学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

甘蓝型油菜抗（耐）菌核病分子机理的初步分析

作　者: 金良
导　师: 甘莉
学　校: 华中农业大学
专　业: 作物遗传育种
关键词: 油菜菌核病叶片蛋白毛细管区带电泳反转录差异展示法同源序列法(RGA) 苯丙氨酸解氨酶(PAL) 过氧化物歧化酶(SOD)
分类号: S435.65
类　型: 硕士论文
年　份: 2003年
下　载: 136次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

作为中国油菜尤其是长江流域油菜产区的最主要的病害之一，菌核病早在上个世纪30年代就引起许多科学家的重视，但在取得许多进展的同时，由于受到研究手段、研究方法和菌核病本身复杂致病机理的困扰，人们对它的抗病机理只停留在生理生化上的观察和初步的遗传机理研究，从而一直成为油菜抗病育种中的一个瓶颈。利用毛细管电泳和DDRT-PCR检测经菌核病菌诱导的感染叶片与正常叶片在蛋白质水平上的差异。实验表明，在未涂层石英毛细管中用区带电泳（CZE）分析经油菜菌核病菌侵染的油菜叶片蛋白质提取物，实验成功地检测到经油菜菌核病诱导叶片表达和抑制的特异蛋白。条件的优化表明在pH2.6、温度25-30℃、电压25-30kv的条件下分离效果较好，且在连续运行6次的情况下指定参照峰的相对标准偏差（RSD）小于1％。利用差异显示（DDRT-PCR）轮回亲本中油821和BC₅ 821×888RNA转录水平上的表达差异，由26条差显随机引物和3条锚定引物组成的共72对引物进行实验，但结果显示在基因表达水平上它们没有差异。由不同植物已经克隆出来的苯丙氨酸解氨酶（PAL）和过氧化物歧化酶（SOD-Cu／Zn、SOD-Fe）的防卫基因（片段）作同源性比较，根据它们基因组／cDNA的保守序列设计引物三对，在中油821的基因组和总RNA反转录后的cDNA中每对引物均能扩增出一条主带来，经回收后克隆，已经测序了其中5条，在GeneBank中经BLASTN分析后，结果与一些十字花科芸薹属植物或其它油菜品种对应的已知基因有高度同源性。

甘蓝型油菜抗（耐）菌核病分子机理的初步分析

内容摘要

全文目录

相似论文