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中国林蛙卵油的活性追踪

作　者: 陈侠
导　师: 徐峰
学　校: 沈阳药科大学
专　业: 药理学
关键词: 中国林蛙卵油 中枢抑制 抗惊厥 抗焦虑
分类号: R96
类　型: 硕士论文
年　份: 2004年
下　载: 160次
引　用: 2次
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内容摘要


本文通过中枢抑制实验、抗惊厥实验、抗焦虑实验和神经生化指标的测定评价中国林蛙卵不同提取分离产物的生物活性，并结合成分分析，追踪中国林蛙卵油的生物活性成分。 使用不同溶剂和CO2超临界萃取技术提取中国林蛙卵，几种提取物均具有显著生物活性。各种提取物能明显抑制小鼠自发活动、延长士的宁惊厥小鼠的惊厥潜伏期并减少爬梯小鼠的站立次数。采用薄层色谱法进行成分分析，各提取物显示雷同组分。 采用分子蒸馏法分离中国林蛙卵CO2超临界萃取物，100-160℃馏份对小鼠自发活动、士的宁惊厥小鼠的惊厥反应及爬梯小鼠的站立次数均有显著抑制作用。低于100℃馏份对小鼠自发活动的抑制作用较弱，但能显著抑制士的宁惊厥小鼠的惊厥反应及爬梯小鼠的站立次数。高于160℃馏份无生物活性。结合成分比较结果进行分析，推测薄层谱图中Rf＞0.62的成分为惰性成分，Rf≤0.62的成分与镇静、抗焦虑活性相关。高效液相紫外谱图中10min、12min、18min色谱峰与抗惊厥活性相关。 采用薄层色谱法和高效液相色谱法，结合药理实验，评价不同萃取溶剂的萃取效果。确定以95％甲醇溶液为萃取剂萃取中国林蛙卵CO2超临界萃取物，浓缩活性成分，得到中国林蛙卵油萃取物A、B。萃取物A对小鼠自发活动和惊厥反应的抑制作用明显强于中国林蛙卵油CO2超临界萃取物，抗焦虑活性在同一水平。萃取物B无生物活性。 采用薄层色谱法、高效液相色谱-质谱联用法、气相色谱-质谱联用法对萃取物A的化学成分进行定性分析，检测到大量的不饱和脂肪酸、饱和脂肪酸

全文目录


摘要  10-12
ABSTRACT  12-14
前言  14-17
实验材料  17-20
  1 受试物  17
  2 实验动物  17
  3 试剂  17-18
  4 仪器设备  18-20
实验方法  20-31
  1 中国林蛙卵的提取分离方法  20-21
    1.1 中国林蛙卵的溶剂提取  20
    1.2 中国林蛙卵的CO_2超临界萃取  20
    1.3 中国林蛙卵CO_2超临界萃取物的分子蒸馏分离  20
    1.4 中国林蛙卵CO_2超临界萃取物的溶剂萃取  20-21
      1.4.1 萃取条件的选择  20
      1.4.2 中国林蛙卵CO_2超临界萃取物的溶剂萃取  20-21
  2 中国林蛙卵油成分分析方法  21-23
    2.1 薄层色谱法  21
    2.2 高效液相色谱法  21-22
      2.2.1 样品溶液的配制  21
      2.2.2 色谱条件  21-22
    2.3 高效液相色谱-质谱联用法  22
      2.3.1 色谱条件  22
      2.3.2 质谱条件  22
    2.4 气相色谱-质谱联用法  22-23
      2.4.1 样品预处理  22
      2.4.2 色谱条件  22
      2.4.3 质谱条件  22-23
  3 中国林蛙卵油药效学实验方法  23-25
    3.1 中国林蛙卵油的抗疲劳实验  23
    3.2 中国林蛙卵油对小鼠自发活动的影响  23
    3.3 中国林蛙卵油对硝酸士的宁惊厥的影响  23
    3.4 中国林蛙卵油对小鼠爬梯实验影响  23-24
    3.5 中国林蛙卵油对大鼠高架十字迷路实验的影响  24
    3.6 中国林蛙卵油的镇痛作用  24
    3.7 对大鼠脑内MDA、GSH水平和Na~+、K~+-ATPase活性的影响  24-25
      3.7.1 脑内MDA含量的测定  24-25
      3.7.2 脑内GSH含量的测定  25
      3.7.3 脑内Na~+、K~+-ATPase活性的测定  25
  4 中国林蛙卵不同提取分离产物的成分与生物活性比较  25-29
    4.1 中国林蛙卵油与原药材蛤蟆油的比较  25-26
      4.1.1 中国林蛙卵油与蛤蟆油成分的比较  25
      4.1.2 中国林蛙卵油与蛤蟆油生物活性比较  25-26
        4.1.2.1 中国林蛙卵油与蛤蟆油抗疲劳活性的比较  25-26
        4.1.2.2 中国林蛙卵油与蛤蟆油抗焦虑活性的比较  26
    4.2 中国林蛙卵不同提取物的比较  26-27
      4.2.1 中国林蛙卵不同提取物的TLC谱图比较  26
      4.2.2 中国林蛙卵不同提取物生物活性比较  26-27
        4.2.2.1 中国林蛙卵油剂量的选择  26-27
        4.2.2.2 中国林蛙卵不同提取物生物活性比较  27
    4.3 超临界萃取物分子蒸馏分离效果的比较  27-28
      4.3.1 超临界萃取物分子蒸馏不同温度馏份的TLC谱图比较  27
      4.3.2 超临界萃取物分子蒸馏不同温度馏份的HPLC谱图比较  27
      4.3.3 超临界萃取物分子蒸馏不同温度馏份生物活性比较  27-28
    4.4 超临界萃取物溶剂萃取分离产物的比较  28-29
      4.4.1 超临界萃取物及其萃取物A、B的TLC谱图比较  28
      4.4.2 超临界萃取物及其萃取物A、B的HPLC谱图比较  28
      4.4.3 超临界萃取物及其萃取物A、B生物活性比较  28-29
        4.4.3.1 对小鼠自发活动影响的比较  28
        4.4.3.2 抗惊厥活性的比较  28-29
        4.4.3.3 抗焦虑活性的比较  29
          4.4.3.3.1 对小鼠爬梯实验的影响  29
          4.4.3.3.2 对大鼠高架十字迷路实验的影响  29
        4.4.3.4 镇痛作用的比较  29
        4.4.3.5 对大鼠脑内MDA、GSH水平及Na~+、K~+-ATPase活性的影响  29
  5 超临界萃取物溶剂萃取物A的成分研究  29-30
    5.1 薄层层析色谱法  30
    5.2 高效液相色谱-质谱联用法  30
    5.3 气相色谱-质谱联用法  30
  6 药效学统计方法  30-31
实验结果  31-63
  1 中国林蛙卵油与原药材蛤蟆油的比较  31-33
    1.1 中国林蛙卵油与蛤蟆油成分的比较  31
    1.2 中国林蛙卵油与蛤蟆油生物活性比较  31-32
      1.2.1 中国林蛙卵油与蛤蟆油抗疲劳活性的比较  31-32
      1.2.2 中国林蛙卵油与蛤蟆油抗焦虑活性的比较  32
    1.3 中国林蛙卵油与蛤蟆油的比较分析  32-33
  2 中国林蛙卵不同提取物的比较  33-37
    2.1 中国林蛙卵的提取方法  33
      2.1.1 溶剂提取法  33
      2.1.2 CO_2超临界萃取法  33
    2.2 中国林蛙卵不同提取物的TLC谱图比较  33-34
    2.3 中国林蛙卵不同提取物生物活性比较  34-37
      2.3.1 中国林蛙卵油剂量的选择  34-35
      2.3.2 对小鼠自发活动影响的比较  35
      2.3.3 抗惊厥活性的比较  35-36
      2.3.4 抗焦虑活性的比较  36-37
    2.4 中国林蛙卵不同提取物的比较分析  37
  3 超临界萃取物分子蒸馏分离效果的比较  37-46
    3.1 超临界萃取物分子蒸馏分离方法  37-38
    3.2 超临界萃取物分子蒸馏不同温度馏分的TLC谱图比较  38-39
    3.3 超临界萃取物分子蒸馏不同温度馏分的HPLC谱图比较  39-42
    3.4 超临界萃取物分子蒸馏不同温度馏分生物活性比较  42-44
      3.4.1 对小鼠自发活动影响的比较  42
      3.4.2 抗惊厥活性的比较  42-44
      3.4.3 抗焦虑活性的比较  44
    3.5 超临界萃取物分子蒸馏不同温度馏分的比较分析  44-46
  4 超临界萃取物溶剂萃取分离产物的比较  46-54
    4.1 超临界萃取物溶剂萃取方法  46-47
      4.1.1 萃取条件的选择  46-47
      4.1.2 超临界萃取物的溶剂萃取  47
    4.2 超临界萃取物及其萃取物A、B的TLC谱图比较  47-48
    4.3 超临界萃取物及其萃取物A、B的HPLC谱图比较  48-50
    4.4 超临界萃取物及其萃取物A、B的生物活性比较  50-53
      4.4.1 对小鼠自发活动影响的比较  50
      4.4.2 抗惊厥活性的比较  50-51
      4.4.3 抗焦虑活性的比较  51-52
        4.4.3.1 对小鼠爬梯实验的影响  51
        4.4.3.2 对大鼠高架十字迷路实验的影响  51-52
      4.4.4 镇痛作用的比较  52-53
      4.4.5 对大鼠脑内MDA、GSH水平及Na~+、K~+-ATPase活性的影响  53
    4.5 超临界萃取物及其萃取物A、B的比较分析  53-54
  5 超临界萃取物溶剂萃取物A的成分研究  54-63
    5.1 薄层层析色谱法  54-55
    5.2 高效液相色谱-质谱联用法  55-57
    5.3 气相色谱-质谱联用法  57-63
讨论  63-71
结论  71-72
参考文献  72-78
符号说明  78-79
致谢  79

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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学
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