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黄芪多糖的硒化修饰及其体外抗氧化作用的研究

作　者: 陈浒华
导　师: 黄克和
学　校: 南京农业大学
专　业: 临床兽医学
关键词: 黄芪多糖硒化修饰抗氧化
分类号: R284.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

黄芪是一味历史悠久,临床应用十分广泛,为历代中医最为常用的中药之一。其有效成分黄芪多糖具有多种药理作用。将多糖与硒有机结合成的硒多糖,其化学结构是硒与单糖上两个顺式相邻羟基形成五员环的亚硒酸酯。硒多糖作为一种有机硒化合物,充分发挥了硒和多糖的生理活性,使两者的作用相互协调并增强,同时有效提高了硒的生物可利用度及其作为生物必需微量元素的生理功能,毒性和副作用比无机硒大大降低。本研究选择中药黄芪作为研究对象,采用水提法分步提取出黄芪粗多糖,并通过去蛋白,去色素,层析过柱等纯化方法得到四种纯化后的黄芪多糖；然后通过硒化修饰使之有机结合上硒,制备得到具有更强功效的硒化黄芪多糖,并分析其体外抗氧化作用。为其作为免疫佐剂应用于畜禽疫苗从而增强疫苗的免疫效能提供理论依据和基础。试验1研究了黄芪多糖的提取和纯化方法。采用传统的水提醇沉法对蒙古黄芪根中的多糖进行提取,首先用一步醇沉法提取黄芪粗多糖(APSt),再用分步醇沉法提取并选择三种组分的黄芪多糖APS40、APS50和APS70。然后用三氯乙酸法脱除其中的蛋白,用过氧化氢去色素后,再用DEAE A-25柱和Sephadex G-75柱层析进一步纯化。结果表明,经纯化后,各组分黄芪多糖的多糖含量提高,蛋白质含量降低,表明所选用各方法可行,有利于提高多糖纯度。试验2研究了黄芪多糖的硒化修饰方法。采用钡离子、氢离子催化,将多糖类化合物与亚硒酸或其盐在酸性条件下反应进行黄芪多糖的硒化修饰,以产物量和产物中硒含量为指标,正交设计对硒化反应温度、亚硒酸钠添加量和硒化反应时间进行优选。9种条件所得9种多糖标记为seAPS-1、seAPS-2、seAPS-3、seAPS-4、seAPS-5, seAPS-6、seAPS-7、seAPS-8和seAPS-9,原子荧光吸收法测定其硒含量。用上述所得最佳修饰条件对一步提取的APSt和分步醇沉提取的APS40、APS50和APS60进行硒化修饰,并测定它们的产物硒含量。结果显示,反应温度70℃,5 mg/ml Na2SeO3溶液加入量为4ml、反应时间8 h为最佳条件,硒含量最高。试验3研究了黄芪硒多糖和未硒化的黄芪多糖对于羟自由基和超氧阴离子的清除能力,以及总还原力,从而体现其体外抗氧化活性的强弱。结果显示：黄芪多糖相比对照,对于羟自由基和超氧阴离子的清除作用明显提高,富硒后的黄芪多糖又比未硒化的黄芪多糖具有更强的清除能力,总还原力更强。黄芪硒多糖抗氧化活力与多糖浓度和硒含量成正相关性。

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摘要 5-7ABSTRACT 7-9符号及缩略语 9-10第一章文献综述 10-32 一、黄芪多糖的研究进展 10-15 二、硒的国内外研究进展及生物学功能 15-19 三、黄芪多糖的化学修饰 19-24 参考文献 24-32第二章黄芪多糖的分步提取与纯化 32-40 1 材料与方法 32-34 2 结果与分析 34-36 3 小结与讨论 36-38 参考文献 38-40第三章黄芪多糖的硒化修饰 40-52 1 材料与方法 40-42 2 结果与分析 42-48 3 小结与讨论 48-50 参考文献 50-52第四章硒化黄芪多糖的体外抗氧化性研究 52-62 1 材料与方法 52-55 2 结果与分析 55-59 3 小结与讨论 59-60 参考文献 60-62全文结论 62-64致谢 64

黄芪多糖的硒化修饰及其体外抗氧化作用的研究

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