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低橘霉素高色价红曲霉固态发酵研究

作 者: 盖栋梁
导 师: 刘爱英;梁宗琦
学 校: 贵州大学
专 业: 微生物学
关键词: 红曲 红曲霉 红曲色素 橘霉素 诱变 最优回归设计 真菌激发子
分类号: TQ925.9
类 型: 硕士论文
年 份: 2006年
下 载: 223次
引 用: 5次
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内容摘要


本试验利用紫外线和氯化锂对Monascus purpureus GX菌株进行复合诱变,在最佳紫外线照射时间为80秒和最佳氯化锂浓度为1.0‰的情况下,获得了一株橘霉素产量低、色价中等的突变菌株M.S9。突变株M.S9发酵的红曲米色价为873U/g,Citrinin含量为18mg/kg。将该菌株连续培养五代后,其红曲米色价为892U/g,Citrinin含量为26mg/kg。可见,突变菌株M.S9的橘霉素和色素代谢是比较稳定的。 以色价为目标函数,初始pH值(x1)、初始温度(x2)、接种量(x3)、乙醇浓度(x4)、豆油浓度(x5)为试验因子,选用二次饱和D—最优设计法(R521D)设计试验方案,利用DPS和SPSS统计软件,对试验数据进行分析,得到红曲米色价与各试验因子的最优回归方程为: y=-9660.96+556.37x1+790.35x2-2172.71x4-1452.35x5-127.31x12-16.99x22-20.70x32-803.95x52+12.28x1x2+189.69x1x5+8.36x2x3+56.12x2x4+45.3x2x5+402.85x4x5 并在此基础上进行了单因素和双因素的效应分析,当红曲米色价达到理论最高值1411U/g时,各因素的最佳组合为:初始pH值为3.8、初始温度为26.8℃、接种量为13.5%、乙醇浓度0.5%、豆油浓度1%。:经过试验验证,各因子最佳组合时,红曲米色价为1423U/g。 同时,我们将分离自茶泡上的一种坏损外担子菌(Exobasidium vexans)的无性型作为一种真菌激发子对突变菌株进行相关试验表明,其无性型菌株HX的发酵粗提物对红曲霉突变株M.S9色素的代谢没有明显影响。

全文目录


第一章 绪论  13-20
  1 红曲霉在真菌界的分类地位  13-15
  2 红曲的医疗保健功能  15-17
  3 红曲色素的结构、功能与应用  17-18
  4 红曲中橘霉素含量的标准  18
  5 红曲中部分活性物质分子水平的研究进展  18-19
  6 本论文研究的内容及意义  19-20
第二章 红曲霉菌株的诱变育种研究  20-34
  1 前言  20-22
    1.1 诱变育种的原理和方法  20
    1.2 几种有效的诱变育种方法  20-22
  2 材料与方法  22-27
    2.1 材料  22-24
      2.1.1 红曲霉菌株  22-23
      2.1.2 实验用培养基  23
      2.1.3 试剂及设备  23-24
    2.2 实验方法  24-27
      2.2.1 红曲霉菌株的活化  24
      2.2.2 红曲霉液体种子的制作  24
      2.2.3 红曲霉固态发酵  24
      2.2.4 红曲米色价的测定  24-25
      2.2.5 红曲霉色素产生周期曲线的制作  25
      2.2.6 橘霉素标准曲线的制作  25
      2.2.7 红曲中橘霉素含量的测定  25-26
      2.2.8 红曲霉菌株的紫外线和氯化锂(LiCl)复合诱变  26-27
  3 结果与分析  27-33
    3.1 不同的红曲霉菌株产色素的差异  27-28
    3.2 红曲霉 M.purpureus GX色素发酵时间的确定  28
    3.3 橘霉素标准曲线  28-29
    3.4 红曲霉菌株的紫外线和氯化锂(LiCl)复合诱变  29-30
      3.4.1 孢子悬液的制备  29
      3.4.2 紫外线照射时间的选择  29-30
      3.4.3 氯化锂处理剂量的选择  30
    3.5 紫外线和氯化锂的复合诱变的结果  30-32
    3.6 突变菌株和原始菌株的形态对比  32-33
    3.7 突变菌株的稳定性实验结果  33
  4 讨论  33-34
第三章 利用最优回归设计法确定红曲霉固体发酵的最佳条件  34-54
  1 前言  34
  2 材料与方法  34-37
    2.1 材料  34-35
    2.2 实验方法  35-37
      2.2.1 红曲霉菌株的活化  35
      2.2.2 红曲霉液体种子的制作  35
      2.2.3 红曲霉固态发酵  35
      2.2.4 确定培养条件  35
      2.2.5 二次饱和 D-最优设计法设计实验方案  35-37
      2.2.6 多项式回归模型的建立  37
  3 结果与分析  37-53
    3.1 最优回归方程的确定  37-41
    3.2 降维分析  41-52
      3.2.1 实验因子单因素分析  41-48
      3.2.2 实验因子间互作效应分析  48-52
    3.3 最佳组合方案的确定  52
    3.4 最佳组合的验证性试验  52-53
  4 结论与讨论  53-54
第四章 真菌激发子对红曲霉色素代谢的影响  54-65
  1 前言  54-58
    1.1 激发子的种类和性质  54-56
    1.2 激发子的作用  56-58
  2 材料与方法  58-59
    2.1 材料  58
    2.2 实验方法  58-59
      2.2.1 红曲霉菌株的活化  58
      2.2.2 红曲霉液体种子的制作  58
      2.2.3 红曲霉固体培养  58
      2.2.4 红曲米色价的测定  58
      2.2.5 激发子菌株的采集与分离  58-59
      2.2.6 激发子粗提物的制备  59
      2.2.7 激发子粗提物对红曲米固体发酵的处理  59
  3 结果与分析  59-64
    3.1 激发子菌株的采集与分离  59-61
    3.2 激发子粗提物对红曲米固体发酵的处理结果  61-64
  4 结论与讨论  64-65
致谢  65-66
参考文献  66-70
发表论文及参加学术活动情况  70-71
原创性声明  71
关于学位论文使用授权的声明  71

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中图分类: > 工业技术 > 化学工业 > 其他化学工业 > 发酵工业 > 酶制剂(酵素) > 其他
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