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脂多糖对小鼠骨髓源性平滑肌祖细胞表达CXCR4的影响

作　者: 刘黎黎
导　师: 阮秋蓉
学　校: 华中科技大学
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 动脉粥样硬化平滑肌祖细胞脂多糖 CXCR4 基质细胞衍生因子-1
分类号: R543
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的:通过观察脂多糖(1ipopolysaccharides,LPS)对离体小鼠骨髓源性平滑肌祖细胞(vascular smooth progenitor muscle cell,SPC)膜表面基质细胞衍生因子受体表达的影响,探讨SDF-1/CXCR4轴在动脉粥样硬化发生和发展过程中所起的作用,从而探索抗动脉粥样硬化的可能方法。方法:复苏本实验室已成功分选出的平滑肌祖细胞,并将其传代培养,按照实验设计分别分为六个组:①正常对照组:加入普通培养基;②低剂量组(L组):加入LPS终浓度为1ug/mL,孵育6h;③中剂量组(M组):加入LPS终浓度为10ug/mL,孵育6 h;④高剂量组(H组):加入LPS终浓度为30ug/mL,孵育6 h;⑤12 h组:加入LPS终浓度为10ug/mL,孵育12 h;⑥24 h组:加入LPS终浓度为10ug/mL,孵育24 h。用免疫荧光染色及共聚焦激光扫描显微镜分析和蛋白免疫印迹检测平滑肌祖细胞基质细胞衍生因子受体蛋白表达,逆转录聚合酶链反应检测平滑肌祖细胞基质细胞衍生因子受体mRNA的表达,观察脂多糖对平滑肌祖细胞表达基质细胞衍生因子受体的时效和浓度关系。结果:免疫荧光染色和共聚焦激光扫描显微镜分析测得的结果与RT-PCR和Western blot检测的结果相一致,未给予脂多糖刺激的平滑肌祖细胞有基础水平的基质细胞衍生因子受体表达,脂多糖是基质细胞衍生因子受体的强诱导物。当刺激时间恒定时(6h),随着刺激浓度的增加,L组和M组的基质细胞衍生因子受体表达逐渐增强,与正常对照组相比均具有显著性差异(P<0.01),H组开始下降。当刺激浓度恒定时(10ug/mL),随着刺激时间的延长,M组和12h组的表达量也逐级增强,与正常对照组相比均具有显著性差异(P<0.01)。在所有组中,12h组表达最强,其mRNA和蛋白水平分别为基础水平的6.10倍和4.76倍,24h组又下降,但仍高于基础水平。结论:平滑肌祖细胞能表达低水平的CXCR4,动脉粥样硬化的危险因子脂多糖能够使平滑肌祖细胞的CXCR4水平上调,其作用在一定范围内呈浓度时间依赖性,提示SDF-1/CXCR4轴可能参与了平滑肌祖细胞在血管损伤部位的归巢。

全文目录

摘要  6-8
ABSTRACT  8-10
前言  10-11
实验材料与设备  11-18
实验方法  18-26
实验结果  26-27
讨论  27-30
附图  30-33
结论  33-34
参考文献  34-38
综述  38-51
  参考文献  45-51
致谢  51

脂多糖对小鼠骨髓源性平滑肌祖细胞表达CXCR4的影响

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