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银杏叶提取物对肝纤维化大鼠肝脏COX-2表达的影响

作　者: 孟爱红
导　师: 陈芝芸
学　校: 浙江中医药大学
专　业: 中西医结合
关键词: 肝硬化/中医药疗法 四氯化碳 银杏 植物提取物 环氧化酶2
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 74次
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内容摘要


目的观察银杏叶提取物(GbE)对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织COX-2表达及TXB2、6-K-PGF1α含量的影响,从COX-2角度探讨银杏叶提取物抗肝纤维化的作用机制。方法雄性SD大鼠60只随机分成6组：正常组、模型组、GbE高剂量组、GbE中剂量组、GbE低剂量组及复方鳖甲软肝片组,每组10只；正常组皮下注射橄榄油(3ml/kg),其余各组皮下注射橄榄油配制的40%CCl4(3ml/kg),每周2次,共6周,首次剂量加倍；GbE高、中、低剂量组在造模同时分别给以200mg/(kg·d)、100mg/(kg·d)、50mg/(kg·d)的GbE灌胃,复方鳖甲软肝片组以1g/(kg·d)的复方鳖甲软肝片混悬液灌胃,正常组和模型组灌服等容量的蒸馏水。6周末处死大鼠,全自动生化分析仪检测ALT、AST和ALP水平；放射免疫法检测TXB2、6-K-PGFlα含量；HE及Masson染色光镜下观察各组大鼠肝组织的组织学变化；原位杂交法检测COX-2基因mRNA表达；免疫组化Envison法检测COX-2、α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白表达。结果①模型组大鼠肝组织炎症程度计分和纤维化程度计分明显高于正常组(P<0.01),GbE高、中、低剂量组及复方鳖甲软肝片组大鼠肝组织炎症程度计分和纤维化程度均较模型组明显减轻(P<0.01,P<0.05)；②模型组大鼠的血清ALT、AST和ALP水平较正常组明显增高(P<0.01),GbE高、中、低剂量组及复方鳖甲软肝片组大鼠ALT、AST水平较模型组大鼠明显降低(P<0.01),GbE高、中剂量组和复方鳖甲软肝片组大鼠的ALP水平明显低于模型组(P<0.01,P<0.05)；③模型组大鼠肝组织α-SMA和Ⅰ型胶原表达水平较正常组明显增高(P<0.01),不同剂量GbE组和复方鳖甲软肝片组大鼠肝组织α-SMA和Ⅰ型胶原表达水平均较模型组明显降低(P<0.01,P<0.05)；④模型组大鼠肝组织COX-2基因mRNA和蛋白表达水平较正常组明显增高(P<0.01,P<0.05),GbE高、中、低剂量组和复方鳖甲软肝片组大鼠肝组织COX-2基因mRNA和蛋白表达水平均较模型组明显降低(P<0.05)；⑤模型组大鼠肝组织TXB2含量及TXB2/6-K-PGF1α均较正常组显著增高(P<0.01,P<0.05),GbE高、中、低剂量组和复方鳖甲软肝片组大鼠肝组织TXB2含量及TXB2/6-K-PGF1α均较模型组显著降低(P<0.01,P<0.05),6-K-PGF1α含量在正常组、模型组和各药物干预组大鼠肝组织变化差异均无显著性(P>0.05)；⑥COX-2蛋白表达水平与肝组织的炎症、纤维化程度、α-SMA和Ⅰ型胶原的表达之间呈明显的正相关性(r分别为0.918、0.510、0.636、0.439,P均<0.01)。结论①GbE具有保护肝细胞、改善肝功能作用,能显著改善CCl4肝纤维化大鼠肝组织炎症损伤；②CCl4诱导的大鼠肝纤维化存在着COX-2表达的上调,HSC的活化显著增加；③GbE下调肝组织中COX-2的表达可能是其抗肝纤维化作用的重要机制之一。

全文目录


英文缩写一览表  4-5
中文摘要  5-7
ABSTRACT  7-9
前言  9-10
一、材料与方法  10-14
  (一) 实验材料  10-11
    1. 实验动物  10
    2. 药物  10
    3. 主要试剂  10
    4. 主要实验仪器  10-11
  (二) 实验方法  11-14
    1. 大鼠肝纤维化模型的建立  11
    2. 实验分组及处理  11
    3. 观测指标和方法  11-12
    4. 诊断标准  12-14
    5. 统计学分析方法  14
二、结果  14-17
  (一) 各组大鼠肝组织学变化  14
  (二) 各组大鼠血清生物化学指标的变化  14-15
  (三) GbE对肝纤维化大鼠肝组织COX-2、α-SMA和Ⅰ型胶原表达的影响  15
  (四) 大鼠肝组织COX-2蛋白表达水平与与炎症程度、纤维化程度、α-SMA和Ⅰ型胶原的表达的相关性分析  15-17
三、分析与讨论  17-23
结论  23-24
参考文献  24-28
附图  28-32
致谢  32-33
文献综述  33-40
  参考文献  37-40

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