  22
    1.4.3 动物多糖的研究  22-24
    1.4.4 多糖的提取、分离、纯化  24-25
  1.5 研究的目的与意义  25-26
  1.6 研究的主要内容与技术路线  26-28
    1.6.1 研究的主要内容  26
    1.6.2 研究的技术路线  26-28
第二章 蜈蚣醇提物的制备  28-40
  2.1 前言  28
  2.2 实验部分  28-31
    2.2.1 实验材料  28
    2.2.2 试剂与药品  28
    2.2.3 仪器与设备  28-29
    2.2.4 醇提物制备工艺流程  29
    2.2.5 蛋白质含量测定  29-30
    2.2.6 提取单因素实验  30-31
    2.2.7 正交实验设计  31
  2.3 结果与讨论  31-37
    2.3.1 蛋白质标准曲线  31-32
    2.3.2 单因素实验  32-35
    2.3.3 正交实验  35-37
  2.4 小结  37-40
第三章 蜈蚣提取物抗癫痫研究  40-46
  3.1 前言  40
  3.2 实验部分  40-42
    3.2.1 实验材料  40
    3.2.2 实验动物  40-41
    3.2.3 试剂与药品  41
    3.2.4 蜈蚣粗提物抗戊四氮惊厥实验  41
    3.2.5 蜈蚣提取物抗硝酸士的宁惊厥实验  41-42
  3.3 结果与讨论  42-45
    3.3.1 蜈蚣粗提物抗戊四氮惊厥实验  42-43
    3.3.2 硝酸士的宁惊厥模型  43
    3.3.3 蜈蚣提取物抗硝酸士的宁惊厥实验  43-45
  3.4 小结  45-46
第四章 蜈蚣提取物抑菌活性研究  46-54
  4.1 前言  46
  4.2 实验部分  46-48
    4.2.1 实验材料  46-47
    4.2.2 仪器与设备  47
    4.2.3 致病菌对数生长期的测定  47
    4.2.4 菌悬液制备  47
    4.2.5 采用滤纸片法测抑菌活性  47-48
    4.2.6 采用平板孔穴扩散法测抑菌活性  48
    4.2.7 最小抑菌浓度的测定  48
  4.3 结果与讨论  48-53
    4.3.1 致病菌对数生长期  48-50
    4.3.2 滤纸片法测蜈蚣提取物抑菌活性  50-51
    4.3.3 平板孔穴扩散法测抑菌活性  51-53
    4.3.4 最小抑菌浓度  53
  4.4 小结  53-54
第五章 蜈蚣粗多糖的提取分离  54-62
  5.1 前言  54
  5.2 实验部分  54-58
    5.2.1 实验材料  54
    5.2.2 试剂  54-55
    5.2.3 仪器设备  55
    5.2.4 蜈蚣粗多糖的提取工艺流程  55-56
    5.2.5 多糖含量测定  56-57
    5.2.6 多糖提取方法选择  57
    5.2.7 水提法正交实验  57-58
  5.3 结果与讨论  58-60
    5.3.1 葡萄糖标准曲线  58
    5.3.2 水提法与碱法所得粗多糖含量  58-59
    5.3.3 水提法正交实验结果  59-60
  5.4 小结  60-62
第六章 结论及建议  62-64
  6.1 结论  62-63
  6.2 建议  63-64
参考文献  64-68
致谢  68-70
研究成果及发表的学术论文  70-72
导师及作者简介  72-73
硕士研究生学位论文答辩委员会决议书  73-74

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学
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