学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

壳聚糖基蛋白质固定化载体的制备及其性能研究

作　者: 邢楠
导　师: 田丰
学　校: 中国人民解放军军事医学科学院
专　业: 生物医学工程
关键词: 戊二醛—冰乙酸交联溶胀法多聚磷酸钠单凝聚法海藻酸钠复凝聚法壳聚糖蛋白质载体 BSA 通透性能凝血酶
分类号: R318.08
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
下　载: 290次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

本文采用戊二醛—冰乙酸交联溶胀法、多聚磷酸钠单凝聚法及海藻酸钠复凝聚法制备了壳聚糖基蛋白质载体，对三种不同方法制备的载体分别进行了BSA的固定化研究，利用OM、SEM、TEM考察了其外观形貌，对粒径、FTIR基团间键合情况、包封率、载药量及体外释放行为等作了较为深入的研究，并从产物提取、蛋白质活性保持及包封率等角度出发，对三种制备方法进行了比较。以FITC标记的BSA(FITC-BSA)为模型蛋白质，对海藻酸钠复凝聚法微胶囊膜的蛋白质双向通透性能作了较为深入的研究。研究表明，三种方法制备的载体均可对BSA进行固定化。由戊二醛—冰乙酸交联溶胀法制备的载体包封率在10％～40％之间，但残余的少量交联剂戊二醛，对蛋白质的活性会造成潜在影响；由多聚磷酸钠单凝聚法制备的载体包封率在20％～30％之间，但产物不易提取；由海藻酸钠复凝聚法制备的载体包封率较高，通过对实验条件的控制可达到85.37％，且未使用有机溶剂，制备条件温和，产物易提取，故适用于蛋白质的固定化。海藻酸钠复凝聚法微胶囊膜通透性能的研究显示，该微胶囊有体积相变特性，囊膜对FITC-BSA具有通透性，且FITC-BSA在膜上是先吸附后渗透的一个过程。海藻酸钙微胶囊通透性好于海藻酸钠—壳聚糖复凝聚法微胶囊，且在海藻酸钠—壳聚糖复凝聚法微胶囊中，当组成物壳聚糖和海藻酸钠溶液浓度都在1.0％以上时，壳聚糖浓度越小，蛋白质通透性能越好，海藻酸钠浓度对通透性能影响不显著。以海藻酸钠复凝聚法微胶囊作为载体对凝血酶的固定化进行了初步研究。结果显示，该微胶囊能对凝血酶进行固定化。动态凝血实验表明，该微胶囊凝血酶固定化效果较好，包封率较高，活性保持相对较好；生物相容性实验表明，该微胶囊会引起轻微炎症反应，植入后1周炎症明显，随植入时间延长炎症有所好转。

全文目录

摘要  3-4
ABSTRACT  4-9
第一章绪论  9-20
  1.1 壳聚糖  9-13
    1.1.1 来源  9
    1.1.2 性质  9-13
  1.2 蛋白质的固定化  13-17
    1.2.1 固定化载体及其选择原则  13
    1.2.2 固定化的方法  13-15
    1.2.3 固定化的优点  15-16
    1.2.4 固定化的研究进展  16-17
  1.3 凝血酶  17-19
    1.3.1 研究背景及现状  17
    1.3.2 凝血酶的作用  17-18
    1.3.3 凝血酶的结构及基本性质  18-19
  1.4 课题的提出和拟研究的内容  19-20
第二章壳聚糖戊二醛—冰乙酸交联溶胀法蛋白质固定化载体的制备及其性能研究  20-35
  2.1 前言  20-21
  2.2 实验部分  21-25
    2.2.1 材料与试剂  21
    2.2.2 仪器与型号  21-22
    2.2.3 壳聚糖戊二醛—冰乙酸交联溶胀法颗粒的制备  22-23
    2.2.4 分析测试  23-25
  2.3 结果与讨论  25-33
    2.3.1 OM观测  25-26
    2.3.2 SEM 观测  26
    2.3.3 目测  26-27
    2.3.4 粒径分析  27-29
    2.3.5 FTIR 分析  29
    2.3.6 包封率、载药量的分析  29-32
    2.3.7 体外释放行为分析  32-33
  2.4 结论  33-35
第三章多聚磷酸钠单凝聚法蛋白质固定化载体的制备及其性能研究  35-52
  3.1 前言  35
  3.2 实验部分  35-41
    3.2.1 材料与试剂  35-36
    3.2.2 仪器与型号  36-37
    3.2.3 多聚磷酸钠单凝聚法壳聚糖微球的制备  37-38
    3.2.4 分析测试  38-41
  3.3 结果与讨论  41-50
    3.3.1 OM观测  41
    3.3.2 TEM观测  41-42
    3.3.3 目测  42-43
    3.3.4 粒径分析  43-44
    3.3.5 FTIR分析  44-45
    3.3.6 紫外光谱分析  45-46
    3.3.7 微球对FITC-BSA固定情况的观测  46
    3.3.8 包封率、载药量的分析  46-50
    3.3.9 体外释放行为分析  50
  3.4 结论  50-52
第四章海藻酸钠复凝聚法蛋白质固定化载体的制备及其性能研究  52-82
  4.1 前言  52
  4.2 实验部分  52-58
    4.2.1 材料与试剂  52-53
    4.2.2 仪器与型号  53-54
    4.2.3 海藻酸钠复凝聚法微胶囊的制备  54-56
    4.2.4 分析测试  56-58
  4.3 结果与讨论  58-79
    4.3.1 OM观测  58-60
    4.3.2 SEM观测  60-63
    4.3.3 目测  63-68
    4.3.4 粒径分析  68-71
    4.3.5 FTIR分析  71-72
    4.3.6 DSC分析  72-74
    4.3.7 包封率、载药量的分析  74-77
    4.3.8 在人工胃液和人工肠液中的体外释放行为分析  77-79
  4.4 结论  79-82
第五章海藻酸钠复凝聚法微胶囊膜通透性能的研究及微胶囊在凝血酶固定化中的应用  82-101
  5.1 前言  82-83
  5.2 实验部分  83-87
    5.2.1 材料与试剂  83-84
    5.2.2 仪器与型号  84
    5.2.3 实验动物  84
    5.2.4 微胶囊的制备  84-86
    5.2.5 FITC-BSA由微胶囊外部向内部扩散的定性测定  86
    5.2.6 BSA在微胶囊膜上扩散的动态观察  86
    5.2.7 固定有凝血酶的海藻酸钠复凝聚法微胶囊动态凝血实验  86-87
    5.2.8 海藻酸钠复凝聚法微胶囊生物相容性实验  87
  5.3 结果与讨论  87-99
    5.3.1 不同的微胶囊不同通透性能的定性测定  87-90
    5.3.2 BSA在微胶囊中通透的过程  90-92
    5.3.3 FITC-BSA在微胶囊膜上扩散的动态观察  92-97
    5.3.4 凝血酶光谱扫描结果  97
    5.3.5 固定有凝血酶的微胶囊动态凝血实验结果  97-98
    5.3.6 凝血外液545nm处紫外分光光度值  98
    5.3.7 海藻酸钠复凝聚法微胶囊生物相容性实验结果  98-99
  5.4 结论  99-101
全文结论  101-104
参考文献  104-108
发表论文和参加科研情况说明  108-115
致谢  115

壳聚糖基蛋白质固定化载体的制备及其性能研究

内容摘要

全文目录

相似论文