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脐橙炭疽病原菌生物学特性及防治药物的筛选研究

作　者: 张晓媛
导　师: 许杨
学　校: 南昌大学
专　业: 微生物
关键词: 脐橙炭疽菌生物学特性毒力测试
分类号: S436.66
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

赣州是全国最大的脐橙主产区之一。近年来随着种植面积的不断扩大及气候的复杂多变,导致多地脐橙果园大面积感染炭疽病,严重影响了脐橙产量和品质。在严峻防治形势面前,专门针对脐橙炭疽病的研究是必要和紧迫的。本研究从江西赣州的六个脐橙果园采集病叶样本,经过常规组织分离、纯化培养和科赫验证,得到6株致病菌菌株。根据采集地不同,分别命名为AYB4、XFB8-1、LNB21-2、HJA9、GXA5-1、LNB11。对6株致病菌进行形态学和菌落特征鉴定,按照Sutton (1980)分类系统及魏景超鉴定手册,认为6株菌株为胶孢炭疽菌C. gloeosporioides。毒力测试筛选出致病力最强的两株菌株GXA 5-1, LNB21-2,对其进行了生物学特性和生理生化特性测定。对菌株GXA 5-1进行化学药物和生防菌防治试验。试验结果有以下几点：1六株致病菌形态和菌落特征1.1菌落特征28℃,PDA培养六天,菌丝呈现白色或黄白色也有灰色,各菌落边缘整齐,气生菌丝稀疏至茂密发达,呈绒毛状。菌落背面有橘色或紫色或墨绿色色素分泌,有时可见清晰同心轮纹。1.2形态特征PDA培养基,28℃培养6天,在显微镜下可观察到分生孢子呈圆柱形、长椭圆形或新月形、单孢、无色、菌丝无色,有的具有隔膜及分枝.附着孢褐色、圆形。各菌株分生孢子大小11.74-22.41×2.86-6.29μm。菌株间培养性状存在差异,未见有性世代。2菌株GXA 5-1,LNB21-2生物学特性采用孢子悬浮液创伤接种法,进行菌株毒力测试结果,筛选出致病力强的两株菌株GXA 5-1,LNB21-2,对其进行生物学特性鉴定,结果如下：2.1温度对菌株的影响在PDA上,菌丝生长和孢子萌发的适温为23℃-28℃。2.2湿度对菌株的影响28℃、PDA培养,湿度对菌丝生长未见有显著性差异,但是当相对湿度大于75%时,有利于分生孢子的萌发。2.3 pH值对菌株的影响PDA培养,28℃,菌丝在pH 3-9均能生长,孢子也能萌发。但pH 6时,菌落直径最大。在pH 5、6时,分生孢子的萌发率为100%。2.4光照对菌株的影响PDA培养,28℃,光照对菌落直径和分生孢子萌发影响不显著。2.5碳源对菌株的影响28℃,在含有葡萄糖、果糖、乳糖等6种碳源的查彼培养基上培养六天,菌株在含有葡萄糖的培养基上菌落直径最大,葡萄糖能显著促进菌丝生长。2.6氮源对菌株的影响28℃,在含有硝酸钾、酸水解干酪素、氯化铵等10种不同氮源的查彼培养基上培养六天,菌株能很好利用硝酸钾、酸水解干酪素的培养基,在含有硝酸钾培养基上菌落直径最大。2.7生理生化鉴定2株菌都能分泌过氧化氢酶、氧化酶、淀粉酶、漆酶、明胶酶等胞外酶,但不产H2S。3化学药物对菌株GXA5-1防治采用生长速率法,测定咪鲜胺(25%)、咪鲜胺锰盐(50%)、苯醚·甲环唑(10%)等11种化学药物对菌株GXA5-1的防治效果。测试结果表明,咪鲜胺(25%)抑制菌丝生长和抑制孢子萌发的EC50最小,EC50分别为0.021mg/mL,0.004 mg/mL,有在大田试验中推广的价值。4生物防治菌对GXA5-1的防治采用杯碟法测定枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、荧光假单孢菌、木霉菌、瓦克青霉、白浅灰链霉菌五种生防菌对菌株GXA5-1的防治效果。结果显示,与其它菌株相比,白浅灰链霉菌抑制菌丝体生长的效果最显著,在不同稀释度下的相对抑制率都是最大的,稀释10倍、100倍、200倍的相对抑制率分别为96.31%、85.82%、62.69%。枯草芽孢杆菌抑制孢子萌发的效果最显著,稀释10倍、100倍、200倍的相对抑制率分别为89.93%、67.59%、48.76%。

全文目录

摘要  3-6
ABSTRACT  6-11
前言  11-18
1. 材料与方法  18-30
  1.1 材料  18-21
    1.1.1 供试菌株  18-19
    1.1.2 供试培养基  19-20
    1.1.3 供试药剂  20-21
  1.2 试验方法  21-30
    1.2.1 供病害症状的观察和标本采集  21
    1.2.2 病原菌的分离及致病性测定  21-22
    1.2.3 生物学特性测定  22-24
    1.2.4 病原菌生理生化特性测定  24-25
    1.2.5 防治脐橙炭疽病的化学药物筛选研究  25-27
    1.2.6 防治脐橙炭疽病的生防菌的筛选研究  27-30
2. 结果与分析  30-62
  2.1 脐橙炭疽病病原的鉴定  30-41
    2.1.1 脐橙炭疽病症状  30-31
    2.1.2 采集病叶和科赫验证接种病叶症状前后对比图片  31-34
    2.1.3 脐橙炭疽病病原菌的形态学及培养特征  34-40
    2.1.4 不同菌株的对脐橙的致病性  40-41
  2.2 生物学特性的鉴定  41-52
    2.2.1 温度与病原菌生长、孢子萌发的关系  41-43
    2.2.2 湿度与病原菌生长、孢子萌发的关系  43-45
    2.2.3 pH值与病原菌生长、孢子萌发的关系  45-47
    2.2.4 光照与病原菌生长、孢子萌发的关系  47-49
    2.2.5 营养条件与病原菌生长的关系  49-52
  2.3 化学药物实验  52-60
    2.3.1 不同药物对菌丝生长速率的影响  52-57
    2.3.2 不同药物对孢子萌发的影响  57-60
  2.4 生防菌防治研究  60-62
3. 小结  62-66
致谢  66-67
参考文献  67-71
攻读学位期间的研究成果  71

脐橙炭疽病原菌生物学特性及防治药物的筛选研究

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