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木耳寡糖制备工艺和生物活性的研究

作　者: 李丽莉
导　师: 张彦龙
学　校: 黑龙江大学
专　业: 微生物学
关键词: 木耳多糖木耳寡糖 β-1,3-葡聚糖酶生物活性
分类号: TQ461
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

木耳味道鲜美,营养丰富,既是餐中上等佳肴,又是药中珍品,具有清肺、润津、降低胆固醇的作用。经研究表明,木耳中含有大量β-1,3-葡聚糖。木耳β-1,3-葡聚糖可以通过β-1,3-葡聚糖酶降解成木耳寡糖。木耳寡糖具有降血糖、降血脂、抗血栓、抗肿瘤等多种生物功能。木耳寡糖具有很大的应用前景,对于经济的发展和医药保健领域研究的进步,起到巨大推动作用。本课题符合当今社会需要,是一项具有重要理论价值和重大应用的价值的研究课题。本课题利用80%(NH4)2SO4沉淀、DEAE-52离子交换层析以及Sephadex G-100凝胶过滤柱层析等方法从扇贝消化腺中分离出β-1,3-葡聚糖酶。SDS-PAGE测定β-1,3-葡聚糖酶分子量为157kDa。β-1,3-葡聚糖酶酶解木耳多糖(β-1,3-葡聚糖)的最适pH为7.0,最适温度为30℃。通过Lineweaver-Burk作图,得到其米氏常数Km为13 mg/mL。酶解所得木耳寡糖,通过薄层层析、分子筛层析以及红外光谱分析验证。通过测定清除超氧阴离子自由基、羟基自由基以及DPPH自由基的能力来测定木耳寡糖的抗氧化能力。结果显示木耳寡糖具有很好的抗氧化能力。将木耳寡糖和三种细菌共培养,结果显示木耳寡糖还具有促进乳酸杆菌的生长和抑制大肠杆菌、产气肠杆菌生长的作用。

全文目录

中文摘要  2-3
Abstract  3-8
第1章绪论  8-21
  1.1 课题背景  8-9
  1.2 木耳概况  9-11
    1.2.1 植物学特征  9-10
    1.2.2 营养成分  10
    1.2.3 功能成分  10
    1.2.4 生物活性  10-11
  1.3 木耳的研究概况  11-13
  1.4 寡糖的研究概况  13-14
    1.4.1 国内研究概况  13
    1.4.2 国外研究概况  13-14
  1.5 寡糖的生物活性与应用  14-18
    1.5.1 抗菌活性  14-15
    1.5.2 抗病毒活性  15
    1.5.3 抗抑郁活性  15-16
    1.5.4 抗肿瘤作用  16
    1.5.5 刺激肠道菌群活性  16
    1.5.6 抗氧化活性  16-17
    1.5.7 抗炎活性  17
    1.5.8 抗凝活性  17-18
    1.5.9 其他功能  18
  1.6 β-1,3-葡聚糖酶的研究概况  18
    1.6.1 β-1,3-葡聚糖酶简介  18
    1.6.2 扇贝β-1,3-葡聚糖酶简介  18
  1.7 本课题的研究意义与研究内容  18-21
    1.7.1 研究目的和意义  18-19
    1.7.2 研究内容  19-21
第2章扇贝β-1,3-葡聚糖酶的提取和分离  21-27
  2.1 试验材料  21
  2.2 试验仪器  21-22
  2.3 试验方法  22-23
    2.3.1 粗酶的制备  22
    2.3.2 β-1,3-葡聚糖酶活力的测定  22
    2.3.3 β-1,3-葡聚糖酶的纯化  22-23
    2.3.4 β-1,3-葡聚糖酶相对分子质量测定  23
  2.4 结果与分析  23-25
    2.4.1 β-1,3-葡聚糖酶的纯化  23-25
    2.4.2 β-1,3-葡聚糖酶的SDS-PAGE检测  25
  2.5 讨论  25-27
第3章木耳寡糖的制备工艺及鉴定研究  27-36
  3.1 试验材料  27
  3.2 试验仪器  27
  3.3 试验方法  27-30
    3.3.1 β-1,3-葡聚糖酶酶解木耳多糖特性  27-28
    3.3.2 木耳寡糖的制备工艺及鉴定  28-30
  3.4 结果与分析  30-35
    3.4.1 pH对β-1,3-葡聚糖酶酶解木耳多糖的影响  30
    3.4.2 温度对β-1,3-葡聚糖酶酶解木耳多糖的影响  30-31
    3.4.3 反应时间对β-1,3-葡聚糖酶酶解木耳多糖的影响  31
    3.4.4 β-1,3-葡聚糖酶酶解木耳多糖的Km值  31-32
    3.4.5 木耳寡糖的制备工艺及鉴定结果  32-35
  3.5 讨论  35-36
第4章木耳寡糖抗氧化活性的研究  36-41
  4.1 试验材料  36
  4.2 试验仪器  36
  4.3 试验方法  36-38
    4.3.1 木耳寡糖清除超氧阴离子自由基能力的测定  36-37
    4.3.2 木耳寡糖清除DPPH自由基能力的测定  37-38
    4.3.3 木耳寡糖清除羟基自由基能力的测定  38
  4.4 结果与分析  38-40
    4.4.1 木耳寡糖对超氧阴离子自由基清除能力的测定  38-39
    4.4.2 木耳寡糖对DPPH自由基清除能力的测定  39-40
    4.4.3 木耳寡糖对羟基自由基清除能力的测定  40
  4.5 讨论  40-41
第5章木耳寡糖对三种细菌生长影响的研究  41-46
  5.1 试验材料  41
  5.2 试验仪器  41-42
  5.3 试验方法  42-43
    5.3.1 木耳寡糖对乳酸杆菌生长的影响  42
    5.3.2 木耳寡糖对大肠杆菌生长的影响  42-43
    5.3.3 木耳寡糖对产气肠杆菌生长的影响  43
  5.4 结果与分析  43-45
    5.4.1 木耳寡糖对乳酸杆菌生长的影响  43-44
    5.4.2 木耳寡糖对大肠杆菌生长的影响  44
    5.4.3 木耳寡糖对产气肠杆菌生长的影响  44-45
  5.5 讨论  45-46
结论  46-47
参考文献  47-53
致谢  53-54
攻读学位期间发表的学术论文  54-55

木耳寡糖制备工艺和生物活性的研究

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