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簇毛麦6V染色体短臂小片段易位系的分子细胞遗传学鉴定

作　者: 尤春芳
导　师: 陈佩度
学　校: 南京农业大学
专　业: 遗传学
关键词: 小麦簇毛麦小片段易位基因组原位杂交分子标记
分类号: S512.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

由于病虫害、逆境等不利因素对小麦产量和品质造成了很大的危害,提高对病虫和逆境的抗性已成为目前小麦育种工作的重要目标。簇毛麦具有抗多种病虫害、抗寒、耐旱等优良性状,是小麦种质改良的重要遗传资源。培育小麦—簇毛麦属间染色体小片段易位,有助于更好地在小麦遗传改良中利用簇毛麦有益基因。本研究采用分子细胞学方法对6VS/6AL易位系成熟雌配子辐射后代的结构变异材料进行筛选,得到10个中间插入易位系、9个小片段顶端易位系和1个6V短臂缺失系。本研究获得的6VS小片段涉及不同的片段长度和断裂位点,是精细定位Pm21基因和构建6VS物理图谱的重要材料。利用已定位到6V短臂不同区段的8个特异性分子标记对16株小片段结构变异材料进一步鉴定,明确了易位或缺失片段的大小。其中YC1-1、YC72-2、YC74-3、YC24-1涉及的6VS片段较小且高抗白粉病。顶端易位YC1—1和YC72-2含有6VS FL:0.45-0.58的染色体区段；顶端易位YC74-3易位断点在0.35-0.45之间,易位片段为易位断点到FL：1.00之间的6VS区段；中间插入易位YC24—1含有6VS FL:0.35-0.58的染色体区段。缺失材料YC51—4缺失断点在6VS FL:0.58-1.00,包含0.00-易位断点之间的6VS区段。本研究首次选育出1个高抗小麦白粉病的纯合小片段顶端易位系YC1(FL:0.45-0.58)和一个高抗白粉病的纯合中间插入易位系YC24(FL:0.35-0.58),利用所获得的6VS结构变异体并结合白粉病抗性鉴定,将Pm21基因更精确地定位在6VS FL值为0.45-0.58的染色体区段。

全文目录

摘要 6-7ABSTRACT 7-9第一部分文献综述 9-21 一. 簇毛麦有利基因向普通小麦的导入 9-13 1. 小麦白粉病及抗白粉病基因 9-10 2. 簇毛麦的利用价值 10-13 二. 普通小麦背景中外源染色质的鉴定 13-21 1. 利用原位杂交鉴定外源染色质 14-18 2. 利用分子标记标记鉴定外源染色质 18-21第二部分研究报告 21-51 一. 材料与方法 21-27 1. 材料 21-22 2 试验方法 22-27 2.1 根尖染色体制片 22-23 2.2 花粉母细胞减数分裂中期Ⅰ染色体制片 23 2.3 小麦、簇毛麦基因组DNA的提取 23-24 2.4 基因组原位杂交 24-26 2.5 辐射后代材料的小麦白粉病抗性鉴定 26 2.6 EST引物设计与合成 26 2.7 PCR反应 26-27 2.8 PCR扩增产物的检测 27 二. 结果与分析 27-44 1 小麦-簇毛麦小片段结构变异的筛选 27-30 2 6VS分子标记的定位及辐射后代材料的分子标记鉴定 30-38 2.1 6VS特异分子标记的染色体区段定位 30-31 2.2 辐射后代材料中6VS片段的分子标记鉴定 31-38 3 6VS小片段易位的白粉病抗性鉴定 38-39 4 纯合结构变异材料的选育 39-44 4.1 抗白粉病纯合顶端易位系09YC1的选育 39-40 4.2 抗白粉病纯合中间插入易位系09YC24的选育 40-42 4.3 抗白粉病纯合中间插入易位系09YC36的选育 42-43 4.4 感白粉病纯合缺失系09YC51-4的选育 43-44 三讨论 44-51 1. 辐射形成三种染色体结构变异 44-45 2. 抗病小片段插入易位、顶端易位的形成 45 3. Pm21的物理定位 45-47 4. GISH分析的局限性 47-50 5 CINAU15与小麦白粉病抗性 50-51全文结论 51-53参考文献 53-65致谢 65

簇毛麦6V染色体短臂小片段易位系的分子细胞遗传学鉴定

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