学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示
生物金属化增强电化学免疫传感器信号的研究
作 者: 曲波
导 师: 楚霞
学 校: 湖南师范大学
专 业: 分析化学
关键词: 电化学免疫分析法 适配体 血小板源生长因子BB 硅纳米粒子 银沉积 脂质体 前列腺特异性抗原 生物催化沉积
分类号: TP212.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2008年
下 载: 99次
引 用: 0次
阅 读: 论文下载
内容摘要
对蛋白质的检测在生命科学领域具有重要的意义。目前,已经有一些重要的对蛋白质的检测方法,比如放射免疫分析,酶联免疫分析等。但是,随着生命科学的发展,这些方法的缺点已经越来越明显,这使得这些方法的应用受到了一定的限制,尤其是在一些高灵度检测的领域比如对疾病的早期诊断方面。所以,很有必要建立一些具有高灵敏度、易操作和有通用性的蛋白质检测方法。显然,对免疫传感器的信号进行增强会大大改善它的灵敏度。电化学装置因为具有简单、灵敏和易于微型化的优点,正越来越受到人们的关注。毫无疑问,对电化学免疫传感器进行信号增强技术研究会加快免疫分析的进步。本研究在增强免疫电化学传感的信号方面做了以下三个方面的工作:第一部分:提出了一种基于适配体识别和生物催化金属沉积的电化学免疫传感对血小板源生长因子BB(PDGF-BB)进行高灵敏检测。在本方法中,首先把固定抗体固定到电极的表面,接着,依次把抗原和生物素标记的适配体溶液滴加到电极表面进行反应以形成免疫复合物。然后,通过生物素和亲合素的特异性反应,把亲合素标记的碱性磷酸酶固定到电极表面。碱性磷酸酶可以催化抗坏血酸磷酸酯镁(AA-P)水解成抗坏血酸,后者把溶液中的银离子还原成金属单质沉积到电极的表面。最后用线性扫描伏安法对电极表面沉积的金属银进行测量。基于生物金属化的高灵敏度,本方法在对PDGF-BB的检测中,在1到1000ng/mL的范围保持很好的线性关系,检测下限为0.8ng/mL。第二部分:提出了一种基于功能化的硅纳米粒子的免疫传感器对前列腺特异性抗原(PSA)进行检测。在这种方法中,第一次提出了同时修饰上了检测抗体和碱性磷酸酶两种物质的硅纳米粒子用于对PSA电化学免疫检测。当固定抗体通过一层自组装单分子膜被连接到电极的表面上以后,接着通过一个免疫夹心反应把碱性磷酸酶固定到电极的表面。当ALP酶催化AA-P水解生成抗坏血酸以后,银离子在电极的表面被还原。最后,在电极表面沉积的金属银的量与被固定到电极表面的抗原的量成一定的比例关系。因为本方法中用Si NPs来作为酶的载体,可以极大的提高检测的灵敏度,电化学峰电流和抗原浓度在1到35ng/mL范围内保持良好线性关系,检测下限为0.76ng/mL。第三部分:提出了一种基于脂质体包埋碱性磷酸酶和生物催化金属沉积的超灵敏免疫传感器。为了对这种提出来的免疫分析方法的可行性进行检测,采用免疫夹心反应的原理对PSA这目标检测物进行了检测。当固定抗体、抗原和检测抗体修饰的脂质体在电极的表面形成免疫夹心复合物以后,向电极的表面滴加表面活性剂,使脂质体破裂释放出所包含的碱性磷酸酶,接着利用碱性磷酸酶的催化特性引发电极表面的银沉积反应,以在电极表面形成一层银纳米粒子。脂质体用做酶的载体结合酶的高催化活性成功的提高了免疫分析方法的灵敏度。该方法在对人体PSA进行检测时,在0.01到1000ng/mL的范围内都保持了较好的线性,最低检测下限可以达到0.007ng/mL。
|
全文目录
中文摘要 3-5 英文摘要 5-10 第一章 绪论 10-23 1.1 引言 10-11 1.2 免疫分析方法基础 11-19 1.3 免疫分析信号增强技术 19-21 1.4 本研究工作的构思 21-23 第二章 基于核酸识体的电化学免疫传感器用于血小板源性生长因子的检测 23-31 2.1 引言 23-24 2.2 实验部分 24-26 2.3 结果与讨论 26-30 2.4 结论 30-31 第三章 一种基于共标记硅纳米粒子的新型电化学免疫传感器对人血清中前列腺特异性抗原的检测 31-43 3.1 引言 31-33 3.2 实验部分 33-36 3.3 结果与讨论 36-42 3.4 结论 42-43 第四章 基于脂质体和生物催化金属沉积的新型传感器对人体总前列腺特异性抗原的放大检测 43-54 4.1 引言 43-44 4.2 实验部分 44-47 4.3 结果与讨论 47-53 4.4 结论 53-54 结语 54-55 参考文献 55-66 致谢 66-67 附录1 攻读学位期间所发表的学术论文目录 67-68
|
相似论文
- 前列腺特异抗原与酸性磷酸酶在前列腺穿刺前临床研究,R737.25
- 良性前列腺增生合并前列腺组织炎症的临床分析,R697.3
- 胰激肽原酶促精液液化效果的评价,R698.2
- 间隙连接蛋白43在前列腺癌中的表达和临床意义,R737.25
- TRUS及其引导下的6+X点穿刺活检法诊断前列腺癌的临床价值,R737.25
- 年龄、前列腺体积及PSA与前列腺增生并发急性尿潴留的关系,R697.3
- 基于新型纳米复合物修饰的前列腺特异性抗原免疫传感器的研究,R446.6
- TPSA、F/T值及PSAD在前列腺癌诊断中的价值,R737.25
- 前列腺癌患者血清EPCA、PSA水平的相关研究,R737.25
- 50岁及以下非前列腺癌男性基础PSA和PSAV的特点:种族差异,R737.25
- 基于前列腺癌标志物的早期诊断检测仪研制,R197.39
- PSA>10ng/ml作为大体积前列腺患者前列腺穿刺活检指征的价值,R737.25
- 经直肠超声联合多因素诊断前列腺癌的应用研究,R737.25
- 电化学生物传感技术用于重金属和蛋白质的检测,Q503
- PSA4~10ng/ml的192例患者临床回顾性研究,R737.25
- 前列腺特异性抗原单克隆抗体的制备及初步鉴定,R446.6
- 高血清PSA值与前列腺疾病的相关研究,R737.25
- 比较三种方法在灰区前列腺偶发癌的诊断意义,R737.25
- 体外冲击波治疗慢性骨盆疼痛综合征的临床研究,R697.3
- 基于纳米材料的生物传感技术在生化分析中的应用,TB383.1
中图分类: > 工业技术 > 自动化技术、计算机技术 > 自动化技术及设备 > 自动化元件、部件 > 发送器(变换器)、传感器 > 化学传感器
© 2012 www.xueweilunwen.com
|