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中草药中血管紧张素转化酶抑制剂筛选方法的研究

作　者: 洪韫嘉
导　师: 陈波
学　校: 湖南师范大学
专　业: 分析化学
关键词: 血管紧张素转化酶抑制剂固定化酶亲和色谱高效液相色谱
分类号: R284.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

血管紧张素转化酶(ACE)是肾素-血管紧张素系统中关键酶类之一,对人体血压调节起着重要作用。ACE抑制剂可以通过抑制ACE的活性,达到降血压的目的,也是目前临床广泛应用的降压药物。近年来研究发现ACE抑制剂广泛存在于天然药物中,这些天然的ACE抑制剂除具有降压功效外,副作用更小、安全性更高,更符合高血压患者对健康的期望。然而天然药物种类繁多,成分复杂,从天然药物中筛选ACE抑制剂也成为了研发新型降压药物的难点。为此,本论文对ACE抑制剂的筛选方法进行了研究。本论文主要研究工作如下:1.发展了检测ACE抑制剂体外活性的高效液相色谱法。应用本方法对23种中草药提取物进行了检测,结果发现有14种提取物对ACE具有抑制作用。2.以赖诺普利为配体、1,4-丁二醇-2-缩水甘油醚为联接臂、SepharoseCL-4B为固相载体,合成ACE亲和色谱胶,并将合成的亲和胶装填成柱。采用亲和色谱法,从猪肺粗提物中成功分离纯化出了ACE。方法简单,ACE的纯化效果好,适宜实验室自制ACE。3.制备壳聚糖微球,并以壳聚糖微球为载体、戊二醛为交联剂对ACE进行固定化。探讨了戊二醛浓度与ACE用量对固化酶活性的影响。结果表明ACE被固定化后,酶活的pH范围和热稳定性都比溶液酶有所增加,并且有很好的重复利用率和贮存稳定性。4.构建了亲和色谱联用HPLC从复杂体系中筛选ACEI的平台。采用固化ACE作为亲和介质,利用ACE抑制剂与ACE之间的亲和作用,结合高效液相色谱对亲和前后的体系进行检测,通过两者各组分色谱峰的差异,以此实现快速筛选复杂体系中的ACE抑制剂。

全文目录

中文摘要  3-5
英文摘要  5-10
第一章绪论  10-24
  1.1 引言  10-11
  1.2 血管紧张素转化酶与高血压  11-17
  1.3 ACEI的研究进展  17-22
  1.4 论文选题的意义和主要内容  22-24
第二章用 HPLC法从中草药中筛选 ACEI  24-34
  2.1 引言  24-25
  2.2 实验部分  25-27
  2.3 结果与讨论  27-32
  2.4 小结  32-34
第三章亲和色谱法分离纯化猪肺 ACE  34-43
  3.1 引言  34-35
  3.2 实验部分  35-39
  3.3 结果与讨论  39-42
  3.4 小结  42-43
第四章壳聚糖固化 ACE及其性质的研究  43-53
  4.1 引言  43
  4.2 实验部分  43-46
  4.3 结果与讨论  46-52
  4.4 小结  52-53
第五章亲和色谱法筛选天然药物中的ACEI  53-65
  5.1 引言  53-54
  5.2 实验部分  54-57
  5.3 结果与讨论  57-64
  5.4 小结  64-65
结语  65-66
参考文献  66-77
附录一: 攻读学位期间发表的相关论文  77-79
致谢  79

中草药中血管紧张素转化酶抑制剂筛选方法的研究

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