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整合素α5β1在EGF促A549肺腺癌细胞黏附和侵袭中的作用

作　者: 王俊瑞
导　师: 博晓真；闫晓红
学　校: 内蒙古医学院
专　业: 免疫学
关键词: 非小细胞肺癌 整合素α5β1 表皮生长因子 黏附 侵袭
分类号: R734.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要


目的明确EGF是否可增加A549肺腺癌细胞整合素α5β1表达量,并检测EGF所介导的细胞黏附和侵袭能力的增加是否可通过阻断整合素α5β1来消弱或消除,进而为非小细胞肺癌转移机制及寻找治疗的新靶点提供科学依据。方法分别采用RT-PCR法和流式细胞术检测不同浓度EGF作用48小时后,A549肺腺癌细胞整合素α5、β1的mRNA含量和蛋白表达水平变化及变化趋势;分别采用Fn黏附实验和Transwell小室法检测不同浓度EGF刺激下,A549肺腺癌细胞的黏附和侵袭能力是否发生相应变化,同时检测抗整合素α5β1单克隆抗体是否可阻断EGF介导的A549肺腺癌细胞黏附和侵袭能力的增加。结果1. RT-PCR:3组细胞整合素α5 mRNA表达水平无明显差异(p>0.05);1ng/mlEGF和10ng/mlEGF组细胞整合素β1 mRNA表达水平均显著高于对照组(p<0.01),但1ng/mlEGF和10ng/mlEGF组细胞整合素β1mRNA表达水平无明显差异(p>0.05)。2.流式细胞术:对照组A549细胞表面整合素α5和整合素β1表达均为阳性,且整合素α5表达水平较整合素β1高;3组细胞表面整合素α5表达水平无明显差异(p>0.05);1ng/mlEGF和10ng/mlEGF组细胞整合素β1表达水平均显著高于对照组(p<0.01),但1ng/mlEGF和10ng/mlEGF组细胞整合素β1表达水平无明显差异(p>0.05)。3. Fn黏附实验:对照组细胞Fn黏附率显著低于1ng/mlEGF和10ng/mlEGF组细胞(p<0.01),但后两组细胞Fn黏附率无明显差异(p>0.05)。4.侵袭实验:对照组细胞侵袭能力显著低于1ng/mlEGF和10ng/mlEGF组细胞(p<0.01),但后两组细胞侵袭能力无明显差异(p>0.05)。5.抗体封闭实验:抗体封闭实验中的4组细胞,任意两组Fn黏附率均存在显著性差异(p<0.05),同时3个抗体阻断组细胞Fn黏附率与抗体浓度呈负相关;抗体封闭实验的4组细胞中,除1μg/ml抗整合素α5β1 mAb组和10μg/ml抗整合素α5β1 mAb组穿膜细胞数无显著差异外,其它任意两组之间相比,穿膜细胞数均存在显著性差异(p<0.01)。结论1. EGF的刺激可使A549细胞整合素β1 mRNA和蛋白表达水平均显著增加,但与EGF浓度的变化无关,而整合素α5表达水平不受EGF影响;2. EGF可使A549肺腺癌细胞黏附能力和体外侵袭能力均显著增加,但不随EGF浓度的增加而继续增加;3.抗整合素α5β1mAb可显著减弱EGF介导的癌细胞黏附和侵袭能力的增加;4.整合素α5β1有望成为临床非小细胞肺癌靶向治疗的新靶点。

全文目录


中文摘要  4-6
英文摘要  6-8
论文题目  8-31
  材料和方法  9-18
  结果  18-23
  讨论  23-26
  结论  26-27
  参考文献  27-31
文献综述  31-41
  参考文献  36-41
英文缩略词  41-42
攻读学位期间发表文章情况  42-43
个人简历  43-44
致谢  44

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 呼吸系肿瘤 > 肺肿瘤
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