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华东地区汉族人群D2S1399和D5S2500基因座的遗传多态性研究及其等位基因分型标准物的构建

作　者: 夏水秀
导　师: 冯一中
学　校: 苏州大学
专　业: 病理学
关键词: D2S1399 D5S2500 遗传多态性等位基因分型标准物分子克隆
分类号: R394
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
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内容摘要

目的研究D2S1399和D5S2500基因座在中国华东地区汉族群体的遗传多态性,评估其在法科学中的应用价值;利用重组质粒制备这两个STR基因座的分型标准物。方法应用PCR、聚丙烯酰胺垂直电泳及银染技术检测D2S1399和D5S2500基因座的遗传多态性。从聚丙烯酰胺凝胶中分离出经PCR扩增后的等位基因片段,二次扩增并纯化后的等位基因片段被分别插入到PUC质粒载体中。利用DNA测序证实插入片段大小及结构的正确性后,用国际标准将插入的等位基因片段进行命名。再转染到适当的E. coli DH5αTM细胞内选择培养,以纯化质粒为模板,扩增出各基因座的等位基因片段后混合获得等位基因分型标准物。结果D2S1399和D5S2500基因座在中国华东汉族群体分别检出11个和9个等位基因,其观察杂合度分别为0.745和0.807,多态信息含量(PIC)分别为0.850和0.750,个体识别率分别为0.958和0.917,非父排除率(PE)分别为0.554和0.643。成功地建立了能大量生产的D2S1399及D5S2500基因座的标准等位基因片段的重组质粒库,并制备出大量优质分型标准物。结论D2S1399和D5S2500基因座是高度多态性的STR基因座,在法医学个人识别和亲子鉴定中有重要应用价值。通过分子克隆制备D2S1399及D5S2500基因座的等位基因分型标准物是一种实现D2S1399及D5S2500基因座分型标准化的可行方法。

全文目录

中文摘要  3-4
Abstract  4-6
第一部分华东地区汉族人群D2S1399和D5S2500基因座的遗传多态性研究及其法科学应用  6-20
  引言  6-7
  材料与方法  7-10
  结果  10-15
  讨论  15-17
  小结  17
  参考文献  17-20
第二部分 D2S1399 和D5S2500 基因座等位基因标准分型物的构建及其法医学应用研究  20-37
  引言  20-22
  材料与方法  22-27
  结果  27-31
  讨论  31-34
  小结  34-35
  参考文献  35-37
结论  37-38
在读期间发表文章  38-39
综述  39-49
  综述参考文献  47-49
附录一 Chelex-100 法提取DNA  49-50
附录二非变性聚丙烯酰胺凝胶连续缓冲系统垂直电泳  50-51
附录三银染显色  51-52
附录四凝胶分离目的片断的回收和扩增产物的纯化  52-53
致谢  53

华东地区汉族人群D2S1399和D5S2500基因座的遗传多态性研究及其等位基因分型标准物的构建

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