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马尾松幼苗茎段和春梢茎段组织培养

作　者: 黄振
导　师: 李志辉
学　校: 中南林业科技大学
专　业: 森林培育
关键词: 马尾松快速繁殖胚性愈伤组织体胚发生器官分化
分类号: S791.248
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 72次
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内容摘要

马尾松(Pinus massoniana Lamb.)是我国南方亚热带地区重要的乡土速生针叶树种,是重要的工业原料林和采脂林树种,具有很高的综合利用价值。马尾松良种种子园种子产量较低、其扦插繁殖具有显著的年龄效应,马尾松良种种苗供不应求已成为马尾松产业发展的瓶颈,因此,采用组织培养技术研究马尾松快繁技术具有重要的理论和实践意义。本实验分别以湖南省桂阳县马尾松种子园提供的种子萌发出的幼苗茎段和湖南省天际岭林场10年生以下马尾松春梢茎段为起始外植体,通过实验设计,探讨马尾松愈伤组织的诱导、增殖和不定芽再生的条件,结果表明：(1)幼苗茎段愈伤组织诱导的最佳培养基为改良GD+4 mg/L 2,4-D+2 mg/L 6-BA+500 mg/L CH+450 mg/L Gln+30 g/L蔗糖,萌发出的愈伤组织直径最大为8.5 mm；春梢茎段愈伤组织诱导的最佳培养基为DCR+0.5 mg/L NAA+2 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L 6-BA+0.2 g/L Vc+500 mg/L CH+450 mg/L Gln+30 g/L蔗糖,愈伤组织晶莹剔透,呈淡黄色或白色,略微带点粘性。(2)在愈伤组织培养时,外植体应进行暗培养,光照培养下愈伤组织的褐化严重。在诱导培养基上添加浓度为3 g/L肌醇,可以解决愈伤组织在继代培养过程中遇到的褐化问题,保持愈伤组织原有形态结构不变5代以上。继代培养时,细胞生长素和细胞分裂素的比值保持在1-3时对愈伤组织的增殖有利,且在这一激素浓度范围内各处理间并无明显差别,在幼苗茎段愈伤组织的继代过程中,2,4-D的浓度在4 mg/L,6-BA浓度为2 mg/L时,效果最好；在春梢茎段愈伤组织的继代过程中,添加0.5 mg/L NAA.2 mg/L 2,4-D.1.5 mg/L 6-BA,效果最好。(3)以马尾松春梢茎段培育出的愈伤组织为外植体,培养基方案为DCR+1mg/L KT+0.5 mg/L TDZ+500 mg/L CH+3g/L肌醇+30 g/L蔗糖,在经过继代3次以后,在愈伤组织上成功诱导分化出了2个马尾松不定芽,本试验表明以马尾松春梢茎段为外植体,可以通过愈伤组织间接器官发生再生出不定芽。(4)以带子叶顶芽的幼苗茎段为外植体,培养基为GD+0.5 mg/L IBA+0.05 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖,4次继代培养后生根诱导率为21.4%；在不同浓度的NAA继代试验中,培养基方案为改良GD+0.5 mg/L NAA+20 g/L蔗糖时,4次继代培养后根的诱导率为57.1%。

全文目录

摘要  4-5
ABSTRACT  5-9
1 论文综述  9-23
  1.1 植物组织培养概况  9-10
  1.2 松属树种组织培养研究概况  10-19
    1.2.1 器官发生与快速繁殖  10-15
    1.2.2 体细胞胚胎发生与植株再生  15-19
  1.3 马尾松遗传改良现状  19-21
    1.3.1 马尾松生物学特性和分布区域  19-20
    1.3.2 马尾松遗传改良研究现状  20-21
  1.4 本研究的目的和意义  21-23
2 马尾松愈伤组织诱导  23-37
  2.1 实验材料  23
    2.1.1 外植体来源  23
    2.1.2 培养基的配置  23
  2.2 实验方法与处理  23-27
    2.2.1 外植体消毒处理  23-24
    2.2.2 外植体大小和接种方式对春梢愈伤组织诱导的影响  24
    2.2.3 光照对愈伤组织形态的影响  24
    2.2.4 愈伤组织诱导和增殖基本培养基的筛选  24-25
    2.2.5 继代培养中预防愈伤组织褐化的研究  25
    2.2.6 幼苗茎段愈伤组织培养中激素的选择  25
    2.2.7 春梢茎段愈伤组织诱导和增殖培养中激素的选择  25-26
    2.2.8 愈伤组织诱导胚性愈伤组织的研究  26-27
  2.3 结果与分析  27-37
    2.3.1 不同处理对外植体消毒效果的影响  27-28
    2.3.2 外植体大小和接种方式对春梢愈伤组织诱导的影响  28
    2.3.3 光照对愈伤组织形态的影响  28-29
    2.3.4 愈伤组织诱导和增殖培养基的筛选  29-30
    2.3.5 继代培养中预防愈伤组织褐化的研究  30-31
    2.3.6 幼苗茎段愈伤组织培养中激素的选择  31-33
    2.3.7 春梢茎段愈伤组织培养中激素的选择  33-35
    2.3.8 胚性愈伤组织诱导的研究  35-37
3 愈伤组织分化诱导器官发生  37-47
  3.1 实验材料与处理  37
  3.2 实验方法与内容  37-39
    3.2.1 春梢茎段愈伤组织诱导不定芽发生  37-38
    3.2.2 带子叶顶芽的幼苗茎段诱导生根的研究  38-39
  3.3 结果与分析  39-47
    3.3.1 春梢茎段诱导不定芽发生  39-42
    3.3.2 带子叶顶芽的幼苗茎段诱导生根的研究  42-47
4 结论与讨论  47-52
  4.1 结论  47-48
  4.2 讨论  48-50
    4.2.1 外植体预处理与消毒  48
    4.2.2 外植体培养过程中的褐化  48-49
    4.2.3 基本培养基的选择  49-50
    4.2.4 激素的选择  50
  4.3 本研究的创新点和不足  50-52
    4.3.1 本研究的创新点  50-51
    4.3.2 本研究的不足  51-52
参考文献  52-60
附录A 培养基成分  60-61
附录B 实验组图  61-66
附录C 缩略词表  66-67
附录D 攻读学位期间发表论文  67-68
致谢  68

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