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江苏省油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)的抗药性监测及防治研究

作 者: 匡静
导 师: 周明国
学 校: 南京农业大学
专 业: 植物病理学
关键词: 油菜菌核病 多菌灵 菌核净 咯菌腈
分类号: S435.654
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要


油菜菌核病是一种世界性植物病害,随着农业生产结构的调整,油菜种植面积逐渐扩大,菌核病的发生呈上升趋势,严重影响了油菜的产量和品质。自20世纪80年代以来,我国油菜菌核病主要使用多菌灵等苯并咪唑类杀菌剂进行防治,但因其作用位点单一,长期连续单一使用,加速了病菌抗药性的产生。自1995年以来,多菌灵防治菌核病的效果因抗药性大幅度下降,近年来在苏沪地区防治彻底失败。从本世纪初起,菌核净、扑海因、速克灵、乙烯菌核利等二甲酰亚胺类杀菌剂开始用于油菜菌核病的防治。为了明确江苏省油菜菌核病菌的抗药性动态,针对江苏省防治油菜菌核病的用药情况,本文监测了油菜菌核病菌对多菌灵、菌核净的抗药性,比较了抗性菌株和敏感菌株的基本生物学性状的差异。结果表明:油菜菌核病菌多菌灵抗性菌株在田间已形成优势群体,导致多菌灵失去使用价值;通过油菜菌核病菌对菌核净的抗药性监测,发现在江苏已经出现抗药性菌株;本研究发现苯基吡咯类杀菌剂——咯菌腈对菌核病菌具有极高抗菌活性,并对其防治效果进行了初探。2008-2010年从江苏省各油菜产区采集分离油菜菌核病菌菌株3990个,以5μg/mL和100μg/mL为区分剂量,经监测发现不同地区对多菌灵抗性频率不同,三年内对多菌灵的平均抗性频率为16.3%。在不含药培养基上转代培养8次后,抗药性菌株依然保持原来的抗性水平,并且发现抗性菌株和敏感菌株在菌丝生长、产菌核能力和致病力方面没有显著性差异,说明抗性菌株和敏感菌株在田间同样具有很强的寄主适合度。2008-2010年分离的3990个菌株对菌核净的敏感性测定,结果表明大部分菌株对菌核净仍然是敏感的,仅2010年从连云港地区采集分离的1个菌株能够在5μg/mL的PDA含药培养基上正常生长。将田间抗性菌株与亲本菌株比较,其菌丝生长速率减慢,菌丝干重下降。采用菌丝生长速率法测定了自江苏省12个县市分离的120个油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)菌株对咯菌腈的敏感性,并建立了敏感性基线。结果表明田间野生菌株对咯菌腈的敏感性存在较小差异,120个油菜菌核病菌的EC5o值变化范围是0.003~0.030μg/mL,平均ECso为0.015±0.005μg/mL,最低抑制浓度(MIC)≤0.05μg/mL,表明咯菌腈对油菜菌核病菌的菌丝生长有强烈的抑制活性。温室盆钵试验发现咯菌腈在油菜上的残效期较长,20μg/mL的咯菌腈喷雾一周后,防治效果仍可达80%;开花初期用100μg/mL咯菌腈在大田喷雾,至收获前的防治效果可达90%以上。通过药剂驯化获得4个咯菌腈高抗菌株(抗性倍数大于2000),并发现这些诱导的抗性菌株生长速率减慢,菌丝干重下降,产菌核能力和致病力下降,对渗透压更敏感。咯菌腈与多菌灵没有交互抗性,但是与菌核净和异菌脲存在正交互抗性。

全文目录


摘要  8-10ABSTRACT  10-12符号及缩略说明表  12-13第一部分 文献综述  13-37  第一章 油菜菌核病的研究现状  14-20    1 油菜菌核病的病原物及其分类地位  14-15    2 油菜菌核病菌危害症状  15    3 油菜菌核病菌的侵染循环及发病因素  15-16    4 油菜菌核病综合防治研究现状  16-20      4.1 农业防治  16-17      4.2 抗病品种选育  17-18      4.3 生物防治  18      4.4 化学防治  18-20  第二章 油菜菌核病化学防治研究进展  20-37    1 苯并咪唑类杀菌剂研究现状  20-27      1.1 苯并咪唑类杀菌剂主要种类及防治对象  20-22        1.1.1 多菌灵(carbendazim)  20-21        1.1.2 苯菌灵(benomyl)  21        1.1.3 噻菌灵(thiabendazole)  21        1.1.4 麦穗宁(fuberidazole)  21-22        1.1.5 甲基托布津(thiophanate-methyl)  22      1.2 苯并咪唑类杀菌剂的代谢及安全评价  22-23      1.3 苯并咪唑类杀菌剂的作用机制  23      1.4 苯并咪唑类杀菌剂的抗性研究  23-27        1.4.1 抗性机制  24-25        1.4.2 抗药性发生特点  25-26        1.4.3 抗药性检测  26-27        1.4.4 抗药性治理  27    2 二甲酰亚胺类杀菌剂研究现状  27-31      2.1 二甲酰亚胺类杀菌剂使用概况  28      2.2 二甲酰亚胺类杀菌剂的作用机制  28-29      2.3 二甲酰亚胺类杀菌剂的抗药性发生特点  29-30        2.3.1 抗药性发生范围广、速度快  29        2.3.2 DCFs与芳香烃类杀菌剂具有交互抗药性  29-30        2.3.3 病原菌对DCFs抗药性与渗透压具有相关性  30      2.4 抗性机制  30-31    3 咯菌腈及其研究现状  31-37      3.1 合成方法  31-33      3.2 基本性能  33      3.3 咯菌腈的毒性与残留  33-34        3.3.1 哺乳动物毒性及生态毒性  33-34        3.3.2 咯菌腈的残留与降解  34      3.4 咯菌腈的杀菌特点及抗菌谱  34      3.5 咯菌腈的作用机理与作用特性  34-35      3.6 咯菌腈在农业生产上的应用  35-37        3.6.1 咯菌腈单剂在农业生产上的应用  35        3.6.2 咯菌腈复配剂在农业生产上的应用  35-36        3.6.3 咯菌腈应用于果实储存病害的防治  36-37第二部分 研究内容  37-68  第一章 江苏省油菜菌核病菌对多菌灵的抗药性监测  38-46    1 材料与方法  39-40      1.1 供试菌株  39      1.2 供试药剂与培养基  39      1.3 菌株对多菌灵敏感性测定  39      1.4 抗药性表型的稳定性测定  39-40      1.5 菌丝生长速率、生长量、产菌核能力、致病力比较测定  40    2 结果与分析  40-43      2.1 江苏省油菜菌核病菌的采集与分离  40-41      2.2 江苏省油菜菌核病菌对多菌灵的抗性频率测定  41-42      2.3 抗药性表型稳定性测定  42      2.4 菌丝生长速率、生长量、产菌核能力以及致病力的比较测定  42-43    3 讨论  43-46  第二章 江苏省油菜菌核病菌群体对菌核净的抗性监测  46-52    1 材料与方法  46-48      1.1 供试药剂与培养基  46-47      1.2 供试菌株  47      1.3 抗性定性测定  47      1.4 抗性遗传稳定性测定  47      1.5 生长量、产菌核能力及致病力的测定  47-48    2 结果与分析  48-50      2.1 油菜菌核病菌的分离保存  48      2.2 江苏省油菜菌核病菌对菌核净的敏感性  48-49      2.3 抗药性遗传稳定性  49      2.4 菌丝生长量和产菌核能力  49-50    3 讨论  50-52  第三章 油菜菌核病菌对咯菌腈敏感性基线的建立以及抗药性风险的评估  52-68    1 材料与方法  53-57      1.1 供试药剂与培养基  53      1.2 菌株采集与分离  53-54      1.3 油菜菌核病菌对咯菌腈敏感性基线的建立  54      1.4 药剂驯化获得抗性突变体以及抗药性遗传稳定性测定  54      1.5 交互抗性的测定  54-55      1.6 生长速率、生长量、产菌核能力、致病力的测定  55      1.7 渗透压敏感性测定  55-56      1.8 室内盆铂试验测定药剂保护作用以及残效  56      1.9 间药效实验  56-57    2 结果与分析  57-65      2.1 油菜菌核病菌对咯菌腈敏感性基线的建立  57-60      2.2 油菜菌核病菌对咯菌腈的抗性诱导及抗性遗传稳定性  60-61      2.3 交互抗药性的测定  61-62      2.4 菌丝生长、产菌核能力、致病力的比较测定  62      2.5 渗透压的比较测定  62-63      2.6 保护作用及药剂残效测定  63-65      2.7 田间药效实验  65    3 结论  65-68参考文献  68-76攻读硕士期间发表论文情况  76-78致谢  78

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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 病虫害及其防治 > 农作物病虫害及其防治 > 经济作物病虫害 > 油料作物病虫害 > 油菜子(芸苔)病虫害
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