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人乳腺癌中Hsa-miRNA-133a表达及其临床意义

作　者: 项茹
导　师: 吴强；吴正升
学　校: 安徽医科大学
专　业: 病理学与病理生理学1
关键词: 乳腺癌 miRNAs miRNA-133a QRT-PCR 原位杂交
分类号: R737.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

背景:MicroRNAs (miRNAs or miRs)是一类长度为18～25个核苷酸的内源性非编码单链RNA分子,在动物、植物、病毒中广泛存在,其序列高度保守。其能够通过与对应的靶mRNA的3′非翻译区(3′UTR)的非完全或完全配对结合,从而阻止其翻译或破坏其稳定性,实现对基因表达的调控,从而调控细胞增殖、分化和凋亡等一系列生理进程,影响生物体的生长发育,现有的资料表明miRNAs与肿瘤的发生、发展、诊断及预后判断等方面均存在密切的联系。目前已经发现多种miRNA在乳腺癌中失调表达,但对miRNA-133a在乳腺癌发生发展中的作用研究尚不够深入。目的:比较正常乳腺细胞和乳腺癌细胞株中miRNA-133a的差异表达;比较正常乳腺组织、良性乳腺病变组织与乳腺癌组织中miRNA-133a的差异表达,分析miRNA-133a的表达与乳腺癌临床病理特征的关系;探讨miRNA-133a的生物学意义。方法:(1)在细胞培养的基础上,应用QRT-PCR技术检测正常乳腺细胞株HBL-100以及乳腺癌细胞株MDA-MB-468与MDA-MB-231的miRNA-133a表达;(2)收集安徽医科大学第一附属医院2009年7月至2010年6月间手术切除良性乳腺病变和乳腺癌新鲜组织30例,其中良性乳腺病变10例,没有淋巴结转移的乳腺癌10例,有淋巴结转移的乳腺癌10例,应用QRT-PCR技术检测各组织中的miRNA-133a表达;(3)采用组织芯片平台,应用原位杂交方法检测90例乳腺癌、26例乳腺良性病变组织和34例癌旁正常乳腺组织石蜡切片组织中miRNA-133a表达。结果:(1)miRNA-133a在乳腺癌细胞株MDA-MB-231与MDA-MB-468中与正常乳腺细胞株HBL-100相比均呈低表达并有差异(P < 0.05),具有显著的统计学意义; miRNA-133a在MDA-MB-231中表达低于MDA-MB-468,两者之间有差异(P < 0.05),具有显著的统计学意义。(2) miRNA-133a在没有淋巴结转移的乳腺癌组织(1.34±1.10)和有淋巴结转移的乳腺癌组织中(1.16±0.80)表达较新鲜的良性乳腺病变组织中(4.56±1.77)表达下调,且有差异(P < 0.05),具有显著的统计学意义;miRNA-133a表达在有淋巴结转移的乳腺癌组织中表达较没有淋巴结转移的乳腺癌组织中低,但无差异(P > 0.05)。(3)石蜡切片组织中,乳腺癌miRNA-133a阳性率(26.7%)低于乳腺良性病变(53.8%)和癌旁正常组织(44.1%)(P < 0.05),乳腺癌组织中miRNA-133a表达较良性病变及癌旁乳腺组织均降低(P <0.05)。(4)乳腺癌组织中miRNA-133a的阳性率与淋巴结的转移有关联(P < 0.05),和TNM分级呈负相关(P < 0.05)。乳腺癌组织miRNA-133a表达与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级、ER、PR及c-erbB-2过表达均无相关性(P﹥0.05)。结论:(1)与正常乳腺细胞相比,乳腺癌细胞中miRNA-133a的表达下调,miRNA-133a可能与乳腺癌的发生有关。(2)miRNA-133a在无/有淋巴结转移的乳腺癌组织中与新鲜的良性乳腺病变组织中相比表达明显降低,有淋巴结转移的乳腺癌组织中miRNA-133a表达虽低于无淋巴结转移乳腺癌组织,但无显著性差异,提示miRNA-133a低表达可能与乳腺癌的发展相关;(3)组织切片中乳腺癌miRNA-133a阳性率低于乳腺良性病变和癌旁正常组织,并与淋巴结的转移和TNM分级有关联,提示miRNA-133a参与乳腺癌的发生和发展过程,并可作为乳腺癌转移的潜在标志物。

全文目录

英文缩略词表  5-6
摘要  6-8
Abstract  8-11
前言  11-14
材料  14-18
方法  18-24
结果  24-33
结论  33
全文小结  33-35
参考文献  35-38
简历  38-39
致谢  39-40
综述  40-45
  参考文献  43-45

人乳腺癌中Hsa-miRNA-133a表达及其临床意义

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