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鲍曼不动杆菌耐药程度与其主动外排泵蛋白的相关性研究

作　者: 周秩权
导　师: 夏忠弟
学　校: 中南大学
专　业: 医学微生物学
关键词: 鲍曼不动杆菌主动外排泵多重耐药 adeABC
分类号: R516
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

目的了解长沙地区鲍曼不动杆菌的耐药现状和耐药水平,为临床治疗鲍曼不动杆菌感染、合理应用抗生素提供实验依据和指导;研究鲍曼不动杆菌耐药程度与其主动外排泵蛋白的相关性,初步探讨鲍曼不动杆菌主动外排泵基因过度表达的转录调控机制。方法首先用纸片扩散法检测64株临床鲍曼不动杆菌对8种抗菌药物的敏感性;将其分为A组（对1～2种抗生素耐药）、B组（对3～5种抗生素耐药）和C组（对6～8种抗生素耐药）;检测64株临床鲍曼不动杆菌对罗丹明6G的外排情况,筛选出罗丹明6G外排明显增加的菌株;并用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测主动外排泵基因adeABC的表达水平;应用PCR方法扩增adeRS基因片段并测序,探索adeABC基因表达上调的可能机制。结果64株鲍曼不动杆菌中有4株对1～2种抗生素耐药（A组）,对3～5种抗生素耐药的有33株（B组）,对6～8种抗生素耐药的有27株（C组）;多重耐药组鲍曼不动杆菌对罗丹明6 G外排明显增高,外排程度A组＜B组＜C组;罗丹明6G外排增强的多重耐药不动杆菌其主动外排泵基因adeABC的表达水平显著增高;且存在AdeRVal₂₂₈→Ile、Ile₂₄₃→Val变异。结论①长沙地区鲍曼不动杆菌的耐药现象严峻;②鲍曼不动杆菌多重耐药与药物主动外排增强有关;③adeABC基因的过度表达是鲍曼不动杆菌多重耐药的重要原因。④AdeRS中的AdeR Val₂₂₈→Ile、Ile₂₄₃→Val变异与adeABC表达上调相关。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-10
英文缩略表  10-11
前言  11-13
第一章材料与方法  13-23
  1 材料  13-16
    1.1 菌株来源  13
    1.2 主要试剂以及来源  13-14
    1.3 主要仪器  14-15
    1.4 培养基  15-16
  2 方法  16-23
    2.1 实验技术路线  16
    2.2 临床菌株的收集和保存  16-17
    2.3 纸片扩散法药敏实验  17
    2.4 罗丹明6G外排情况测定  17-18
    2.5 主动外排泵基因adeABC的表达水平测定  18-20
    2.6 adeRS上调adeABC表达的机制初探  20-23
第二章结果  23-33
  1 药敏结果  23-24
  2 罗丹明6G外排情况  24
  3 adeABC基因mRNA表达水平测定  24-27
    3.1 鲍曼不动杆菌总RNA的提取  25
    3.2 RT-PCR产物分析结果并作统计分析。  25-27
  4 adeRS基因片段的测序以及分析  27-33
    4.1 adeRS基因片段PCR扩增结果  27
    4.2 adeRS基因片段测序结果  27-30
    4.3 氨基酸序列比对  30-33
第三章讨论  33-37
第四章结论  37-38
第五章进一步实验  38-39
论文参考文献  39-42
综述  42-53
致谢  53-54
在读期间完成的论文  54

鲍曼不动杆菌耐药程度与其主动外排泵蛋白的相关性研究

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