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PCOS大鼠卵巢中Foxo1a基因的表达及其可能作用的初步探讨

作 者: 柳先廉
导 师: 钟刚
学 校: 华中科技大学
专 业: 妇产科学
关键词: Foxo1a 多囊卵巢综合征 大鼠模型
分类号: R711.75
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要


第一部分建立多囊卵巢综合征Wistar大鼠模型目的:建立多囊卵巢综合征Wistar大鼠模型,并探讨其胰岛素抵抗的特征。方法:选择21日年龄的雌性Wistar大鼠,断奶后于第22日龄喂以颗粒饲料并每天分别给予皮下注射DHEA油剂【DHEA油剂(6 mg/ 100 g体重+ 0.2 ml注射用大豆油剂)】(PCOS模型组)和每天给予皮下注射0.2 ml注射用大豆油剂(对照组),均为连续应用20天,对大鼠体重进行测量,然后行麻醉后,从心脏部位采血5ml,检测血清中黄体生成素(LH)、雄激素(T)、雌激素(E2)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)等浓度,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA1-IR),取出卵巢测量卵巢体重后,对卵巢组织切片进行HE染色,观察卵巢组织形态学变化。结果:⑴血清性激素及血糖和胰岛素水平变化:PCOS模型组血清中雄激素的水平、空腹血糖和血胰岛素水平及胰岛素抵抗指数均明显高于对照组(分别为P<0.01,P<0.01, P<0.05, P<0.05);⑵HE染色后对照组卵巢镜下见多个黄体及不同发育阶段的卵泡。PCOS模型组卵巢重量较对照组增加(P<0.05),体积较对照组增大,囊状扩张卵泡比例明显增加,卵巢少见黄体形成。结论:⑴DHEA诱导Wistar大鼠PCOS模型存在高雄激素血症和高血糖,并伴有胰岛素抵抗,卵巢组织HE染色有囊状扩张卵泡和闭锁卵泡增加,类似于PCOS患者血清学和卵巢组织学改变;⑵DHEA诱导Wistar大鼠PCOS模型可作为临床研究胰岛素抵抗的PCOS理想模型。第二部分PCOS大鼠卵巢中Foxo1a的表达及其可能作用目的:检测Foxo1a基因在PCOS大鼠卵巢颗粒细胞中的表达,并比较其与性激素及胰岛素抵抗之间的关系,探讨其在PCOS发病中的可能作用。方法:PCOS模型组和对照组中的部分卵巢行石蜡切片卵巢包埋,采用免疫组织化学SABC法检测Foxo1a (phospho S256)在卵巢中的颗粒细胞的表达,部分卵巢用于提取颗粒细胞,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定卵巢颗粒细胞中的Foxo1a在细胞的mRNA的表达水平。将PCOS模型组卵巢颗粒细胞中的Foxo1a在细胞的mRNA的相对表达水平量值与血清激素及胰岛素抵抗等进行相关性检验。结果:⑴免疫组织化学SABC法显示PCOS模型组和对照组卵巢颗粒细胞中均有Foxo1a蛋白的表达,但两组卵巢颗粒细胞中的定位有明显的不同,在PCOS模型组中主要定位于细胞胞核,而在对照组中主要定位于胞浆;PCOS模型组Foxo1a蛋白表达显著高于对照组(203.1±50.34 vs 532.4±119.19,P<0.01)。⑵RT-PCR法检测结果显示,PCOS模型组中的颗粒细胞Foxo1a的mRNA的表达显著高于对照组(0.7858±0.0711 vs 0.4619±0.0113, P<0.01)。⑶PCOS模型组中,Foxo1a的mRNA表达与其血清雄激素正相关,与血清LH、E2、FBG、FINS以及HOMA1-IR无相关性。结论:PCOS模型组大鼠卵巢颗粒细胞中Foxo1a高表达,可能与PCOS患者高雄激素有密切相关,在PCOS发病过程中可能起重要的作用。

全文目录


主要英文缩略词表  5-6
摘要  6-8
Abstract  8-11
前言  11-13
第一部分 多囊卵巢综合征 Wistar 大鼠模型的建立  13-17
  一、目的  13
  二、资料与方法  13-14
  三、结果  14-16
  四、小结  16-17
第二部分 多囊卵巢综合征模型大鼠和对照组大鼠卵巢 Foxo1a 基因表达的研究  17-28
  一、目的  17
  二、资料与方法  17-23
  三、结果  23-27
  四、小结  27-28
讨论  28-32
参考文献  32-38
综述  38-49
  参考文献  43-49
致谢  49

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中图分类: > 医药、卫生 > 妇产科学 > 妇科学 > 女性生殖器其他疾病 > 卵巢疾病
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