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酶解海藻产物对刺参(Apostichopus japonicus)肠道菌群和免疫相关因子的影响

作 者: 杜以帅
导 师: 江晓路
学 校: 中国海洋大学
专 业: 食品科学
关键词: 刺参 褐藻寡糖 酶解海藻产物 肠道菌群 免疫因子
分类号: S968.9
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要


本研究将0.1%的褐藻寡糖(ADO)和5%经褐藻胶裂合酶酶解的海藻粉添加到刺参基础饲料中进行周期40d的投喂实验,实验期间每隔10d取样一次,取样后检测刺参肠道内细菌总数和弧菌总数,体腔液和体壁中免疫相关因子的活性和免疫相关酶同工酶的变化,研究海藻粉和褐藻寡糖对刺参非特异性免疫的影响和初步作用机制,具体实验内容和结果如下:1.采用平板计数的方法测定刺参肠道内细菌总数和弧菌总数。对照组刺参肠道细菌总数波动较大,海藻粉组和褐藻寡糖组细菌总数波动较小;实验期间海藻粉组刺参肠道细菌总数均小于对照组,但未形成显著性差异(P>0.05)。海藻粉组和褐藻寡糖组刺参弧菌总数占细菌总数的比值均大于对照组,而褐藻寡糖的体外抑菌实验中褐藻寡糖对副溶血弧菌没有抑制作用,推测海藻粉和褐藻寡糖对刺参肠道内优势茵群弧菌属部分细菌有一定的促进作用。2.采用分光光度技术测定了海藻粉和褐藻寡糖对刺参体腔液和体壁组织中免疫相关因子溶菌酶(LSZ)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)和溶血素活性的影响。结果表明:实验期间海藻粉组和褐藻寡糖组刺参免疫相关因子活性均高于对照组。海藻粉组和褐藻寡糖组刺参体腔液中ACP、AKP、溶血素和LSZ活性分别在第20d、20d、30d和40d达到最高,并且均与对照组形成显著性差异;海藻粉组和褐藻寡糖组刺参体壁中ACP、AKP和溶血素在其活性最高时均与对照组形成显著性差异。刺参体腔液中免疫相关因子活性的提高幅度要比体壁大,这可能是因为体腔液包含体腔细胞和各种体液免疫因子,是机体免疫反应发生的主要场所,其对免疫刺激物的免疫刺激反应比较强烈,因此活性的提高幅度较大。3.海藻粉组和褐藻寡糖组刺参体腔液和体壁组织中抗氧化相关酶超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性实验期间均高于对照组。体腔液和体壁组织中抗氧化酶均呈现先增高后降低的趋势,体腔液中酶活性达到峰值的时间比体壁组织提前10d并且酶活性提高幅度较大,推测是由于体腔液中免疫刺激反应比较强烈所致。同工酶结果表明:褐藻寡糖和海藻粉对刺参抗氧化相关酶的诱导提高作用不仅体现在增加酶的浓度,同工酶酶带的增多也是增加酶活性的途径之一海藻粉和褐藻寡糖对刺参肠道的稳定性和优势菌群的生长均有一定的促进作用,并且可以诱导刺参体腔液和体壁组织中免疫相关因子活性的提高,对刺参非特异性水平有一定的提高作用,因此将海藻粉和褐藻寡糖开发为水产动物尤其是刺参的免疫增强剂具有广阔的前景。

全文目录


摘要  5-7
Abstract  7-12
本文所用缩写词  12-13
0 文献综述  13-42
  0.1 引言  13-14
  0.2 海参肠道菌群的研究  14-19
    0.2.1 海参肠道细菌组成  14-16
    0.2.2 肠道菌群与海参疾病  16-17
    0.2.3 多糖类和寡糖类免疫增强剂对水产动物肠道菌群的影响  17-19
  0.3 海参的免疫防御体系  19-25
    0.3.1 体壁组织的抗菌活性  19-20
    0.3.2 海参的细胞免疫  20-23
    0.3.3 体液免疫  23-25
  0.4 免疫增强剂在水产动物中的应用  25-32
    0.4.1 免疫增强剂种类  25-29
    0.4.2 多糖和寡糖类免疫增强剂对水产动物免疫特性的影响  29-32
  0.5 立题意义和研究内容  32-34
  参考文献  34-42
1 酶解海藻产物对刺参(Apostichopus japonicus)肠道菌群的影响  42-53
  1.1 前言  42-43
  1.2 实验材料  43-46
    1.2.1 实验动物  43
    1.2.2 实验饲料及添加剂  43-45
    1.2.3 实验仪器  45
    1.2.4 培养基及其配方  45-46
  1.3 实验方法  46-47
    1.3.1 实验设计  46
    1.3.2 刺参肠道内容物的采集和处理  46
    1.3.3 菌落计数  46
    1.3.4 褐藻寡糖体外抑菌试验  46-47
    1.3.5 数据处理  47
  1.4 实验结果与分析  47-49
    1.4.1 海藻粉和褐藻寡糖对刺参肠道细菌总数的影响  47-48
    1.4.2 海藻粉和褐藻寡糖对刺参肠道弧菌总数的影响  48-49
    1.4.3 海藻粉和褐藻寡糖对刺参肠道大肠杆菌的影响  49
    1.4.4 褐藻寡糖体外抑菌结果  49
  1.5 讨论  49-51
  1.6 小结  51
  参考文献  51-53
2 酶解海藻产物对刺参(Apostichopus japonicus)免疫相关因子的影响  53-70
  2.1 前言  53-54
  2.2 实验材料  54-55
    2.2.1 实验动物  54
    2.2.2 实验饲料及添加剂  54-55
    2.2.3 实验菌种  55
    2.2.4 实验仪器  55
  2.3 实验方法  55-58
    2.3.1 实验设计  55
    2.3.2 样品的制备  55-56
    2.3.3 免疫相关酶活性的测定  56-58
    2.3.4 数据处理  58
  2.4 结果与分析  58-63
    2.4.1 海藻粉和褐藻寡糖对刺参LSZ活性的影响  58-59
    2.4.2 海藻粉和褐藻寡糖对刺参ACP活性的影响  59-61
    2.4.3 海藻粉和褐藻寡糖对刺参AKP活性的影响  61-62
    2.4.4 海藻粉和褐藻寡糖对刺参溶血素含量的影响  62-63
  2.5 讨论  63-66
  2.6 小结  66
  参考文献  66-70
3 酶解海藻产物对刺参(Apostichopus japonicuS)抗氧化相关酶活性及其同工酶的影响  70-86
  3.1 前言  70-71
  3.2 实验材料  71
    3.2.1 实验动物  71
    3.2.2 实验饲料及添加剂  71
    3.2.3 实验仪器  71
  3.3 实验方法  71-74
    3.3.1 实验设计  71-72
    3.3.2 样品的制备  72
    3.3.3 免疫相关酶活性的测定  72-73
    3.3.4 同工酶电泳及染色  73-74
    3.3.5 数据处理  74
  3.4 结果与分析  74-81
    3.4.1 海藻粉和褐藻寡糖对刺参SOD活性的影响  74-76
    3.4.2 海藻粉和褐藻寡糖对刺参CAT活性的影响  76-78
    3.4.3 海藻粉和褐藻寡糖对刺参POD活性的影响  78-81
  3.5 讨论  81-82
  3.6 小结  82-83
  参考文献  83-86
结论  86-88
创新点  88-89
致谢  89-90
个人简历  90
研究生期间发表的研究成果  90

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