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大鼠应激性心肌病神经肽Y和PGC-1α表达的实验研究

作 者: 阿兰达(SunnasseeAnanda)
导 师: 陈晓瑞;朱少华
学 校: 华中科技大学
专 业: 法医病理学
关键词: 神经肽Y PGC-1α 应激性心肌病 法医病理学 猝死 大鼠模型
分类号: R542.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要


应激性心肌病由应激导致的一种急性心肌功能障碍,常因紧张、情感等神经源性因素所激发。目前被认为是猝死发生的原因之一。应激性心肌病在日本被称为Tako-Tsubo心肌病,破裂心脏综合征和左室心尖球囊扩张综合症,临床上该病心电图检查示心肌缺血,血液中儿茶酚胺水平增高,超声检查可见左室球囊扩张,节段性室壁运动异常,但冠状动脉造影却往往不能发现有血流动力学改变的冠状动脉狭窄性疾病存在。此类疾病由于发病急骤,往往不能得到及时的临床救治而猝死,也没有相应的临床资料。目前,临床及法医病理学诊断都极大的依赖病史,大体解剖所见和显微病理形态学改变。但多数病例由于缺乏相应的临床资料和尸体存在死后改变而给诊断带来困难,从而引起纠纷。因此,探讨一种新的方法能检测心肌的应激性改变,并能应用于死后心肌组织的检测,将具有重要的法医学意义。本研究根据文献报道,建立大鼠应激性心肌病模型。在进行常规病理组织学观察的基础上,应用荧光免疫组织化学和计算机图像分析方法检测心肌组织内神经肽Y(NPY)的分布水平,应用半定量RT-PCR方法检测过氧化物增殖物活化受体γ辅激活因子-1α(PGC-1α)在心肌组织中的mRNA表达水平。探讨以上两种分子生物学指标在应激导致的心肌缺血性改变中的诊断价值,期望为今后此类疾病的病理诊断提供一种可靠的方法。目的:建立大鼠应激性心肌病模型,在常规病理组织学.观察基础上,检测神经肽Y和PGC-1αmRNA在大鼠心肌组织中的表达。方法:30只雄性SD大鼠(平均重量250g/只)随机分为两组,实验组和对照组。实验组大鼠每天先置于玻璃箱内固定30min,然后将大鼠移至电足休克笼内进行30min的足底电刺激。15d和20d后,分别取10只实验组大鼠和5只对照组大鼠处死。将心脏取出冲洗干净后,置入10%甲醛溶液或液态氮(-70℃)中。心脏标本经固定后,常规取材进行HE染色。冰冻切片进行NPY免疫荧光染色,应用计算机图像分析系统对神经肽Y的表达进行检测,应用半定量RT-PCR技术检测大鼠心肌中PGC-1αmRNA的表达,并对其表达强度进行检测。结果:实验组大鼠左心室出现收缩带坏死,炎性细胞浸润,心肌间质水肿和局灶性纤维化,上述改变与应激性心肌病的病理学变化一致。但25d处死大鼠收缩带坏死程度比15d处死的大鼠重。无论是15d,还是25d实验组,与对照组相比,NPY和PGC-1αmRNA表达均显著增高,但25d实验组的NPY表达要高于15d实验组,而PGC-1αmRNA在15d及25d两组之间的表达在统计学上无明显差异( NPY: P<0.01, PGC-1α: P > 0.05)。结论:组织病理学检查结果证实大鼠应激性心肌病模型复制成功,实验组大鼠存在应激性心肌病的病理形态学改变。实验结果表明,与对照组相比较,应激性心肌病大鼠心肌组织中NPY和PGC-1α均呈明显高表达。本实验结果证实这两种分子标记物可用于应激性心肌病的分子生物学检测,有望为应激性心肌病的诊断提供一种新的方法。

全文目录


第一部分  5-43
  主要缩略语英汉对照  5-6
  中文摘要  6-8
  英文摘要  8-11
  前言  11-13
  材料与方法  13-21
  实验结果  21-29
  讨论  29-37
  小结  37-38
  参考文献  38-43
第二部分  43-56
  综述  43-56
    参考文献  50-56
第三部分  56
  致谢  56

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 心脏、血管(循环系)疾病 > 心脏疾病 > 心肌疾病
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