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六株玫烟色拟青霉的适温性、多菌灵抗性及对叶螨的杀卵活性评价

作　者: 郑武
导　师: 冯明光
学　校: 浙江大学
专　业: 微生物学
关键词: 生防真菌玫烟色拟青霉朱砂叶螨适温性菌落生长产孢潜能活孢率杀菌剂抗药性生物测定毒力杀卵活性微生物防治
分类号: S476.12
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

玫烟色拟青霉(Paecilomyces fumosoroseus)是一种能感染多种类型害虫的昆虫病原真菌,在害虫尤其是刺吸式口器害虫的微生物防治中的应用潜力很大。为了筛选获得针对叶螨的生防潜力菌株,本研究在15～35℃范围内综合比较研究了六株野生型玫烟色拟青霉的菌落生长、产孢量及所产孢子的活力,评价了各菌株对常用杀菌剂多菌灵的抗性,从中选出适温范围广、较耐多菌灵的菌株对朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinus)进行了杀卵活性的生物测定,最终获得了一株兼具多个优良性状的杀螨卵菌株。主要结果摘要如下。适温性将六株玫烟色拟青霉分别用SDAY平板在15、20、25、30和35℃下进行培养,逐日测定菌落直径,在菌落充分产孢时取样计算单位面积产孢量,而后采用营养液萌发率法测定各温度下所产孢子的活孢率。结果表明,玫烟色拟青霉适温性的种内变异较大,各温度下不同菌株的生长速率、产孢量及活孢率之间均存在显著差异,但最适温都是25℃,适温区为20～30℃。低温15℃下Pfr2175的菌落生长最好但产孢最差,其他菌株的菌落生长和产孢都受到不同程度影响。Pfr4205、Pfr116、Pfr6206和Pfr2175在20～30℃内的菌落生长和产孢都较好。在25℃下,Pfr4205、Pfr116和Pfr6206第9天的菌落直径都在33mm以上,产孢量都达到10~7个孢子/mm~2以上。菌株Pfr6206和Pfr2175在35℃下仍有较高的产孢量和活孢率,显然是较能适应夏季高温的菌株。总体看,15℃低温对六株玫烟色拟青霉生长、产孢及孢子活力的影响大于35℃高温的影响,偏离25℃最适温,生长和产孢都或多或少下降。对多菌灵的抗性在含梯度浓度多菌灵的SDAY平板上分别测定了六株玫烟色拟青霉的菌落生长(多菌灵0～16μg/mL SDAY)和单孢菌落形成数(多菌灵0～256μg/mL SDAY)。结果表明,各菌株对多菌灵的敏感性差异显著。Pfr6206的菌落生长在六个菌株中受影响最小,在1.0μg/mL多菌灵浓度下菌落直径达到19.2mm,抑制率为41.0%;而Pfr116对多菌灵非常敏感,相同浓度下菌落直径只有8.2mm,抑制率达90.2%,其余菌株介于其间。在不同浓度多菌灵胁迫下六株玫烟色拟青霉的单孢菌落形成数观察值很好地拟合了逻辑斯蒂方程(r~2≥0.90),由此估计出各菌株的最低抑菌浓度MIC(单位:μg/mL):菌株Pfr4205和Pfr116的MIC<20,表现为低抗性,其余四菌株均表现为中度抗性(20≤MIC≤100),而Pfr6206的MIC值高达93.5,很接近MIC>100的高抗标准,

全文目录

致谢  7-8
摘要  8-10
1 文献综述:玫烟色拟青霉的侵染生物学基础  10-20
  1.1 概况  10
  1.2 寄主范围与自然流行  10-11
  1.3 侵染方式与致病机理  11-15
    1.3.1 孢子附着  11-12
    1.3.2 孢子萌发与侵入  12-13
    1.3.3 体壁入侵的关联酶类  13-14
    1.3.4 真菌侵染对寄主的致死作用  14-15
  1.4 毒力与菌种筛选  15-17
    1.4.1 毒力  15-16
    1.4.2 生物测定的标准化与菌株筛选  16-17
  1.5 环境适应性与耐受性  17-20
    1.5.1 温度  17-18
    1.5.2 相对湿度  18
    1.5.3 光照  18-19
    1.5.4 化学农药  19-20
2 六株玫烟色拟青霉菌株的适温性比较  20-26
  2.1 材料与方法  20-21
    2.1.1 供试菌株和接种体准备  20
    2.1.2 温度对菌落生长的影响  20
    2.1.3 温度对产孢量及孢子活力的影响  20-21
    2.1.4 数据处理  21
  2.2 结果与分析  21-24
    2.2.1 温度对不同菌株菌落生长的影响  21-22
    2.2.2 温度对不同菌株产孢量的影响  22-23
    2.2.3 不同温度不同菌株所产孢子的活力比较  23-24
  2.3 讨论  24-26
3 六株玫烟色拟青霉对多菌灵农药的抗性比较  26-30
  3.1 材料和方法  26-27
    3.1.1 供试菌株和接种体准备  26
    3.1.2 不同多菌灵浓度下的菌落生长  26
    3.1.3 多菌灵作用下的菌落形成数  26
    3.1.4 数据分析  26-27
  3.2 结果与分析  27-29
    3.2.1 多菌灵对菌落生长的抑制作用  27-28
    3.2.2 多菌灵对单孢菌落形成的影响  28-29
  3.3 讨论  29-30
4 玫烟色拟青霉对朱砂叶螨卵的毒力比较  30-34
  4.1 材料与方法  30-32
    4.1.1 供试菌株及孢子水悬液的制备  30-31
    4.1.2 供试螨卵  31
    4.1.3 生物测定  31
    4.1.4 数据处理  31-32
  4.2 结果与分析  32-33
  4.3 讨论  33-34
5 总讨论  34-36
参考文献  36-42
Summary  42-44
附:在读期间已发表和投稿的研究论文  44

六株玫烟色拟青霉的适温性、多菌灵抗性及对叶螨的杀卵活性评价

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