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黄瓜灰霉病和炭疽病生物防治研究

作　者: 高书锋
导　师: 王振跃
学　校: 河南农业大学
专　业: 植物病理学
关键词: 黄瓜灰霉病黄瓜炭疽病分离和鉴定叶际微生物乳酸菌生防机制
分类号: S436.421
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

本研究对黄瓜叶际微生物进行了分离和鉴定：用107株不同来源的生防菌株对黄瓜灰霉病菌和炭疽病菌进行了室内抑菌测定；在抑菌测定的基础上对筛选出的生防菌进行了盆栽和保护地防病试验；对进一步筛选出的3株生防菌进行了生防机制的初步研究。 1．黄瓜叶际微生物的分离和鉴定：共分离到附生真菌25株，分别属于青霉属、毛壳属、链格孢属、木霉属、镰刀菌属、顶柱霉属、曲霉属、单头孢霉属、葡萄孢属、枝孢霉属、聚端孢霉属、黑根霉属、长蠕孢属13个属，链格孢属和青霉属为优势属：共分离到内生真菌4株，分别属于曲霉属、链格孢属、枝孢霉属，曲霉属为优势属。共分离到附生细菌26株，分别属于黄杆菌属、葡萄球菌属、假单胞菌属、芽孢杆菌属、黄单胞菌属、不动细菌属、库特氏菌属、足球菌属、欧文氏菌属、氮单胞菌属10个属，芽孢杆菌属和黄单胞菌属为优势属；共分离到内生细菌5株，分别属于芽孢杆菌属、假单胞菌属、黄杆菌属、黄单胞菌属，假单胞菌属为优势属。共分离到附生酵母菌7株，分别属于毕赤酵母属、瓶形酵母属、酵母属、红酵母属、隐球酵母属、酵母状外子囊属6个属，隐球酵母属为优势属。共分离到附生放线菌35株，鉴定1株，为小多孢菌属。乳酸菌L2和供试菌株S50分别鉴定为芽孢杆菌属和链霉菌属。 2．抑菌测定：通过室内拮抗实验，筛选出对黄瓜灰霉病菌和炭疽病菌具有较强抑菌活性的真菌F22，细菌B5，放线菌S32、S10、S24、S_t18、S_t61、S23和乳酸菌L2。S50单对炭疽病菌抑菌作用最强。通过抗生实验：表明B5、L2、S32、S10和S23发酵液对黄瓜灰霉病菌菌丝生长的有较强抑制作用：表明S50、L2和S24发酵液对黄瓜炭疽病菌菌丝生长有较强的抑制作用，其次是S32、S23和S10。 3．防病试验：盆栽防治黄瓜灰霉病的结果表明：S32、L2、B5和S10的防治效果较好；防治炭疽病的结果表明：S50、L2、B5、S_t61、S₁₀、S₃₂和S₁₈的防治效果较好。保护地小区防治黄瓜灰霉病的结果表明：B5、S32、L2、S23、F22和S₁₈的防治效果较好；防治黄瓜炭疽病的结果表明：S50、L2、S₃₂和B5的防治效果较好。 4．生防菌对黄瓜灰霉病生防机制的初步研究：生防菌B5、L2和S32发酵液对黄瓜灰霉病菌孢子萌发、菌丝生长的抑制作用及S32对菌丝形态的影响初步表明B5、L2和S32的生防机制是拮抗作用。

全文目录

摘要  8-9
1.文献综述  9-18
  1.1 叶围微生物和乳酸菌的研究概况  9-12
    1.1.1 叶围微生物  9-11
    1.1.2 乳酸菌的研究  11-12
  1.2.黄瓜灰霉病、炭疽病生物防治研究进展  12-18
    1.2.1 生防因子的研究进展  12-14
    1.2.2 生防机制的研究进展  14-15
    1.2.3 生防菌剂  15-16
    1.2.4 黄瓜灰霉病和炭疽病生物防治中存在问题  16
    1.2.5 展望  16-18
2.引言  18-20
3.材料与方法  20-27
  3.1 材料  20-22
    3.1.1 黄瓜叶际微生物分离材料和培养基  20
    3.1.2 食品乳酸菌分离材料和培养基  20-21
    3.1.3 供试生防菌、病原菌和药剂  21-22
  3.2 黄瓜灰霉病、炭疽病病菌的分离、纯化及保存  22
    3.2.1 黄瓜灰霉病、炭疽病病菌的分离  22
    3.2.2 黄瓜灰霉病、炭疽病病菌的纯化  22
  3.3 生防微生物的分离、纯化及保存  22-23
    3.3.1 黄瓜叶围附生菌的分离(真菌、细菌、放线菌、酵母菌)  22
    3.3.2 黄瓜叶围内生菌的分离(真菌、细菌、放线菌、酵母菌)  22-23
    3.3.3 乳酸菌的分离  23
    3.3.4 生防微生物的纯化和保存  23
  3.4 黄瓜叶际分离微生物鉴定及乳酸菌的鉴定  23-24
    3.4.1 真菌鉴定方法  23
    3.4.2 细菌鉴定方法  23
    3.4.3 酵母菌鉴定方法  23
    3.4.4 放线菌鉴定方法  23
    3.4.5 乳酸菌的鉴定方法  23-24
  3.5 室内抑菌测定  24-25
    3.5.1 生防菌株对黄瓜灰霉病菌和炭疽病菌的拮抗作用的测定  24
    3.5.2 不同生防菌发酵液对黄瓜灰霉病菌和炭疽病菌菌丝生长的影响  24
    3.5.3 生防菌B5、L2和S32稳定性的测定  24
    3.5.4 生防菌抑菌谱的测定  24-25
  3.6 防病试验  25-26
    3.6.1 生防菌对室内盆栽黄瓜灰霉病和炭疽病的防治效果  25
    3.6.2 生防菌对保护地小区黄瓜灰霉病和炭疽病的防治效果  25-26
  3.7 生防菌发酵液对黄瓜灰霉病菌抑制机制的研究  26-27
    3.7.1 生防菌生长曲线的测定及发酵液的制备  26
    3.7.2 不同生防菌发酵液对黄瓜灰霉病菌孢子萌发的影响  26
    3.7.3.不同生防菌发酵液对黄瓜灰霉病菌菌落、菌丝形态的影响  26
    3.7.4 不同发酵液对黄瓜灰霉病菌丝生长的影响和抑菌方式的确定  26
    3.7.5 生防菌发酵液处理对黄瓜叶片结构变化和灰霉病菌菌丝扩展的影响  26-27
4.结果与分析  27-48
  4.1 黄瓜叶围微生物分离鉴定结果  27-33
    4.1.1 黄瓜叶围真菌鉴定结果  27-29
    4.1.2 黄瓜叶围细菌鉴定结果  29-31
    4.1.3 黄瓜叶围附生酵母菌鉴定结果  31-32
    4.1.4 黄瓜叶围附生放线菌(S32、S50)鉴定结果  32-33
  4.2 产酸菌的分离和乳酸菌(L2)的鉴定  33-34
    4.2.1 产酸菌的分离结果  33
    4.2.2 乳酸菌的鉴定  33-34
  4.3 抑菌测定  34-42
    4.3.1 叶围微生物、乳酸菌、供试菌株对黄瓜灰霉病和炭疽病拮抗测定一览表  34-40
    4.3.2 不同生防菌发酵液对黄瓜灰霉病和炭疽病病菌菌丝生长的影响  40-41
    4.3.3.B5、L2和$32生防菌稳定性的测定  41
    4.3.4 生防菌S32、B5和L2、S50抑菌谱测定结果  41-42
  4.4 防病试验  42-45
    4.4.1 盆栽防病试验  42-44
    4.4.2 保护地小区防病试验  44-45
  4.5 生防菌对黄瓜灰霉病菌生防机制的研究  45-48
    4.5.1.B5、L2、S32生防菌生长曲线的测定及发酵液的制备  45
    4.5.2 生防菌发酵液对黄瓜灰霉病菌分生孢子萌发的抑制结果  45-46
    4.5.3 生防菌发酵液对黄瓜灰霉病菌菌落、菌丝形态的影响  46
    4.5.4 不同发酵液对黄瓜灰霉病菌丝生长的影响和抑菌方式研究  46-47
    4.5.5 生防菌发酵液处理黄瓜后对叶片形态结构的影响和对灰霉病菌菌丝扩展的影响  47-48
5.结论与讨论  48-51
  5.1 结论  48
    5.1.1 黄瓜叶嗣微生物和乳酸菌的分离鉴定  48
    5.1.2 室内抑菌测定和防病试验  48
    5.1.3 生防菌对黄瓜灰霉病菌生防机制的初步研究  48
  5.2 讨论  48-51
    5.2.1 关于黄瓜叶围微生物和乳酸菌的分离鉴定  48-49
    5.2.2 关于抑菌测定与防病试验验  49
    5.2.3 生防菌发酵液对黄瓜灰霉病菌生防机制的初步研究  49-51
参考文献  51-57
ABSTRACT  57-59
附图  59-63

黄瓜灰霉病和炭疽病生物防治研究

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